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篇1

【摘要】 【目的】觀察穴位經皮給藥藥貼對實驗性哮喘豚鼠血清中環氧化酶2(COX2)水平的影響。【方法】將48只豚鼠隨機分為正常對照組、模型組、地塞米松組和經皮給藥藥貼組，每組各12只。除正常對照組外，各組豚鼠均采用卵白蛋白致敏法復制實驗性過敏性哮喘模型。經皮給藥藥貼組采用大椎、肺俞、腎俞穴位貼敷治療，地塞米松組采用腹腔注射地塞米松05 mg/kg治療。采用酶聯免疫吸附法檢測各組豚鼠血清COX2水平，采用蘇木素—伊紅染色檢測各組豚鼠支氣管肺組織病理形態變化。【結果】模型組豚鼠血清COX2水平顯著高于正常對照組(P

【關鍵詞】 經皮給藥藥貼/治療應用;支氣管哮喘/穴位療法;環氧化酶2/血液;疾病模型，動物;豚鼠

哮喘是以多種炎癥基因表達增加或異常表達為特征，由多種炎癥細胞(嗜酸性粒細胞、T淋巴細胞、肥大細胞、巨噬細胞等)和氣道結構細胞(上皮細胞、血管內皮細胞、平滑肌細胞等)及細胞組分(細胞因子、化學因子、黏附分子、酶類和受體)參與的一種氣道慢性炎癥性疾患[1]。環氧化酶2(COX2)是一種誘導酶，它能促進細菌脂多糖、炎性細胞因子、生長因子和腫瘤啟動子的產生，與炎癥反應及腫瘤發生相關 [2] 。在哮喘的病理生理過程中COX2可能起了關鍵作用 [3] 。

近年來，應用穴位貼敷療法治療哮喘的研究較多[4] ，經皮給藥系統是藥物經由皮膚吸收進入人體血液循環，并達到有效血藥濃度、實現疾病治療或預防的一類貼劑(或貼片) [5] 。本實驗根據清代《張氏醫通》中記載的消喘膏加用麻黃為處方，利用現代藥物提純和經皮給藥技術制作成一種藥貼，觀察穴位貼敷經皮給藥藥貼對哮喘模型豚鼠血清COX2水平的影響，并探討其治療哮喘的療效機制。現報道如下。

1材料與方法

11實驗藥物、儀器及試劑雞卵白蛋白(美國Sigma公司，批號：A5253)由廣州市威佳科技有限公司提供，地塞米松注射液由廣州白云山制藥廠提供，經皮給藥藥貼藥物質量比為：白芥子∶麻黃∶延胡索∶甘遂∶細辛=2∶2∶2∶1∶1，由南方醫科大學中藥制劑實驗室制備。WH22000型超聲霧化儀由廣東粵華公司生產，Multiskan II ELISA檢測儀由芬蘭生產，LD42A型水平離心機由北京醫用離心機廠生產，BX50生物組織顯微鏡由日本Olympus公司生產，EG1140石蠟包埋機、TP1020生物組織自動脫水機、RM2050石蠟切片機均為德國徠卡公司產品，COX2酶聯免疫吸附(ELISA)試劑盒由武漢博士德生物有限公司提供(產品編號為EK0603)。

12實驗動物分組及造模48只成年豚鼠，雌雄各半，體質量200～250 g，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供(動物質量合格證號:0031706)。所有豚鼠隨機分為正常對照組、模型組、經皮給藥藥貼組和地塞米松組，每組各12只。控制室溫，各組在相同條件下飼養，先將動物飼養3 d適應環境后開始造模。第4天，除正常對照組外，其他各組均采用雞卵白蛋白致敏，常規消毒后一次性腹腔注射100 g/L卵白蛋白生理鹽水1 mL，使豚鼠處于致敏狀態[6]。第18天開始，將致敏的豚鼠置于密閉透明的塑料盒內，給予10 g/L卵白蛋白生理鹽水混懸液霧化吸入加以激發，每次30 s，1次/d，連續14 d，以腹式呼吸明顯，呼吸頻率加快且節律不整，活動減少等癥狀為誘喘成功。正常對照組以生理鹽水代替卵白蛋白生理鹽水，其致敏及誘喘時間同造模組。

13治療方法于哮喘發作次日開始治療：地塞米松組采用腹腔注射地塞米松05 mg/kg，隔天治療1次，共治療7次。經皮給藥藥貼組進行穴位貼敷治療，穴位選擇：大椎穴、肺俞穴(雙)、腎俞穴(雙)[7]。具體方法：將豚鼠頸背部穴位處用寵物電剪刀剪毛，剪毛范圍：縱向大椎至腎俞，橫向脊柱兩側各旁開15 cm，用大塊膠布將藥物敷貼固定于穴位處。每次敷藥6 h，治療時間與次數同地塞米松組。模型組造模成功后令其自然恢復，正常對照組不給予任何干預治療。

14樣本制備在末次誘喘后2～4 h內，給豚鼠稱體質量，用30 g/L戊巴比妥鈉按50 mg/kg腹腔注射麻醉豚鼠，迅速斷頭取血，每只取5 mL，室溫放置2 h后，3 000 r/min離心15 min，取上清液，放冰箱-20 ℃保存待測。同時迅速打開胸腔，暴露肺及心臟，常規取支氣管肺組織，避免鉗夾組織引起組織受壓影響觀察，取材部位：右中下肺取一橫切面，包括肺門。所取組織經100 g/L多聚甲醛固定，常規石蠟包埋和切片(厚4 μm)待測。

15檢測方法采用ELISA法定量檢測各組豚鼠血清中COX2水平，嚴格按照試劑盒說明的方法和要求操作。采用光鏡觀察各組經蘇木素—伊紅(HE)染色切片的支氣管肺組織形態變化。

16統計學方法所有實驗數據均在SPSS 130上建立數據庫、進行數據錄入與統計分析。各組間差異采用單向方差分析(OneWay ANOVA)，方差齊用LSD檢驗，方差不齊用Tamhanes檢驗，檢驗水平α=005。

2結果

21動物數量實驗結束后，共剩豚鼠30只，每組隨機取6只，共24只納入結果分析。

22各組豚鼠血清COX2水平比較表1結果顯示：模型組豚鼠血清COX2水平顯著高于正常對照組(P

23各組支氣管肺組織形態觀察結果正常對照組支氣管黏膜上皮完整，平滑肌無明顯的增厚，肺泡壁清晰完整，間隔形態正常，無明顯的炎癥細胞表1各組豚鼠血清COX2水平比較(x±s)浸潤。模型組支氣管管壁黏膜上皮細胞受損和脫落明顯，氣道壁不完整，黏膜下層炎癥明顯，氣道平滑肌增厚，膠原纖維增加，管腔狹窄，氣道腔內黏液分泌增多，黏液栓堵塞，氣道周圍嗜酸性粒細胞明顯增加，肺泡內可見彌漫性慢性炎細胞浸潤、管腔變窄，肺泡基本上實變，充滿炎癥細胞，有肺大泡形成，肺泡間隔有明顯充血。地塞米松組支氣管黏膜上皮基本完整，管壁平滑肌層有輕度的增厚，間質炎癥細胞較少，肺泡間隔基本完整，腔內有少量的炎癥細胞，肺泡間隙輕度充血以及有少數的炎癥細胞浸潤。經皮給藥藥貼組支氣管的黏膜上皮基本完整，平滑肌層有輕度的增厚，管周有少量的炎癥細胞，肺泡完整，間質輕度充血，結果見圖1(彩圖見第317頁)。

3討論

支氣管哮喘(哮喘)是當今世界最常見的慢性疾病，其病理生理改變以氣道慢性非特異性炎癥、氣道反應性增高及氣道重建為主要特征，三者相互作用、互相影響 [8] 。

哮喘的治療目前國內外首選消除非特異炎癥的糖皮質激素，但由于副作用大、成癮性強及易反復發作等缺點的存在，使其有效應用受到一定限制。穴位敷貼治療哮喘則是在傳統中醫針灸理論指導下發揮其獨特療效的 [9] 。 穴位敷貼給藥為一古老的中醫外治法，具有不經消化系統破壞和肝臟分解，維持較長時間且穩定的血藥濃度，從而使藥物作用時間長而穩定的優點。而且由于穴位給藥，藥物成分通過經絡感傳影響多層次的生理功能，它們之間可能產生相互激發和協調作用，導致生理上的放大效應，使藥物的外治效果可能優于內服 [10-11] 。本實驗光鏡觀察到的結果從病理角度驗證了穴位貼敷經皮給藥藥貼治療豚鼠哮喘的有效性。

哮喘的本質是炎性反應，來自體液直接反映炎癥存在情況的細胞因子或炎癥介質成為近年來的研究重點，如炎性反應環節中起著關鍵作用的COX2，已被視為快速炎癥反應的重要標志之一 [12] 。 COX2主要存在于氣道上皮細胞和平滑肌細胞，生理狀態下它幾乎不被表達，只有在炎性細胞因子或炎性介質將細胞激活的情況下才被表達[13]。哮喘患者氣道黏膜中有大量的單核—巨噬細胞、嗜酸性粒細胞及中性粒細胞浸潤，被激活后可產生大量的COX2，COX2是一種炎性酶，它的表達可誘導多種炎癥介質的表達，如前列腺素E2(PGE2)、白細胞介素6(IL6)、IL8、IL18等，這些炎癥介質又加重了炎癥反應，從而誘發哮喘或使哮喘加重，而且COX2的過度表達與氣道重塑和氣道氣流阻塞程度加重有關 [14-17] 。

本研究結果顯示，模型組豚鼠血清COX2水平顯著高于正常對照組(P

參考文獻

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篇2

關鍵詞：應用寫作；文書；教學

中圖分類號：G632.0 文獻標志碼：B 文章編號：1674-9324（2012）04-0146-02

應用寫作是應用于日常生活、學習、工作和公務活動的只有實際應用價值與直接社會效用的文書寫作。它是人們交流思想、互通情況、解決問題、處理事務的工具。正是基于這一點，作為語文學科的寫作教學，則自動地成為訓練學生應用寫作能力的基本途徑和快捷方式。以往的高中寫作教學多屈從于教材的訓練體系，是一種單向的以基礎寫作為主的應試寫作。

一、應用寫作的基本要求

1.在內容上，真實可靠，言必有證，不虛構夸張，不隱瞞曲折。應用寫作不同于文學寫作，它所用的材料必須真實可靠，符合實際，不允許有任何夸張，所交代的時間、地點、人物、事件和原因結果，都必須真實，不允許虛構。這一話題，它更深遠的意義在于對于現代社會公民的誠信檢驗。例如，在一些剛剛步入社會求職的大學生的求職文書中，存在著的大量虛假陳述。

2.在結構上，遵循常規，有慣用程式，不追求新奇，不講究波瀾。絕大多數的應用文都有相對穩定的文體格式。這種格式不是誰創造出來的，而是在長期的使用過程中逐步形成的。按照慣用的程式去辦，就有利于閱讀和處理。

3.在語言上，平實、精煉、準確、得休，不尚婉轉含蓄，不務繁飾華麗這樣就決定了應用文的語言必須寫得平實、精煉、準確、得體。

4.在使用上，講究時效，直接作用現實，為現實社會生活需要服務。應用寫作必須及時地為現實的社會生活服務，今天要發出的文書必須今天發出，不能等到明天；明天要的情報必須等到明天，不能提前泄露。

二、高中應用寫作的文科范疇

結合現實高中生生活實際及語文學習實際，課堂的應用寫作的文種范疇主要有以下十二類。

1.一般書信。一般書信，是指個人間來往的信件。它要求寫得得體、達意、有禮貌。它有格式的約定。正文、結尾、署名和日期等都有既定的要求。

2.專用書信。專用書信，指用于機關、團體、企事業單位之間，具有專門作用的信件。主要有介紹信、證明信、表揚信、感謝信、賀信、慰問信、申請書、聘書等。和一般書信一樣，每一種專用書信也都有固定的格式。

3.條據。條據包括“條”和“據”兩個方面。“條”即便條，是一種簡單的信，多用于處理臨時性的日常事務。有請假條、留言條和一般便條等。“據”即單據，是錢物來往的一種信用憑證，作為對方存查的證明或證據。這種信用憑證有正式單據，如稅務部門監制的定式發票；也有時臨時書寫的便條式的單據，如借條、欠條、收條、領條等。

4.通知、公約、規則。通知是一種告知一定事項的公文名稱。公約是指集體為了維護紀律和公共秩序，更好保證學習、生產、生活，在自覺自愿的基礎上通過協商制定的共同道守的行為規范。規則與公約相接近，有時它也可以是部門的強制規定。它們的格式一般包括標題、正文和結尾三部門。

5.廣告文本。廣告是企業、事業單位或個人通過報刊、廣播、電視、網絡等公共媒介，向公眾介紹商品、報道服務內容、提供文娛信息、獲取預期收益的一種宣傳方式。基于這一文字方式，就構成了廣告文本的寫作，它的語文形式則有更靈活的表現。

6.啟事和海報。啟事，就是把要公開說明的事或要求公眾幫助解決的問題公諸于眾的簡明文字。海報是向公眾報告文化娛樂和體育消息等與群眾生活密切相關消息的一種招貼。

7.請求、邀請函等生活禮儀文書。請柬，也稱請帖，是為請客而發出的禮節性的通知書。它是人們在社會交際中和社會活動中的常用文書。現在一般用定制的印刷品，寫作者只須在相應位置填寫補白即可。邀請函，也即邀請書，是為了請別人到自己的地方來或到約定的地方去而發出的禮節性書信。它是較請柬稍復雜的邀請文書，使用場合也較正規、盛大。

8.計劃、總結、調查報告。計劃是為完成一定時期的任務而事前對目標、措施和步驟級作出簡要部署的事務性文件。總結是對某一階段或某項工作的系統回顧、深入分析、歸納經驗教訓，從中得出規律性認識，以指導今后工作的一種事務性文書。調查報告是記載調查成果的書面報告。三者有一定的共性，也存在各自不同的寫作要求。

9.新聞文本。新聞是一門綜合性很強的實用文書形式。這泛指新聞報道的各種體裁，主要有廣播稿、板報稿、消息、通訊、紀實報道等。其中的消息是指簡明扼要地報道最新發生的有社會價值的事實的一種新聞文體；通訊則是從消息演化而來的，它較之消息更具體形象地反映有新聞價值的生活。

10.日記、讀書筆記。日記屬于記敘性散文，表達方式靈活，有話則長，無話則短，是人的思想和行為的真實反映。它可以是備忘式的，可以是紀實性的，也可是隨感式的，等等，不一而足。而讀書筆記則是指我們在閱讀各類讀物時，對所讀讀物所作的勾畫、摘錄、評點、質疑等文字（書面）表達。其中以讀后感和札記較為書面化。

11.講演稿。講演稿也叫演說辭，是在公眾場合或會議發表講話的文稿。它的特點是能使講演者和聽眾在時空上緊密地結合在一起，它有很強的說服力和感染力，有強烈的鼓動性。它應包含有“講”和“演”的兩重成分。