[論文關(guān)鍵詞]體外循環(huán)；溫血灌注；心臟復(fù)蘇困難

[論文摘要]目的：總結(jié)體外循環(huán)心內(nèi)直視手術(shù)后并行心臟復(fù)蘇困難的原因及處理方法。方法：對(duì)我院2004年1月～2008年7月心內(nèi)直視手術(shù)18例心臟復(fù)蘇困難患者情況進(jìn)行回顧分析，處理方法包括再次阻斷升主動(dòng)脈溫血灌注、糾正酸堿電解質(zhì)失衡、藥物輔助及反復(fù)電擊除顫等。結(jié)果：18例患者均順利脫離體外循環(huán)。結(jié)論：體外循環(huán)心內(nèi)直視手術(shù)中心臟復(fù)蘇困難的原因與心臟本身病變、氣栓、酸堿電解質(zhì)失衡等因素有關(guān)。

我院2004年1月～2008年7月實(shí)施體外循環(huán)下心內(nèi)直視術(shù)患者225例，其中復(fù)蘇困難18例(除顫3次以上)，占總數(shù)的8％。現(xiàn)就我院體外循環(huán)下心內(nèi)直視手術(shù)復(fù)蘇困難的原因進(jìn)行分析。

1資料與方法

1.1臨床資料

全組發(fā)生心臟復(fù)蘇困難病例18例。其中，男性13例，女性5例。年齡3～81歲；體重9～71kg。其中，9例為心臟瓣膜病合并巨大左心室，心肌肥厚；3例為先天性心臟畸形合并重度肺動(dòng)脈高壓(室間隔缺損2例，室間隔缺損合并主動(dòng)脈竇瘤破裂1例)；4例術(shù)中出現(xiàn)嚴(yán)重高血鉀癥；2例出現(xiàn)冠狀動(dòng)脈氣栓。

【摘要】［目的］研究黃連不同炮制品的體外抑菌效果。［方法］將黃連不同炮制品水煎液置于培養(yǎng)基中與細(xì)菌同時(shí)溫育，觀察藥物對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖的影響，以此判斷藥物抑菌作用的強(qiáng)弱。［結(jié)果］以藥物最低抑菌濃度（MIC）顯示黃連不同炮制品均有抑菌作用，但作用強(qiáng)弱不同。［結(jié)論］黃連不同炮制品與生黃連一樣均有不同程度的抑菌作用，但作用菌群有變化。

【關(guān)鍵詞】黃連；體外抑菌；實(shí)驗(yàn)研究

Abstract：［Objective］Tostudytheinvitrobacteriostasiseffectofdifferentprocessedproductsofcankerroot.［Method］Putdifferentprocessedproductsofcankerrootdecoctionsinculturemediumandcultivatedwithbacteriainthesametime，observetheinfluenceofdrugsonbacteriagrowthtojudgethestrengthofbacteriostasis.［Result］ItshowsthebacteriostasisofdifferentproductswithMICbutindifferentstrength.［Conclusion］Differentprocessedproductsofcankerroothavethesamebateriostasisasrawcankerroot，butwithdifferentfunctionalbacteriagroups.

Keywords：cankerroot；bacteriostasisinvitro；experimentalstudy

黃連為常用中藥，臨床運(yùn)用廣泛，其有效成分為小檗堿。據(jù)古書記載黃連能治“腸辟腹痛，婦人陰中腫痛”，“瀉心火，去中焦?jié)駸帷保爸沃T瘡，赤眼暴發(fā)”等。近代研究證明黃連和小檗堿均有明顯的體外抑菌作用，而且抑菌范圍廣［1］。然而黃連不同炮制品臨床應(yīng)用也較常見，故筆者對(duì)黃連生品和幾種炮制品的水煎液的抑菌作用進(jìn)行了體外實(shí)驗(yàn)觀察，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1實(shí)驗(yàn)材料

1實(shí)驗(yàn)材料

1.1藥材原料黃連購自杭州華東醫(yī)藥藥材公司，為毛茛科植物黃連CoptisChinensisFranch的干燥根莖，根據(jù)《中國(guó)藥典》（2005版）鑒定為正品。其不同炮制品為：（1）生黃連：取原藥，成簇者掰開，除去泥沙等雜質(zhì)，搶水洗凈略潤(rùn)，切薄片，干燥。（2）炒黃連：取原藥，炒至表面棕黃色，微具焦斑時(shí)，取出，攤涼。（3）酒黃連：取黃連，與黃酒拌勻，稍悶，炒至表面色變深時(shí)，取去，攤涼。黃連與黃酒的比例為100∶12.5。（4）姜黃連：取黃連與姜汁拌勻炒至表面色變深時(shí)，取出，攤涼。黃連與姜汁的比例為100∶12.5。（5）萸黃連：取吳茱萸加適量水煎煮，煎液與凈黃連拌勻，待液吸盡炒干，取出，攤涼。黃連與吳茱萸的比例為100∶10。

1.2實(shí)驗(yàn)菌種由杭州市桐廬第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科微生物實(shí)驗(yàn)室提供。

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1水煎液的制備稱取黃連生品及各炮制品飲片10g，分別加10倍量蒸餾水浸20min后，加熱煮沸1h過濾，在藥渣中再加5倍量蒸餾水煮沸半小時(shí)后過濾，將兩次濾液合并，在沸水浴上濃縮成1g/ml濃度的水煎液備用。

2.2抑菌試驗(yàn)采用混合法進(jìn)行，將各炮制品水煎液的原液，分別用無菌蒸餾水作等倍稀釋（1/2～1/32），加入雙倍營(yíng)養(yǎng)瓊脂混合，傾注成平板。分別接種一定菌齡（12～16h）及一定濃度（80萬/ml）的實(shí)驗(yàn)菌液，置37℃溫箱培養(yǎng)，經(jīng)24h后觀察各細(xì)菌在不同藥物濃度中能否生長(zhǎng)，不生長(zhǎng)的藥物最低濃度，即為該藥物最低抑菌濃度（MIC）。

摘要：肝藥酶在藥物代謝中具有十分重要的作用。對(duì)肝藥酶的研究方法中，以動(dòng)物肝臟或肝細(xì)胞為基礎(chǔ)，構(gòu)建體外肝代謝系統(tǒng)是體外代謝研究中最重要的環(huán)節(jié)之一。對(duì)體外肝代謝的研究，主要是利用肝微粒體、基因重組CYP450酶系、肝細(xì)胞培養(yǎng)、肝組織切片及離體肝灌流系統(tǒng)等方法。本文綜述近年國(guó)內(nèi)外所應(yīng)用的不同體外肝代謝系統(tǒng)，并對(duì)各體外代謝研究方法進(jìn)行比較，指出根據(jù)各系統(tǒng)的特性、不同的實(shí)驗(yàn)要求和目的，選擇適當(dāng)?shù)难芯糠椒ǖ闹匾浴?/p>

關(guān)鍵詞：細(xì)胞色素P450酶；肝微粒體；肝細(xì)胞培養(yǎng)；肝組織切片；離體肝灌流

藥物代謝（drugmetabolism）一般是指藥物的生物轉(zhuǎn)化（drugbiotransformation）。藥物經(jīng)生物轉(zhuǎn)化后，可引起藥物的藥理活性或∕和毒理活性的改變。因此，研究藥物的生物轉(zhuǎn)化，明確其代謝過程，對(duì)新藥開發(fā)、新劑型設(shè)計(jì)及制定合理的臨床用藥方案等方面都具有重要的指導(dǎo)意義。肝臟是藥物生物轉(zhuǎn)化的重要器官，含有參與藥物代謝重要的酶系（細(xì)胞色素P450酶，cytochromeP450，CYP450)，該酶系參與藥物及各種內(nèi)源性和外源性化合物在體內(nèi)的代謝過程。CYP450酶系由三十多種同工酶（亞型）組成，主要有CYP1、CYP2、CYP3三大家族［1］。本文所介紹的各種體外代謝系統(tǒng)均含有一種或多種CYP450酶的同工酶，為研究藥物體外代謝提供了研究的對(duì)象和基礎(chǔ)。動(dòng)物肝體外代謝研究可以較好地排除體內(nèi)因素干擾，直接觀察酶對(duì)底物代謝的選擇性，為整體試驗(yàn)提供可靠的科學(xué)依據(jù)。以肝臟為基礎(chǔ)的體外代謝系統(tǒng)主要包括肝微粒體、基因重組CYP450酶系、肝細(xì)胞、肝組織切片及離體肝灌流。

1肝微粒體

1.1肝微粒體的制備

多數(shù)采用差速離心法［2］，通過高速離心使微粒體與其他成分分離，操作簡(jiǎn)單，無需其他試劑輔助。但較耗時(shí)，設(shè)備要求高，使該法的普及和深入研究受到一定的限制。針對(duì)這些情況，可采用試劑輔助分離的方法［3］，在離心前額外加入一定比例的PEG6000或CaCl2，促進(jìn)微粒體沉降。此法對(duì)設(shè)備要求降低，并縮短了實(shí)驗(yàn)周期。肝微粒體的制備過程均應(yīng)在4℃下進(jìn)行。正確、合理地選擇緩沖液，能起到良好介質(zhì)的作用，按比例加入后進(jìn)行肝組織的破碎和勻漿，才可有效分離肝微粒體和避免細(xì)胞器受損。

【摘要】目的探討共培養(yǎng)體系中體細(xì)胞對(duì)胚胎早期發(fā)育的影響及比較2種常用共培養(yǎng)體系的優(yōu)劣。方法實(shí)驗(yàn)分3組:同種不同類型體細(xì)胞,受精卵分別在含顆粒細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的M199培養(yǎng)液中培養(yǎng);異種同類型體細(xì)胞,受精卵分別在含牛顆粒細(xì)胞和小鼠顆粒細(xì)胞中M199培養(yǎng)液中培養(yǎng);2種共培養(yǎng)體系比較,受精卵分別在“M199+顆粒細(xì)胞”和“B2+Vero細(xì)胞”的共培養(yǎng)體系中培養(yǎng)。結(jié)果顆粒細(xì)胞組較成纖維細(xì)胞組囊胚率高(P<0.05);牛顆粒細(xì)胞組和小鼠顆粒細(xì)胞組在卵裂率和囊胚率方面差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;“M199+顆粒組”在卵裂率和囊胚率方面與“B2+Vero組”差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但囊胚細(xì)胞數(shù)較少(P<0.05)。結(jié)論在一定的條件下,共培養(yǎng)體系中體細(xì)胞對(duì)胚胎早期發(fā)育有一定影響;“B2+Vero細(xì)胞”的共培養(yǎng)體系優(yōu)于“M199+顆粒細(xì)胞”的共培養(yǎng)體系。

【關(guān)鍵詞】胚發(fā)育共培養(yǎng)

ABSTRACT:ObjectiveTostudytheeffectofsomaticcellcoculturesystemontheearlybovineembryodevelopmentandcomparisonoftwodifferentcoculturesystems.MethodsExperiment1:thesomaticcellswereofthesamebreedbutdifferenttypes(granulecellgroupandfibroblastgroup);experiment2:thesomaticcellswereofthesametypebutdifferentbreeds(bovinegranulecellgroupandmousegranulecellgroup);experiment3:comparetwococulturesystem(M199+granulecellgroupandB2+Verocellsgroup).ResultsInexperiment1,granulecellgroupwassimilartofibroblastgroupincleavageratebuthigherinblastocystrate;inexperiment2,therewasnodifferencebetweentwogroupsincleavagerateandblastocystrate;inexperiment3,therewasnodifferencebetweentwogroupsincleavagerateandblastocystrate,buttotalcellnumberofblastocystsinB2+VerocellsgroupwashigherthanthatofM199+granulecellgroup.ConclusionSomaticcellcoculturesystemmayhaveaneffectontheearlyembryodevelopmentsomeconditions,andthecoculturein“B2+Verocells”isbetterthanin“M199+granulecells”forbovineearlyembryodevelopment.

KEYWORDS:embryo;development;coculturesystem

目前,胚胎早期發(fā)育體外培養(yǎng)體系可以分為合成液培養(yǎng)體系和共培養(yǎng)體系。合成液培養(yǎng)體系是利用成分確定的合成培養(yǎng)液,該體系成分明確,便于研究胚胎發(fā)育過程中每一種物質(zhì)對(duì)胚胎的作用機(jī)制,但桑椹胚和囊胚發(fā)育率不高。胚胎體外共培養(yǎng)體系是指胚胎與體細(xì)胞一起在培養(yǎng)液中共同培養(yǎng)以促進(jìn)胚胎的體外發(fā)育。共培養(yǎng)體系可以獲得較高的囊胚發(fā)育率,而高囊胚發(fā)育率是許多科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐所追求和必需的。

為探索胚胎早期發(fā)育最佳的體外培養(yǎng)體系，特別是胚胎與體細(xì)胞共培養(yǎng)體系，人們已取得一定成果[1]，但仍有許多問題尚不明確。本研究以奶牛胚胎為受試對(duì)象，探討共培養(yǎng)體系如何提高胚胎的囊胚發(fā)育率,體細(xì)胞的效應(yīng)有無種間差異及不同類型的同種體細(xì)胞有無差異。

【摘要】目的探討厚樸的體外抑菌作用。方法用KB紙片擴(kuò)散法。100%厚樸浸出液濾紙片對(duì)金黃色葡萄球菌、白色葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、傷寒桿菌、甲型鏈球菌、乙型鏈球菌抑菌作用進(jìn)行研究。結(jié)果厚樸對(duì)以上細(xì)菌均有明顯抑菌作用。結(jié)論厚樸在體外有明顯的抑菌作用。

【關(guān)鍵詞】厚樸體外抑菌

AbstractObjectiveTostudytheinvitrogrowth-inhibitoryeffectofMORonbacteria.MethodsK-Bpaperdispersionmethodwasusedandthepaperwaspresoakedwith100%MORwaterextract.WeobservedtheinhibitoryeffectofcircularfilterpaperpiecesofMORonStaphylococcusaureus,Staphylococcusepidermidis，P.aeruginosa，E.coli，S.typhi，α-hemolyticstreptococcus，β-hemolyticstreptococcus.ResultsTheherbhadobviouseffectofgrowthinhibitiononbacteria.ConclusionMORhassignificanteffectofgrowthinhibitioninvitroonbacteria.

KeywordsEuphorbiahumifusaWilld.(MOR)；Invitrogrowthinhibition

厚樸為木蘭科落葉喬木植物厚樸MagnoliaofficinalisRehd．etWils．或凹葉厚樸M．officinalisRehd．etWils．var．bilobaRehd．etWils．的干皮、根皮及枝皮［1］。主產(chǎn)于四川廣元、滎經(jīng)、豐都、城口，湖北恩施、宜昌、利川，浙江龍泉、遂昌，福建浦城、松溪，湖南衡陽、彬縣等地，江西、廣西、甘肅、陜西等地也有出產(chǎn)，以四川、湖北所產(chǎn)者量大質(zhì)優(yōu)，野生與栽培均有。主要功效：行氣，燥濕，消積，平喘。為觀察中藥厚樸的體外抑菌作用，對(duì)其進(jìn)行了相關(guān)的抑菌實(shí)驗(yàn)研究，旨在為臨床應(yīng)用厚樸提供理論依據(jù)。

1材料

摘要:目的：研究如何提高體外培養(yǎng)人牙周膜細(xì)胞（hPDL）的成功率，為簡(jiǎn)便、快速地獲得大量成活率高的hPDL膜細(xì)胞，建立體外細(xì)胞模型提供一定的實(shí)驗(yàn)方法。方法：利用3種不同方法（組織塊法、酶消化組織塊法、全牙消化法）進(jìn)行牙周膜細(xì)胞的原代培養(yǎng)，用形態(tài)學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)染色等方法鑒定細(xì)胞來源；通過生長(zhǎng)曲線的測(cè)定研究體外細(xì)胞生長(zhǎng)特性。結(jié)果：3種方法獲得的細(xì)胞形態(tài)和生物學(xué)行為大致相同；波絲蛋白抗體染色陽性，角蛋白抗體染色陰性。組織塊法培養(yǎng)的細(xì)胞同源性好，但初代培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)；全牙消化法的原代培養(yǎng)成功率高于其他2種方法。結(jié)論：通過對(duì)牙周膜細(xì)胞培養(yǎng)方法的改良，可以顯著提高h(yuǎn)PDL原代培養(yǎng)的成功率。

關(guān)鍵詞:牙周膜細(xì)胞培養(yǎng)免疫組織化學(xué)

細(xì)胞體外分離培養(yǎng)是研究復(fù)雜的生物系統(tǒng)的重要手段，細(xì)胞培養(yǎng)條件下，將細(xì)胞從復(fù)雜的體內(nèi)環(huán)境轉(zhuǎn)移到較為簡(jiǎn)單的體外環(huán)境，可對(duì)細(xì)胞學(xué)研究中的變量進(jìn)行分離和控制。上世紀(jì)70年代以來，國(guó)外學(xué)者對(duì)牙周膜細(xì)胞（PeriodontalLigamentCellsPDL）分離純化進(jìn)行了大量的探索和研究，且成功地從猴、豬、人等牙周膜分離培養(yǎng)出牙周膜細(xì)胞［1～3］。人牙周膜細(xì)胞（hPDL）分離培養(yǎng)主要有酶消化法和組織貼塊法［4］。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)這2種方法評(píng)價(jià)不一，并且在這2種方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)提出了酶消化組織塊法和全牙消化法［5］。對(duì)組織塊法、酶消化組織塊法和全牙消化法這3種方法做了一些比較，以尋求hPDL體外培養(yǎng)的最佳方法。

1、材料和方法

1.1試劑及主要實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備

α-MEM培養(yǎng)液（Hyclone，USA），膠原酶（TypeI，Sigma，USA），胎牛血清（杭州四季青），胰蛋白酶（配成0.25%,過濾分裝，冷凍保存），青霉素100U/ml，鏈霉素100mg/L；SABC免疫組織化學(xué)試劑盒（武漢博士德），角蛋白抗體及波絲蛋白抗體（武漢博士德），二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱，倒置相差顯微鏡，血球計(jì)數(shù)板。

摘要：大劉坡橋位于天津?qū)氎婵h境內(nèi)九園公路的潮白河上。橋全長(zhǎng)790.3米，橋面寬度9米（即1+7+1），上部結(jié)構(gòu)為56孔、5片跨徑14.1米的普通鋼筋混凝土T型簡(jiǎn)支梁橋，橫橋向有3道橫隔板。橋面鋪裝為鋼筋混凝土（7.5~11~7.5厘米）和3厘米瀝青混凝土面層。每8孔為一道伸縮縫，其間為橋面連續(xù)鋪裝。

關(guān)鍵詞：體外預(yù)應(yīng)力加固T梁橋

大劉坡橋位于天津?qū)氎婵h境內(nèi)九園公路的潮白河上。橋全長(zhǎng)790.3米，橋面寬度9米（即1+7+1），上部結(jié)構(gòu)為56孔、5片跨徑14.1米的普通鋼筋混凝土T型簡(jiǎn)支梁橋，橫橋向有3道橫隔板。橋面鋪裝為鋼筋混凝土（7.5~11~7.5厘米）和3厘米瀝青混凝土面層。每8孔為一道伸縮縫，其間為橋面連續(xù)鋪裝。舊T型梁外形（如圖1）。舊梁設(shè)計(jì)荷載等級(jí)：汽-13、拖-60。

下部結(jié)構(gòu)墩柱及蓋梁是在原橋位上游側(cè)95年重新設(shè)計(jì)建造的，為單排雙樁（柱）式，荷載等級(jí)：汽-20、掛-100。受公路發(fā)展公司委托，我院于4月12~13日對(duì)該橋進(jìn)行了檢查。由于原有公路的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)低（汽-13、拖-60），通行能力差，加之目前交通量的增加和汽車載重的增加，上述舊橋是不能滿足承載力要求的。受資金和材料資源及斷交時(shí)間的限制，也不可能全部拆除并新建，只能考慮投資較少，工期時(shí)間短且能增加承載力的各種橋梁加固技術(shù)予以改造。這其中采用體外預(yù)應(yīng)力鋼筋加工技術(shù)，確為一種簡(jiǎn)單易行且能與新建下部結(jié)構(gòu)荷載（汽-20、掛-100）看齊的有效方法。

體外預(yù)應(yīng)力加固方法的實(shí)質(zhì)是以粗鋼筋、鋼絞線或高強(qiáng)型鋼等鋼材做為施力工具，對(duì)橋梁上部結(jié)構(gòu)施加體外預(yù)應(yīng)力，以其產(chǎn)生的反彎矩抵消部分外荷載產(chǎn)生的內(nèi)力，從而達(dá)到改善舊橋使用其性能并提高其極限承載力的目的，本橋只涉及粗鋼筋的體外預(yù)應(yīng)力加固提高荷載方案。

一、體外預(yù)應(yīng)力構(gòu)造：主要由四個(gè)部分組成

由于在體外循環(huán)過程中需進(jìn)行一定程度的血液稀釋，尤其是近年來臨床廣泛使

用的中度和深度血液稀釋，更要求在體外循環(huán)過程中排除大量的水分，保持患者體

內(nèi)液體、電解質(zhì)和酸堿平衡，因此利尿劑在體外循環(huán)中的使用是相當(dāng)廣泛的。甘露

醇作為一種滲透性利尿劑問世以來，在醫(yī)學(xué)界受到廣泛的關(guān)注并應(yīng)用于臨床的各個(gè)

領(lǐng)域。根據(jù)以往的文獻(xiàn)，在體外循環(huán)轉(zhuǎn)流中，甘露醇主要作用于患者的腎臟，新的

研究結(jié)果表明，甘露醇對(duì)腦、肺、心、胃腸道、紅細(xì)胞及自由基、一氧化氮也有一

1材料與方法

1.1一般資料

2005年3月～2008年5月我科采用體外沖擊波碎石（ESWL）治療泌尿系結(jié)石患者1860例，其中男1193例，女667例；年齡最大72歲，最小11歲，平均37歲。結(jié)石部位：腎結(jié)石1080例，輸尿管上段結(jié)石336例，輸尿管中段結(jié)石324例，輸尿管下段結(jié)石120例。

1.2方法

體外沖擊波碎石與腎鏡、輸尿管鏡碎石加置管對(duì)1860例泌尿系結(jié)石患者進(jìn)行綜合治療、精心護(hù)理，并觀察療效。

2結(jié)果