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篇1

關(guān)鍵詞：血液分析儀；血涂片；顯微鏡檢查；血常規(guī)

Microscopic Examination of Bblood Smears on the Necessity of Analyzing Blood Tests

ZHANG Qun-ying,XIANG Jun-jun

(Longquanyi District Hospital of traditional Chinese Medicine,Chengdu 610100,Sichuan,China)

Abstract：ObjectiveTo investigate and demonstrate the need for microscopic examination of blood smears when the blood of the inspection . MethodsFebruary 2013-October 2013 period were 980 blood specimens using blood analyzers to check for compliance with inspection standards which 400 specimens of blood smear microscopy of blood samples from 400 blood smear microscopy check the results with the results of the use of the blood analyzer checks were analyzed. ResultsHematology analyzer test results with the results of microscopic examination of blood smears 259 cases (64.75%) match, 141 cases do not match (35.25%) embodied in: blood analyzer test results showed normal or elevated WBC, N rises, blood abnormal smear microscopy result was 18.25% (73/400), when the WBC normal or elevated or lowered, B, M count changes, abnormal results of blood smear microscopy was 11.5% (46/400), is about WBC normal or elevated or reduced, while RBC, HB, MCV, RDW and other indicators of abnormal red blood cell morphology changes significantly, mainly for the red blood cell size, high pigmented. ConclusionBlood smear microscopy can improve the accuracy of the test results of blood samples , can provide a more reliable basis for clinical diagnosis of doctors, attention should be paid .

Key words：Blood analyzer ; Blood smears ;Microscopy ;Blood

血涂片顯微鏡檢查是指在普通光學(xué)顯微鏡下對(duì)血細(xì)胞分類及血細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行觀察和檢查的一種醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)方法，是血液形態(tài)學(xué)檢驗(yàn)的基本方法[1]。但如今隨著檢驗(yàn)人員工作量的增加，隨著血細(xì)胞分析儀的普及，血涂片顯微鏡檢查在血常規(guī)檢驗(yàn)中逐漸被忽略[2]。白細(xì)胞分類檢查是血常規(guī)檢查中最重要的一項(xiàng)內(nèi)容，但即使國內(nèi)外最先進(jìn)的五分類血細(xì)胞分析儀，對(duì)于白細(xì)胞分類檢查也僅僅作為一種過篩手段，因此，無法完全取代血涂片顯微鏡檢查，從而造成了血常規(guī)檢查的誤診或漏診[3]。本組研究筆者對(duì)2013年5月~12月980份血液標(biāo)本中符合檢查標(biāo)準(zhǔn)的400份血液標(biāo)本的血涂片進(jìn)行回顧性分析，

1資料與方法

1.1一般資料將2013年5月~12月共980份血液標(biāo)本采用血液分析儀檢查，對(duì)其中符合檢查標(biāo)準(zhǔn)的400份標(biāo)本進(jìn)行血涂片瑞氏染色，瑞氏染液嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第3版要求配制[4]，染色后在顯微鏡下進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察，所用的血液分析儀為Mindray BC-5600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，所用顯微鏡為日本Olympus CX-21生物顯微鏡。

1.2方法本組研究中各種檢查所用儀器均按要求進(jìn)行日常維護(hù)，并做室內(nèi)質(zhì)控，保證檢查結(jié)果的準(zhǔn)確與可靠。將血液分析儀檢測(cè)結(jié)果與血涂片顯微鏡檢查結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。

2結(jié)果

血液分析儀檢測(cè)結(jié)果與血涂片顯微鏡檢查結(jié)果259例（64.75%）相符，141例不相符（35.25%），具體體現(xiàn)在：血液分析儀檢測(cè)結(jié)果顯示W(wǎng)BC正?；蛏?，N升高時(shí)，血涂片顯微鏡檢查結(jié)果異常率為18.25%（73/400），當(dāng)WBC正常或升高或降低，B、M計(jì)數(shù)改變時(shí)，血涂片顯微鏡檢查結(jié)果異常率為11.5%（46/400），即將WBC正常或升高或減低， RBC、HB、MCV、RDW等指標(biāo)異常時(shí)，紅細(xì)胞形態(tài)有明顯變化，見表1。

3討論

近年來，隨著血細(xì)胞分析儀的迅速發(fā)展，檢測(cè)項(xiàng)目也從原來白細(xì)胞的二分類、三分類發(fā)展為目前的五分類，而且血細(xì)胞分析儀檢測(cè)方法也不斷在更新，因此，我國臨床各級(jí)醫(yī)院越來越依賴于血細(xì)胞分析儀，而且血細(xì)胞分析儀的出現(xiàn)給工作量極大的檢驗(yàn)工作者帶來了更高的效率。有調(diào)查結(jié)果顯示，某市15所三級(jí)及二級(jí)醫(yī)院，其中40%的醫(yī)院基本不進(jìn)行血常規(guī)檢驗(yàn)的血涂片顯微鏡檢查工作[5]。有研究顯示，我國各級(jí)各類醫(yī)院對(duì)血液標(biāo)本進(jìn)行血涂片顯微鏡下檢查的重視程度也存在較大差異[6]。

血液分析儀顯微鏡檢查包括白細(xì)胞分類、紅細(xì)胞形態(tài)觀察、血小板形態(tài)觀察及分布等，迄今為止，即使再先進(jìn)的血液分析儀的工作原理也是通過了解細(xì)胞大小、細(xì)胞所含固形物的多少、細(xì)胞所含固形物的成份等來對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分類，但這一過程易受到各種因素的影響。目前國內(nèi)使用的Mindray BC-5600全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行五分類是根據(jù)白細(xì)胞體積大小而分類的，不僅對(duì)嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞及幼稚細(xì)胞進(jìn)行區(qū)分，而且對(duì)異型淋巴細(xì)胞及中性粒細(xì)胞毒性改變不能加以識(shí)別，更重要的是，這種分類方法會(huì)將小粒細(xì)胞作為中間細(xì)胞，大片成簇的血小板作為白細(xì)胞?？傊?，目前的血液分析不能對(duì)血細(xì)胞核大小、形態(tài)、核中染色質(zhì)情況、核仁大小、形態(tài)及細(xì)胞內(nèi)特殊物質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確判斷，而且細(xì)胞具有的多態(tài)性、異型淋巴細(xì)胞及原始細(xì)胞等細(xì)胞的結(jié)構(gòu)、形態(tài)及內(nèi)含物質(zhì)的變化，均是血液分析儀無法準(zhǔn)確判斷的[7]，因此，對(duì)于白血病、類白血病及傳染性單核細(xì)胞增多癥等細(xì)胞數(shù)量大小變化不大的疾病則難以診斷[8]。

血涂片顯微鏡檢查是指血液經(jīng)推片、染色后在光學(xué)顯微鏡下觀察紅細(xì)胞、血小板形態(tài)、進(jìn)行白細(xì)胞分類及寄生蟲檢查等的一種人工檢驗(yàn)方法，血涂片顯微鏡檢查在臨床診斷各種疾病中有著重要的作用，如白血病的初診以血涂片顯微鏡檢查中發(fā)現(xiàn)幼稚紅細(xì)胞，并輔以組化染色等進(jìn)一步檢查以確定診斷，而血細(xì)胞分析儀對(duì)白血病細(xì)胞中出現(xiàn)的Auers小體則無法辨認(rèn)[9]。再如嚴(yán)重感染、敗血癥、惡性腫瘤等情況下，中性粒細(xì)胞可表現(xiàn)為細(xì)胞大小不均、空泡變性、核左移、巨桿狀核及中毒顆粒等，這些中性粒細(xì)胞的毒性改變，血液分析儀也是無法辨認(rèn)的。本組研究顯示，血液分析儀檢測(cè)結(jié)果顯示W(wǎng)BC正?；蛏?，N、B、M升高時(shí)，血涂片顯微鏡檢查結(jié)果有較高的異常率，表現(xiàn)為中毒顆粒、空泡等現(xiàn)象，當(dāng)RBC、HB、MCV、RDW等指標(biāo)異常時(shí)，紅細(xì)胞形態(tài)有明顯變化，應(yīng)警惕有無貧血的發(fā)生。

為了使血涂片顯微鏡檢查結(jié)果準(zhǔn)確，在血涂片顯微鏡檢查中，應(yīng)注意血涂片及其染色的質(zhì)量，涂片時(shí)應(yīng)厚薄適中，邊緣整齊，血膜頭、體、尾明顯?？傊?，血涂片顯微鏡作為血常規(guī)檢查的基本部分，是目前血液分析儀進(jìn)行血常規(guī)檢查一個(gè)重要的也是關(guān)鍵的補(bǔ)充，只有將血涂片顯微鏡檢查與血液分析析檢查有機(jī)的結(jié)合，才能為臨床檢驗(yàn)提供更為可靠的檢測(cè)結(jié)果，有效的避免了誤診或漏診，從而可以為臨床檢驗(yàn)及患者的疾病診斷提供更準(zhǔn)確的參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)：

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[7] 李艷珍.血涂片顯微鏡檢查在血常規(guī)檢驗(yàn)中的必要性分析[J].中國藥物與臨床,2013.

篇2

【關(guān)鍵詞】醫(yī)學(xué)高職高專 檢驗(yàn)仿真實(shí)訓(xùn)室 儀器使用與保管

一、醫(yī)學(xué)高職高專院校實(shí)訓(xùn)室儀器使用與保管存在的問題及分析

（1）學(xué)生的文化層次參差不齊，使得整體操作技能水平不高，對(duì)儀器的維護(hù)以及認(rèn)知程度不足。

（2）教師對(duì)學(xué)生能正確使用儀器期望值過高。學(xué)生對(duì)實(shí)訓(xùn)室儀器充滿好奇，想早點(diǎn)了解、熟悉。所以當(dāng)老師介紹儀器使用時(shí)并沒有認(rèn)真聽講，但當(dāng)進(jìn)入實(shí)訓(xùn)室時(shí)發(fā)現(xiàn)了很多沒有預(yù)想過的問題，學(xué)生上實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)課人多、同時(shí)沒在教師指導(dǎo)下使用儀器，很容易使儀器損壞。

（3）學(xué)生自身對(duì)儀器認(rèn)識(shí)不到位。沒有把儀器當(dāng)作實(shí)驗(yàn)的重要實(shí)踐技能工具，對(duì)儀器認(rèn)識(shí)不透徹，不能將自己的興趣與儀器很好的有機(jī)融合。習(xí)慣于被動(dòng)的學(xué)習(xí)，不會(huì)主動(dòng)的將儀器和技能、科研結(jié)合在一起。

（4）學(xué)校對(duì)實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)人員隊(duì)伍不夠重視，管理實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)儀器的實(shí)驗(yàn)教師隊(duì)伍待遇低、自身責(zé)任心不強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)教師沒有對(duì)各類儀器進(jìn)行培訓(xùn)，以為都是教師的事，不是自己的事。沒有對(duì)新進(jìn)儀器進(jìn)行登記造冊(cè)、檔案管理。在實(shí)驗(yàn)者使用儀器后沒有督促其登記。

（5）在學(xué)校進(jìn)行教學(xué)的同時(shí)開展科研活動(dòng)中，實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)儀器故障后，沒有及時(shí)登記故障原因、沒有請(qǐng)工程師及時(shí)維修。使得實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室雖然儀器很多，但大多無法使用。主要是因?yàn)閮x器當(dāng)時(shí)故障時(shí)沒有及時(shí)發(fā)現(xiàn)或沒有及時(shí)登記進(jìn)行維護(hù)。

（6）學(xué)生在學(xué)校沒有很好的掌握實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)儀器的原理、使用、維護(hù)，到醫(yī)院實(shí)習(xí)、工作中會(huì)對(duì)儀器檢測(cè)過程故障不好判斷，會(huì)造成嚴(yán)重后果，檢測(cè)結(jié)果發(fā)生誤差，影響醫(yī)生對(duì)病情的診斷。

二、實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)儀器要加強(qiáng)管理及使用的重要性

（1）醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室儀器至關(guān)重要，不僅有助于學(xué)生在實(shí)訓(xùn)室得到技能培訓(xùn)。而且是醫(yī)學(xué)生進(jìn)入醫(yī)院與在校學(xué)習(xí)實(shí)踐的重要橋梁，如在實(shí)踐中要求每個(gè)學(xué)生熟練地掌握普通單目顯微鏡到雙目顯微鏡的使用技術(shù)，水平離心機(jī)與高速離心機(jī)使用技術(shù)，721、722分光光度計(jì)的使用，全自動(dòng)血液分析儀、尿液分析儀、尿沉渣分析儀、全自動(dòng)生化分析儀、酶標(biāo)儀等儀器的正確使用，通過實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室使學(xué)生更好地走上臨床。

（2）有助于儀器發(fā)揮更多的功能。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)仿真實(shí)訓(xùn)室的儀器比較貴重，如果損壞，不光造成經(jīng)濟(jì)損失，還會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)課的開出。因此，要對(duì)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)仿真實(shí)訓(xùn)室的儀器進(jìn)行良好管理與維護(hù)。

（3）有助于提高學(xué)生的職業(yè)素質(zhì)。降低學(xué)生在初學(xué)時(shí)因?qū)x器操作技術(shù)不熟練，標(biāo)本對(duì)儀器污染的概率。通過嚴(yán)格的規(guī)章制度，增強(qiáng)了學(xué)生的對(duì)實(shí)訓(xùn)室儀器的正確使用觀念和集體維護(hù)意識(shí)。

（4）在高職高專院校發(fā)展的今天，職業(yè)院校是當(dāng)今的主流，教師在搞好教學(xué)的同時(shí)更注重自身的業(yè)務(wù)發(fā)展，進(jìn)行學(xué)術(shù)交流、開展科研活動(dòng)，更需要實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)儀器。

三、高校、高職?？茩z驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室儀器使用與保管的途徑與方法

（1）建立儀器檔案盒，強(qiáng)調(diào)儀器的重要性：一臺(tái)新到實(shí)驗(yàn)室的儀器，首先要建立儀器的檔案，具體要對(duì)儀器的名稱、產(chǎn)品編號(hào)、生產(chǎn)廠家、使用試劑的名稱、說明書、啟用時(shí)間、使用情況、損壞情況、廠家工程師聯(lián)系方式，以及在安裝時(shí)出現(xiàn)異常情況等及時(shí)登記。并簽下驗(yàn)收是否合格清單。

（2）制定班級(jí)分組組長(zhǎng)、個(gè)人負(fù)責(zé)制：人手一臺(tái)儀器時(shí)，在實(shí)驗(yàn)課前由組長(zhǎng)到準(zhǔn)備室領(lǐng)取儀器卡片，每四人一組，由組長(zhǎng)按編號(hào)發(fā)給對(duì)應(yīng)編號(hào)的學(xué)生。先由每位學(xué)生檢查各自的顯微鏡是否完好，如沒有問題簽字，匯總交給組長(zhǎng)后才能到準(zhǔn)備室領(lǐng)取實(shí)驗(yàn)用品，實(shí)驗(yàn)教師通過組長(zhǎng)匯總得知是否有儀器故障并及時(shí)排除。對(duì)于共用體積小的貴重儀器，在使用與管理時(shí)按班級(jí)學(xué)號(hào)分為4人一組，由組長(zhǎng)到準(zhǔn)備室簽名領(lǐng)取實(shí)驗(yàn)儀器，才能上實(shí)驗(yàn)課，實(shí)驗(yàn)完畢后由組長(zhǎng)清點(diǎn)完好后歸還。

（3）在實(shí)驗(yàn)課中對(duì)學(xué)生要反復(fù)強(qiáng)調(diào)儀器在實(shí)驗(yàn)中的重要性，增強(qiáng)學(xué)生愛護(hù)儀器的意識(shí)，在仿真實(shí)訓(xùn)第一節(jié)實(shí)驗(yàn)課時(shí)，向?qū)W生講清實(shí)驗(yàn)實(shí)訓(xùn)室實(shí)驗(yàn)中不同儀器使用與管理有不同的特點(diǎn)，各類標(biāo)本的來源不同也對(duì)儀器具有不同的程度的污染性，實(shí)驗(yàn)中用到的顯微鏡、離心機(jī)、尿液分析儀、全自動(dòng)糞便分析儀等各種儀器是仿真實(shí)訓(xùn)室使用時(shí)所需的必備儀器，要求學(xué)生在實(shí)驗(yàn)操作儀器時(shí)要像愛護(hù)自己的物品一樣愛護(hù)它，對(duì)小的儀器要輕拿輕放，體積大的儀器避免碰撞，并且要嚴(yán)格按操作規(guī)程進(jìn)行使用，如有不清楚的地方應(yīng)及時(shí)請(qǐng)教實(shí)驗(yàn)教師。

篇3

【關(guān)鍵詞】 血涂片鏡檢；血常規(guī)檢驗(yàn)；血細(xì)胞分析儀

隨著現(xiàn)在社會(huì)的發(fā)展，人們的生活方式以及對(duì)于健康的重視程度也越來越高，去醫(yī)院進(jìn)行健康體檢的頻率呈現(xiàn)增加的趨勢(shì)，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室的工作人員工作量日益增加[1]。同時(shí)檢驗(yàn)工作人員的工作量也因?yàn)檠?xì)胞分析儀的應(yīng)用而得到了緩解，檢驗(yàn)質(zhì)量有所提高且報(bào)告時(shí)間有所縮短。但是對(duì)于自動(dòng)分析儀的過分依賴導(dǎo)致了手工血涂片鏡檢越發(fā)不受重視，使得臨床出現(xiàn)一部分的漏診漏報(bào)情況，對(duì)醫(yī)生在診斷還有治療等方面，存在較大的影響。所謂血涂片鏡檢是指經(jīng)過推片、染色等各種程序之后，通過光學(xué)顯微鏡對(duì)血液當(dāng)中的白細(xì)胞進(jìn)行分類，除此之外還需要觀察血小板形態(tài)以及寄生蟲等，通過對(duì)血液形態(tài)學(xué)的基礎(chǔ)檢查方式，使得疾病診斷在準(zhǔn)確率方面能夠有所提高。

1 資料與方法

1.1 標(biāo)本來源 選自我院門診以及住院患者血液標(biāo)本689例。所有患者血液標(biāo)本均使用EDTA-K2抗凝。

1.2 儀器與試劑 XE-2100血液分析儀以及相配套的原裝試劑，雙目光學(xué)顯微鏡以及瑞氏-吉姆薩復(fù)合染液。

1.3 方法

1.3.1 涂片制作、染色以及鏡檢 主要操作如下：①涂片制作要求：根據(jù)實(shí)際情況以及XE-2100血細(xì)胞分析儀本身性能，以其它相對(duì)比較先進(jìn)的檢驗(yàn)科室本身所帶有的顯微鏡檢查血涂片標(biāo)準(zhǔn)作為參照進(jìn)行檢查。儀器對(duì)于白細(xì)胞、血小板以及紅細(xì)胞等三個(gè)方面的異常有報(bào)警提示；②涂片標(biāo)準(zhǔn)：本次使用的涂片需要達(dá)到頭體尾三個(gè)部分劃分明顯，厚薄程度恰當(dāng)，細(xì)胞分布平均以及血膜長(zhǎng)度在玻片上面占據(jù)60%左右；③血涂片染色：染色是使用瑞氏-吉姆薩復(fù)合染液進(jìn)行，染液的配置主要以《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》當(dāng)中相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)作為參考；④血涂片鏡檢：首先使用低倍鏡或者是高倍鏡對(duì)涂片的全貌進(jìn)行觀察，觀察內(nèi)容主要是染色以及涂片是否符合要求，評(píng)估白細(xì)胞的數(shù)目和儀器結(jié)果是否一致，對(duì)外周血細(xì)胞在分布以及各類血細(xì)胞比例有大致的了解，其中涂片尾部是否有巨大或者是異常細(xì)胞要特別觀察，在涂片體尾交界的地方有一處核細(xì)胞和紅細(xì)胞不重疊，以此作為具有代表性的油鏡區(qū)；⑤油鏡觀察：主要觀察內(nèi)容是細(xì)胞的形態(tài)、比例以及分類計(jì)數(shù)。

1.3.2 實(shí)驗(yàn)方法 主要操作如下：①EDTA-K2抗凝，通過真空采血的技術(shù)在患者的肘靜脈采2ml血液，在室溫放置并且在采血之后的2個(gè)小時(shí)之內(nèi)按照儀器本身操作要求進(jìn)行檢測(cè)；②把使用XE-2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)共689例報(bào)告進(jìn)行分析，在所有報(bào)告中有114份標(biāo)本符合涂片檢查相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行涂片染色鏡檢。涂片染色鏡檢按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)操作進(jìn)行。觀察內(nèi)容主要為以下方面：白細(xì)胞分類計(jì)算以及形態(tài)；血小板大小以及形態(tài)；紅細(xì)胞大小以及形態(tài)；對(duì)于如中毒顆粒或者是寄生蟲等其它異常和檢測(cè)結(jié)果是否一致。

2 結(jié) 果

在本次研究所收集的血細(xì)胞分析病例共有689例，血涂片鏡檢共有114例。其中發(fā)現(xiàn)異性淋巴細(xì)胞增多癥有1例、傳染性單核細(xì)胞增多癥有2例、巨幼細(xì)胞性貧血有4例、缺鐵性貧血共有5例、急性白血病2例，慢性粒細(xì)胞性白血病有1例，剩余99份血涂片鏡檢結(jié)果和血細(xì)胞分析儀結(jié)果一致。

3 討 論

隨著醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，血細(xì)胞分析儀在臨床上面的應(yīng)用越來越廣泛，對(duì)于全血細(xì)胞在分析質(zhì)量、效率以及精密度上面有了很大的提升作用，但是我院使用的是五分類法，五分類法是通過各種物理以及化學(xué)的技術(shù)，對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分析并且獲得外周血液當(dāng)中五種常見的白細(xì)胞類型，也就是嗜中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞以及單核細(xì)胞。對(duì)于幼稚細(xì)胞還不能夠有效區(qū)分，更加不要說對(duì)異性淋巴細(xì)胞以及中性粒細(xì)胞毒性變等進(jìn)行識(shí)別。這樣的不足讓我們知道血細(xì)胞分析儀在全血細(xì)胞計(jì)數(shù)分析當(dāng)中只是一種過篩手段。如果遇到了可疑情況特別是病例條件之下，所檢測(cè)出來的結(jié)果并不一定可靠，所以需要再通過人工涂片鏡檢來進(jìn)行復(fù)查，當(dāng)前很多醫(yī)院沒有復(fù)查的程序?qū)е骂l繁出現(xiàn)醫(yī)療投訴或者是事故[2]。

全血細(xì)胞計(jì)數(shù)的檢測(cè)結(jié)果，是需要用于臨床患者的診治以及預(yù)后當(dāng)中，也有的是用于體檢者健康狀況的評(píng)估，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)異常的時(shí)候需要使用血涂片鏡檢再次認(rèn)真檢查，將兩種檢測(cè)方法結(jié)果進(jìn)行綜合分析，這樣能夠有效的提高計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確率，更重要的是這樣的復(fù)查能夠讓比較常見的貧血、感染性疾病以及白血病患者可以得到及時(shí)明確的診斷[3]。

參考文獻(xiàn)

[1] 余苗苗，周麗杰，金輝.血涂片分析在血常規(guī)檢驗(yàn)中的重要性探析[J].中國保健營養(yǎng)，2012（10）：154-155.

篇4

【關(guān)鍵詞】血液細(xì)胞檢驗(yàn)，注意事項(xiàng)，質(zhì)量控制

【中圖分類號(hào)】R446.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1004-4949（2014）04-0087-02

血常規(guī)檢驗(yàn)不但為各種血液病的診斷及治療提供了重要依據(jù)， 也對(duì)其它系統(tǒng)疾病的診斷和鑒別提供了許多重要信息。因此，，血常規(guī)檢測(cè)的準(zhǔn)確與否至關(guān)重要。在臨床醫(yī)學(xué)中，為了取得可靠、有效、準(zhǔn)確的血液檢驗(yàn)結(jié)果，預(yù)防漏診及誤診，對(duì)血液細(xì)胞檢驗(yàn)做了大量的臨床試驗(yàn)研究。在血液常規(guī)檢測(cè)過程中，要對(duì)血液標(biāo)本采集、血液標(biāo)本稀釋、血液標(biāo)本儲(chǔ)存、血液檢驗(yàn)過程以及血液分析儀等進(jìn)行有效的質(zhì)量控制。

1血液細(xì)胞檢驗(yàn)概述

血液細(xì)胞檢驗(yàn)是指對(duì)血液中的血紅蛋白（HGB）、血小板（PLT）、紅細(xì)胞（RBC）、白細(xì)胞（WBC）及相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行的計(jì)數(shù)檢測(cè)分析。血液細(xì)胞檢驗(yàn)不僅能夠有效診斷各種血液病，而且還能夠?yàn)槠渌喾N系統(tǒng)疾病的鑒別和診斷提供有用的信息。血液細(xì)胞檢驗(yàn)是當(dāng)前各大醫(yī)院檢驗(yàn)科室中最為多見的檢驗(yàn)內(nèi)容，也是臨床醫(yī)療診斷最為常用的檢驗(yàn)方法。傳統(tǒng)的血液檢驗(yàn)方法主要是采用人工顯微鏡對(duì)血細(xì)胞進(jìn)行檢驗(yàn)，現(xiàn)代的檢驗(yàn)方法主要是采用自動(dòng)血液分析儀對(duì)血液細(xì)胞進(jìn)行檢驗(yàn)，檢驗(yàn)自動(dòng)化、智能化程度不斷提高。然而，無論是傳統(tǒng)的鏡檢還是現(xiàn)代的血液分析儀，要獲取可靠、準(zhǔn)確的血液分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，都需要充分考慮實(shí)驗(yàn)室血液檢驗(yàn)中的各種影響因素，并采取相應(yīng)的質(zhì)量控制措施。

2血液細(xì)胞檢驗(yàn)的注意事項(xiàng)分析

2.1采集血液細(xì)胞樣本應(yīng)該注意事項(xiàng)

臨床上主要是采集末梢毛細(xì)血管血液以及靜脈血作為血液細(xì)胞檢驗(yàn)的標(biāo)本。靜脈血的血樣能最準(zhǔn)確地反映人體的病變情況，是最為可靠的血液標(biāo)本。與手指血相比，靜脈血的準(zhǔn)確性以及可重復(fù)性都較高，白細(xì)胞計(jì)以及血小板計(jì)數(shù)準(zhǔn)確率都較高?；诖?，在采集血液檢驗(yàn)的標(biāo)本時(shí)，應(yīng)盡量采用靜脈血作為標(biāo)本。此外，不允許將患者輸液的滯留針處或輸液靜脈同側(cè)血管中采集到的血液作為檢驗(yàn)標(biāo)本，防止上述所采的血液被稀釋，影響血液檢驗(yàn)的準(zhǔn)確率。同時(shí)，用止血帶壓迫止血的時(shí)間不宜超過1分鐘，防止患者淤血及血液濃縮，導(dǎo)致血液檢驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。

2.2血液細(xì)胞樣本處理過程應(yīng)注意的事項(xiàng)

采集到血液標(biāo)本后，必須對(duì)標(biāo)本進(jìn)行抗凝劑抗凝處理，EDTA是目前使用較為普遍的抗凝劑，其對(duì)血小板以及白細(xì)胞形態(tài)的影響較小，適合用于血液細(xì)胞的檢驗(yàn)。除了血液生理性因素以及采取部位等的影響外，血液標(biāo)本的質(zhì)量主要取決于抗凝劑與血液之間的比例。當(dāng)抗凝劑的量不足時(shí)，血漿中會(huì)出現(xiàn)微凝血塊，使用血細(xì)胞分析儀對(duì)具有微凝血塊的標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)，微凝血塊很可能會(huì)導(dǎo)致儀器阻塞，同時(shí)也會(huì)影響實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的準(zhǔn)確性。

血液主要是由血漿及血細(xì)胞組成的紅色黏稠混懸液。在對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)檢驗(yàn)時(shí)，直接對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行血液計(jì)數(shù)是非常困難的，因而要在計(jì)數(shù)檢驗(yàn)前要對(duì)血液進(jìn)行合理的稀釋處理。根據(jù)血細(xì)胞分析儀的基本原理，在對(duì)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行設(shè)計(jì)時(shí)，要將血液的計(jì)數(shù)容量及血液的稀釋倍數(shù)充分考慮進(jìn)去，作為重要的設(shè)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)。

2.3血液細(xì)胞的儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)注意的事項(xiàng)

抗凝劑因使用濃度以及使用時(shí)間的不同，會(huì)對(duì)血細(xì)胞的形態(tài)造成嚴(yán)重影響。國內(nèi)外研究顯示，用EDTA抗凝劑對(duì)靜脈血液標(biāo)本進(jìn)行抗凝時(shí)，在血液標(biāo)本采集后的5min內(nèi)或30min以后，在室溫下保存8h內(nèi)對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)，可以獲得最佳檢驗(yàn)結(jié)果。如果不需要對(duì)白細(xì)胞或者血小板進(jìn)行分類的確切數(shù)據(jù)，血液細(xì)胞標(biāo)本在2～8℃的環(huán)境下能保存24h。預(yù)稀釋的血液細(xì)胞標(biāo)本應(yīng)盡可能在制備之后的10min內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。如果在血液細(xì)胞稀釋液中添加有細(xì)胞穩(wěn)定劑，預(yù)稀釋血液標(biāo)本在常溫下保存的時(shí)間也不可以超過4h。

3血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量控制及措施

3.1制定完善的血液細(xì)胞檢驗(yàn)質(zhì)量控制管理機(jī)制

為了更好地提高血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量，現(xiàn)代化的醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)以先進(jìn)的質(zhì)量控制以及管理理念為指導(dǎo)，建立健全實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)質(zhì)量控制機(jī)制，明確各工作崗位的檢驗(yàn)人員的職責(zé)權(quán)限以及合理的獎(jiǎng)懲制度。此外，還要制定嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室操作標(biāo)準(zhǔn)，以規(guī)范實(shí)驗(yàn)人員的檢驗(yàn)操作，使血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作的質(zhì)量控制有據(jù)可循，為血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量控制提供技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。

3.2優(yōu)化血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作

優(yōu)化血液細(xì)胞檢驗(yàn)工作的流程，可以有效提高血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量，為血液細(xì)胞檢驗(yàn)的質(zhì)量控制奠定基礎(chǔ)。醫(yī)院在對(duì)血液細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行質(zhì)量控制時(shí)，應(yīng)充分認(rèn)識(shí)到檢驗(yàn)工作流程對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量的提高以及質(zhì)量控制的重要性。醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)根據(jù)本院的血液細(xì)胞檢驗(yàn)設(shè)備為基礎(chǔ)，優(yōu)化檢驗(yàn)工作流程，促進(jìn)醫(yī)院血液細(xì)胞檢驗(yàn)質(zhì)量控制的順利開展。

血液細(xì)胞檢驗(yàn)過程的質(zhì)量控制對(duì)血液細(xì)胞的檢驗(yàn)質(zhì)量有著重要的決定作用，在進(jìn)行細(xì)胞檢驗(yàn)前，應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行科學(xué)、準(zhǔn)確得校驗(yàn)，并嚴(yán)格按照操作規(guī)程要求進(jìn)行操作，以使檢驗(yàn)質(zhì)量滿足臨床診斷的要求，保證血液檢驗(yàn)結(jié)果的精確度。

3.3血液檢測(cè)分析儀的質(zhì)量控制

血液分析儀細(xì)胞計(jì)數(shù)的最合適溫度應(yīng)保持在18～22℃之間，當(dāng)溫度過高或者過低時(shí)，都對(duì)測(cè)量結(jié)果產(chǎn)生影響；在打開血液分析儀后，首先要做實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控，并參與實(shí)驗(yàn)室間質(zhì)評(píng)。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的質(zhì)量控制是血液細(xì)胞檢驗(yàn)質(zhì)量控制的重要環(huán)節(jié)；嚴(yán)格依照實(shí)驗(yàn)室操作程序?qū)x器進(jìn)行操作，并采取相應(yīng)的保養(yǎng)措施對(duì)儀器進(jìn)行定期保養(yǎng)、清洗及濃縮沖洗，避免儀器發(fā)生堵塞現(xiàn)象；根據(jù)參數(shù)變化以及直方圖確定細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性，所分析的準(zhǔn)確性不高時(shí)，必須用顯微鏡進(jìn)行復(fù)查；分析參數(shù)與實(shí)驗(yàn)結(jié)果之間的關(guān)系，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果與臨床分析相比較，判斷二者是否相符，如果出現(xiàn)異常結(jié)果，應(yīng)主動(dòng)與臨床實(shí)踐相聯(lián)系。

結(jié)語

總之，影響臨床血液細(xì)胞檢驗(yàn)結(jié)果的因素較多，要想取得科學(xué)、準(zhǔn)確的檢驗(yàn)

結(jié)果，對(duì)實(shí)驗(yàn)過程要應(yīng)進(jìn)行嚴(yán)格的監(jiān)督及管理，確保實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)操作規(guī)范化。只有這樣才能保證血液檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確。

參考文獻(xiàn)

[1] 張仲遠(yuǎn)，遲紅梅.血液細(xì)胞檢驗(yàn)中的注意事項(xiàng)及質(zhì)量控制[J].實(shí)用醫(yī)技雜志.2008（24）：52.

篇5

關(guān)鍵詞: 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn);標(biāo)準(zhǔn)化;實(shí)例分析

中圖分類號(hào): R197.6

1 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化的重要性

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)是運(yùn)用現(xiàn)代物理化學(xué)方法、手段進(jìn)行醫(yī)學(xué)診斷的一門學(xué)科,主要研究如何通過實(shí)驗(yàn)室技術(shù)、醫(yī)療儀器設(shè)備為臨床診斷、治療提供依據(jù)。在高等院校通過系統(tǒng)學(xué)習(xí)這門學(xué)科,使學(xué)生了解如何鑒定人的血型、確定一個(gè)人是否貧血、肝功能是否正常、怎樣拍人體胸部及四肢的X線片,怎樣進(jìn)行CT掃描等等。標(biāo)準(zhǔn)化(standardization)是指某一個(gè)領(lǐng)域需要達(dá)到的統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)要求,是為在一定的范圍內(nèi)獲得最佳秩序,對(duì)實(shí)際的或潛在的問題制定共同的和重復(fù)使用的規(guī)則的活動(dòng)。如信息工作標(biāo)準(zhǔn)化,其目的是使文獻(xiàn)工作走向標(biāo)準(zhǔn)化、系列化和通用化,達(dá)到信息交流和資源共享。國際標(biāo)準(zhǔn)化組織(ISO)的主要任務(wù)是制訂國際標(biāo)準(zhǔn)、協(xié)調(diào)世界范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)化工作。標(biāo)準(zhǔn)化的問題由來已久,中國自秦代開始,歷代王朝都有法定度量衡標(biāo)準(zhǔn)以及法定違反標(biāo)準(zhǔn)的法則。中國現(xiàn)代標(biāo)準(zhǔn)化工作的任務(wù)是制定標(biāo)準(zhǔn)、組織實(shí)施標(biāo)準(zhǔn)和對(duì)標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)施進(jìn)行監(jiān)督。為了發(fā)展社會(huì)主義商品經(jīng)濟(jì),促進(jìn)技術(shù)進(jìn)步,改進(jìn)產(chǎn)品質(zhì)量,對(duì)工業(yè)產(chǎn)品、規(guī)格、質(zhì)量、等級(jí)或者安全衛(wèi)生等需要有統(tǒng)一的技術(shù)要求,使標(biāo)準(zhǔn)化工作適應(yīng)社會(huì)主義現(xiàn)代化和發(fā)展對(duì)外經(jīng)濟(jì)的需要。

標(biāo)準(zhǔn)化的實(shí)質(zhì)是通過制定、和實(shí)施標(biāo)準(zhǔn),達(dá)到統(tǒng)一,從而獲得最佳秩序和社會(huì)效益。統(tǒng)一就是為了保證事物發(fā)展所必須的秩序和效率,對(duì)事物的形成、功能或其他特性,確定適合于一定時(shí)期和一定條件的一致規(guī)范,并使這種一致規(guī)范與被取代的對(duì)象在功能上達(dá)到等效。標(biāo)準(zhǔn)化為科學(xué)管理奠定了基礎(chǔ)。所謂科學(xué)管理,就是依據(jù)生產(chǎn)技術(shù)的發(fā)展規(guī)律和客觀經(jīng)濟(jì)規(guī)律對(duì)企業(yè)進(jìn)行管理,而各種科學(xué)管理制度的形式,都以標(biāo)準(zhǔn)化為基礎(chǔ)。標(biāo)準(zhǔn)化是科研、生產(chǎn)、使用三者之間的橋梁。一項(xiàng)科研成果,一旦納入相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn),就能迅速得到推廣和應(yīng)用。因此,標(biāo)準(zhǔn)化可使新技術(shù)和新科研成果得到推廣應(yīng)用,從而促進(jìn)技術(shù)進(jìn)步。標(biāo)準(zhǔn)化應(yīng)用于科學(xué)研究,可以避免在研究上的重復(fù)勞動(dòng);應(yīng)用于產(chǎn)品設(shè)計(jì),可以縮短設(shè)計(jì)周期;應(yīng)用于生產(chǎn),可使生產(chǎn)在科學(xué)有秩序的基礎(chǔ)上進(jìn)行;應(yīng)用于管理,可促進(jìn)統(tǒng)一、協(xié)調(diào)、高效率等。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,生產(chǎn)的社會(huì)化程度越來越高,生產(chǎn)規(guī)模越來越大,技術(shù)要求越來越復(fù)雜,分工越來越細(xì),生產(chǎn)協(xié)作越來越廣泛,這就必須通過制定和使用標(biāo)準(zhǔn),來保證各生產(chǎn)部門的活動(dòng),在技術(shù)上保持高度的統(tǒng)一和協(xié)調(diào),以使生產(chǎn)正常進(jìn)行。所以說,標(biāo)準(zhǔn)化為組織現(xiàn)代化生產(chǎn)創(chuàng)造了前提條件。大量的環(huán)保標(biāo)準(zhǔn)、衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)和安全標(biāo)準(zhǔn)制定后,用法律形式強(qiáng)制執(zhí)行,對(duì)保障人民的身體健康和生命財(cái)產(chǎn)安全具有重大作用。

2 醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作的實(shí)例分析

標(biāo)準(zhǔn)化操作,又稱為標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(Standard Operating Procedure,SOP),是為有效地實(shí)施和完成某一臨床試驗(yàn)中每項(xiàng)工作所擬定的標(biāo)準(zhǔn)而詳細(xì)的書面規(guī)程。以醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的痰液細(xì)菌檢驗(yàn)為例,眾所周知,傳統(tǒng)習(xí)慣程序的痰標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)其臨床符合率并不高,傳統(tǒng)程序的痰標(biāo)本細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)緩慢,很不適應(yīng)臨床診斷治療的迫切性。究其原因,除了因?yàn)槲⑸锖腿梭w的相關(guān)性本身就具有復(fù)雜性:源自細(xì)菌的致病與條件致病的辨證性,如致病菌可能為正常攜帶,而細(xì)菌在肺通氣功能異常病人的下呼吸道可以發(fā)生單純定植或感染,要證明培養(yǎng)結(jié)果與感染的相關(guān)性是醫(yī)學(xué)微生物學(xué)所面臨的難題;還因?yàn)樘禈?biāo)本采集不規(guī)范導(dǎo)致的不合格標(biāo)本帶來的培養(yǎng)結(jié)果與病人感染不相符。因此,提出相應(yīng)詳細(xì)可行的令全國同行公認(rèn)的統(tǒng)一規(guī)范的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序(SOP)和完整的痰液培養(yǎng)的質(zhì)量控制辦法,建立規(guī)范而快速的痰液細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)的SOP對(duì)于提高呼吸系統(tǒng)感染病的診治水平和控制抗生素的濫用等問題均有重要的作用。

醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作實(shí)例:第一,標(biāo)本接收篩選方案。目測(cè)黃色、灰色、血性、鐵銹色、渾濁、稠厚、呈現(xiàn)團(tuán)塊狀的標(biāo)本為合格標(biāo)本;而無色透明、有灰白片狀物或黑色小點(diǎn),有明顯食物渣滓、紙屑灰塵的為不合格標(biāo)本。經(jīng)過目測(cè)篩選的標(biāo)本,在洗滌前還需再經(jīng)過顯微鏡下篩選,取約0.1ml痰液(黃豆大小)用接種環(huán)均勻涂布成2×2cm2大小的涂膜,在顯微鏡下,凡膿細(xì)胞大于25/LP且鱗狀上皮小于10/LP的標(biāo)本為合格標(biāo)本,可進(jìn)入下一步程序;而膿細(xì)胞小于10/LP但細(xì)菌數(shù)量大于+++或鱗狀上皮大于25/LP的標(biāo)本為不合格標(biāo)本,應(yīng)拒收。第二,標(biāo)本預(yù)處理。先用20ml生理鹽水洗滌兩次,經(jīng)過10ml生理鹽水稀釋后,加入1%的PH7.6的胰蛋白酶溶液消化90min后接種,并同時(shí)在洗滌后制作原始痰涂片,進(jìn)行染色鏡檢。第三,讀片。根據(jù)人體對(duì)細(xì)菌、真菌感染在早期主要以非特異性免疫的細(xì)胞免疫為主的特點(diǎn),結(jié)合呼吸系統(tǒng)生理病理特點(diǎn),闡述痰液形成過程和排出過程。在下呼吸道中感染中形成的炎性滲出、包裹物中存在與感染直接相關(guān)的病原菌,在自然排痰的過程中會(huì)被上呼吸道的正常菌群所污染,但污染菌位于炎性包裹物之外,且人體對(duì)正常菌群具有共生性保護(hù)因而不會(huì)產(chǎn)生吞噬現(xiàn)象。據(jù)此,將選擇痰標(biāo)本中膿細(xì)胞成團(tuán)塊狀分布,集中而不稠密,且周圍無鱗狀上皮細(xì)胞或無大量成團(tuán)狀分布的細(xì)菌球的區(qū)域?yàn)樽x片區(qū),認(rèn)真收尋20-30個(gè)視野中膿細(xì)胞聚集處的膿細(xì)胞胞漿中有無吞噬的細(xì)菌及細(xì)菌的染色排列特征,菌體特征(如粗細(xì)、長(zhǎng)短、扭曲)并作記錄,將此作為確定病原菌的理論依據(jù)。第四,標(biāo)本的接種培養(yǎng)。第五,讀碟。第六,細(xì)菌鑒定。在痰標(biāo)本的直接涂片鏡檢結(jié)果的指導(dǎo)下進(jìn)行分離鑒定,根據(jù)痰液涂片直接鏡檢結(jié)果中被炎性包裹及膿細(xì)胞吞噬的細(xì)菌的革蘭染色后的形態(tài)特征為指引,閱讀平皿中菌落形態(tài)并作菌落細(xì)菌的革蘭染色,選擇與鏡檢結(jié)果一致的細(xì)菌(該步驟應(yīng)該在經(jīng)驗(yàn)豐富的高資歷微生物檢驗(yàn)老師的帶領(lǐng)下進(jìn)行),必要時(shí)進(jìn)行純培養(yǎng),再根據(jù)該細(xì)菌在各種不同培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況及相應(yīng)菌落特征進(jìn)行初步鑒定和分群,隨后在細(xì)菌革蘭氏染色鏡檢特點(diǎn)、觸酶、氧化酶等簡(jiǎn)單試驗(yàn)的進(jìn)一步鑒定和分群到相關(guān)的科或?qū)俸蟛捎孟鄳?yīng)的編碼鑒定系統(tǒng)鑒定手工或自動(dòng)化鑒定,對(duì)溶血性鏈球菌及肺炎鏈球菌在生化反應(yīng)的同時(shí)采用乳膠試劑作為補(bǔ)充。為了縮短鑒定時(shí)間還可采用具有培養(yǎng)鑒定一體化作用的多功能培養(yǎng)基配合快速酶法編碼鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。第七,藥敏試驗(yàn)。按CLSI相關(guān)規(guī)定進(jìn)行藥敏試驗(yàn),可采用特殊的藥敏試驗(yàn)觀察計(jì)算方法(如自動(dòng)化儀器采用的光電濁度速率法、熒光速率法等)縮短藥敏時(shí)間。向臨床提供一份快速的初步報(bào)告。第八,結(jié)果報(bào)告。常規(guī)痰培養(yǎng)報(bào)告應(yīng)包括完整的病人信息、臨床診斷、抗生素使用情況(由臨床醫(yī)生在申請(qǐng)單上注明)、未染色標(biāo)本直接涂片結(jié)果(有無膿細(xì)胞、膿細(xì)胞數(shù)量、上皮細(xì)胞數(shù)量、二者比例、有無真菌孢子/菌絲、有無寄生蟲等)、Gram染色鏡檢結(jié)果(包括膿細(xì)胞數(shù)量、上皮細(xì)胞與胞外正常菌群數(shù)量與污染程度、膿細(xì)胞胞內(nèi)吞噬細(xì)菌/真菌孢子的情況,炎性包裹物內(nèi)細(xì)菌和真菌的存在情況、膿細(xì)胞和炎性包裹物內(nèi)的細(xì)菌/真菌的染色特征、形態(tài)特征和排列特征)、所分離細(xì)菌的鑒定結(jié)果、耐藥監(jiān)測(cè)結(jié)果、一般藥敏結(jié)果、該檢驗(yàn)結(jié)果與臨床診斷和治療相關(guān)性的評(píng)述和建議。第九,質(zhì)量控制。為保證細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)結(jié)果的快速準(zhǔn)確和臨床符合率,應(yīng)對(duì)全過程進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制。

3 結(jié)語

在經(jīng)濟(jì)、技術(shù)、科學(xué)及管理等社會(huì)實(shí)踐中,對(duì)重復(fù)性事物和概念,通過制定、和實(shí)施標(biāo)準(zhǔn),達(dá)到統(tǒng)一,更能獲得最佳秩序和社會(huì)效益。統(tǒng)一是為了確定一組對(duì)象的一致規(guī)范,其目的是保證事物所必須的秩序和效率;統(tǒng)一的原則是功能等效,從一組對(duì)象中選擇確定一致規(guī)范,應(yīng)能包含被取代對(duì)象所具備的必要功能;同時(shí),統(tǒng)一是相對(duì)的,確定的一致規(guī)范,只適用于一定時(shí)期和一定條件,隨著時(shí)間的推移和條件的改變,舊的統(tǒng)一就要由新的統(tǒng)一所代替。

參考文獻(xiàn)

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篇6

關(guān)鍵詞： 實(shí)驗(yàn)教學(xué) 動(dòng)物傳染病 課程改革

隨著21世紀(jì)科技突飛猛進(jìn)的發(fā)展及人們對(duì)獸醫(yī)工作者服務(wù)質(zhì)量及要求的提高，培養(yǎng)具有較強(qiáng)實(shí)踐能力和創(chuàng)新素質(zhì)的獸醫(yī)人才已是當(dāng)前農(nóng)業(yè)大學(xué)刻不容緩的工作。動(dòng)物傳染病是獸醫(yī)專業(yè)一門重要的專業(yè)必修課，實(shí)驗(yàn)教學(xué)作為該門課程的重要組成部分，其重要性不言而喻。就動(dòng)物傳染病實(shí)驗(yàn)課程的改革，我有以下幾點(diǎn)想法。

一、密切聯(lián)系實(shí)際，更新教學(xué)內(nèi)容。

1.聯(lián)合實(shí)際，不斷更新實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。

在21世紀(jì)的今天，隨著養(yǎng)殖業(yè)不斷地規(guī)?；⒓s化發(fā)展，雖然為社會(huì)創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟(jì)利益，但是同時(shí)也為動(dòng)物傳染病的發(fā)生和流行創(chuàng)造了條件。動(dòng)物傳染病的發(fā)生和流行有了新的特點(diǎn)：新發(fā)病的種類越來越多，且危害嚴(yán)重。我國近幾年出現(xiàn)了不少嚴(yán)重危害畜禽業(yè)的傳染病，如禽流感、高致病性豬藍(lán)耳病等，這些傳染病不僅嚴(yán)重危害了養(yǎng)殖業(yè)，造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，而且給食品安全帶來了威脅。而我們的實(shí)驗(yàn)課程仍然沿用以前的教材，對(duì)于這些嚴(yán)重威脅國計(jì)民生的重要傳染病的實(shí)驗(yàn)沒有開設(shè)，這就需要我們對(duì)動(dòng)物傳染病的實(shí)驗(yàn)教材進(jìn)行改革更新。針對(duì)當(dāng)前形勢(shì)，為了培養(yǎng)更優(yōu)秀的人才，這些應(yīng)當(dāng)充實(shí)到實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容當(dāng)中去［1］。

2.聯(lián)系行業(yè)企業(yè)，根據(jù)需要適時(shí)更新教學(xué)內(nèi)容。

動(dòng)物醫(yī)學(xué)專業(yè)培養(yǎng)的是具有防治畜禽疾病的基礎(chǔ)理論和實(shí)踐技能，能勝任動(dòng)物疾病及人畜共患病預(yù)防、診斷和治療等工作第一線的高級(jí)技術(shù)應(yīng)用型人才。既然培養(yǎng)的是一線的高級(jí)技術(shù)應(yīng)用型人才，我們就應(yīng)該密切聯(lián)系行業(yè)企業(yè)，關(guān)注其需要，適時(shí)更新教學(xué)內(nèi)容，使教學(xué)內(nèi)容不至于與時(shí)代脫節(jié)。這樣我們所培養(yǎng)的學(xué)生能滿足行業(yè)企業(yè)的需要，也使畢業(yè)生在畢業(yè)后能很快地投入到第一線中去。

二、加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室硬件和軟件的建設(shè)，使實(shí)驗(yàn)室建設(shè)更趨合理化。

1.加快實(shí)驗(yàn)室硬件建設(shè)，促進(jìn)教學(xué)改革。

實(shí)驗(yàn)室環(huán)境與設(shè)備條件是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的硬件部分，也是實(shí)驗(yàn)教學(xué)的基本保障［2］。近年來，我院對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)比較重視，對(duì)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)所投入的經(jīng)費(fèi)很多，動(dòng)物傳染病實(shí)驗(yàn)室新添了熒光顯微鏡、全自動(dòng)酶標(biāo)儀、倒置生物顯微鏡等教學(xué)儀器設(shè)備，在很大程度上滿足了實(shí)驗(yàn)教學(xué)的需要，也進(jìn)一步促進(jìn)了實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革。實(shí)驗(yàn)室環(huán)境稍微有點(diǎn)欠缺，由于是借用的化學(xué)實(shí)驗(yàn)室，環(huán)境達(dá)不到標(biāo)準(zhǔn)，如面積不夠，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)沒有傳染病實(shí)驗(yàn)室所需的紫外燈，等等。相信這種情況隨著學(xué)院新校區(qū)的建設(shè)將會(huì)得到解決。

2.在加強(qiáng)硬件建設(shè)的同時(shí)，不能忽略軟件的建設(shè)。

軟件的建設(shè)其實(shí)就是實(shí)驗(yàn)室管理人員的合理配置和合理運(yùn)用。由于實(shí)驗(yàn)室人員的工作量大，工作繁瑣，實(shí)驗(yàn)課一直是理論課的附屬課程，很多老師都不愿做這項(xiàng)工作，造成實(shí)驗(yàn)教師的流動(dòng)性很大。這對(duì)實(shí)驗(yàn)室管理尤其是實(shí)驗(yàn)教學(xué)是一項(xiàng)很大的弊端。應(yīng)該建立一系列措施改善這一現(xiàn)象，比如對(duì)實(shí)驗(yàn)系列老師的學(xué)科發(fā)展要有長(zhǎng)遠(yuǎn)的考慮，對(duì)實(shí)驗(yàn)教師的職稱評(píng)定有一定的優(yōu)惠政策，尤其是應(yīng)該把實(shí)驗(yàn)課獨(dú)立出來，成為一門單獨(dú)的課程。我們學(xué)院較重視教師的培養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)教師都具有本科以上學(xué)歷，但是值得重視的是實(shí)驗(yàn)教師在不斷提高學(xué)歷層次的同時(shí)，還應(yīng)注意不斷學(xué)習(xí)使自己的知識(shí)結(jié)構(gòu)更趨合理化。

三、改進(jìn)教學(xué)模式，增強(qiáng)學(xué)生主觀能動(dòng)性。

1.改變傳統(tǒng)的教學(xué)模式，發(fā)揮學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中的主體作用。

傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)教學(xué)模式分為3個(gè)步驟：教師講、學(xué)生做、課后總結(jié)。這種教學(xué)模式中，老師發(fā)揮了主導(dǎo)作用，實(shí)驗(yàn)課前的預(yù)試和所用器材、試劑等均由老師一手包辦，學(xué)生只負(fù)責(zé)操作。部分學(xué)生并不了解實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路和整個(gè)流程，只知道圍著老師轉(zhuǎn)，只知其然而不知其所以然［3］。因此，要根據(jù)動(dòng)物傳染病的課程特點(diǎn)，優(yōu)化教學(xué)模式。比如巴氏桿菌病的診斷，先讓學(xué)生自己預(yù)習(xí)，寫出實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)課前要求學(xué)生認(rèn)真預(yù)習(xí)，查閱相關(guān)資料、擬訂實(shí)驗(yàn)方案、寫出預(yù)習(xí)報(bào)告［4］［5］。了解巴氏桿菌病的診斷先要進(jìn)行攻毒，還要制作鮮血培養(yǎng)基等。接著進(jìn)行實(shí)驗(yàn)前的準(zhǔn)備工作，準(zhǔn)備所需器材及一些預(yù)實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)操作，清理實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)后的總結(jié)。實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、實(shí)驗(yàn)材料準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)操作、實(shí)驗(yàn)后總結(jié)、清理等全部由學(xué)生自己完成。這樣打破了傳統(tǒng)的動(dòng)物傳染病教學(xué)模式，變老師主導(dǎo)為學(xué)生主導(dǎo)，老師在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中起輔助作用。這使得學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中發(fā)揮了主體作用，學(xué)習(xí)效果更好，積極性更高。

2.開放實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)一步提高學(xué)生學(xué)習(xí)積極性。

因?yàn)榻虒W(xué)的需要，實(shí)驗(yàn)室緊張，實(shí)驗(yàn)室不可能全天不定時(shí)開放。學(xué)生想去實(shí)驗(yàn)室準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)或做實(shí)驗(yàn)有一定的困難，這在一定程度上制約了學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性，也不能滿足學(xué)生的學(xué)習(xí)需要。面對(duì)這樣的矛盾，我們應(yīng)該根據(jù)教學(xué)的需要定期開放實(shí)驗(yàn)室以滿足學(xué)生的學(xué)習(xí)需要。以后搬到新校區(qū)后，在實(shí)驗(yàn)室充裕的情況下可以實(shí)行一部分實(shí)驗(yàn)室滿足上課的需要，一部分實(shí)驗(yàn)室面對(duì)學(xué)生全面開放。這樣學(xué)生可以自主選擇時(shí)間進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，必然會(huì)更好地調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性。

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篇7

隨著《中華人民共和國獻(xiàn)血法》和《血站管理辦法》及相關(guān)法規(guī)規(guī)程的實(shí)施,標(biāo)志著無償獻(xiàn)血已經(jīng)走入正軌,并且逐漸被人們所認(rèn)識(shí)和接受。我站流動(dòng)采血車每天去街頭采血,采血前對(duì)獻(xiàn)血者HBV檢測(cè)采取膠體金法進(jìn)行快速篩選。現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料本組960名白城市無償獻(xiàn)血者。年齡20～52周歲。

1.2 試劑HBV試劑由廈門新創(chuàng)公司提供。

1.3 檢測(cè)方法HBV快速膠體金法操作步驟:將試紙條取出粘貼于不干膠記錄紙相應(yīng)位置水平放置并作好標(biāo)記,用加樣器或毛細(xì)細(xì)管吸取60微升新鮮全血緩慢加于試紙條箭頭下方的墊片上,為防止弱陽性標(biāo)本漏檢,加樣后10分鐘觀察并記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

1.4 復(fù)檢方法采用ELISA法。

2 結(jié) 果

對(duì)960名獻(xiàn)血者進(jìn)行篩選分析,其中陽性63人,陽性率為6.56%。ELISA法檢測(cè)HBV陽性為70份,陽性率為7.29%。膠體金法與ELISA法所檢測(cè)結(jié)果比較,膠體金法陽性率低0.73%,假陰性為7.29%。

3 討 論

HbsAg為乙型肝炎表面抗原。HbsAg不僅存在于血液中,而且還存在于許多體液和分泌物中,如唾液、尿液、乳汁、等。一般在乙肝患者轉(zhuǎn)氨酶(ALT)升高前2～8周的血清中出現(xiàn)。患者進(jìn)入恢復(fù)期后,HbsAg的滴度可逐步降低;當(dāng)患者血中出現(xiàn)抗HBs時(shí),HbsAg可消失。由此可見,HbsAg是乙型肝炎早期診斷的指標(biāo)之一。臨床發(fā)現(xiàn),一部分患者HbsAg在血清中可持續(xù)存在,原因可能是編碼HbsAg的病毒基因與患者的肝細(xì)胞DNA進(jìn)行了整合。在這種情況下,即使HBV已從人體內(nèi)消除,肝細(xì)胞仍能不斷地復(fù)制HbsAg。

目前,國內(nèi)最常使用的測(cè)定HbsAg的方法是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA),其次是放射免疫試驗(yàn)(RIA)。ELISA其原理是使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體,這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí),把受檢標(biāo)本(測(cè)定其中的抗體或抗原)和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開,最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析[1]。由于酶的催化頻率很高,故可極大地地放大反應(yīng)效果,從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA進(jìn)口試劑盒可測(cè)到的血清HbsAg最低濃度為0.2ng/ml,國產(chǎn)試劑盒目前能達(dá)到0.5ng/ml。

膠體金是一種常用的標(biāo)記技術(shù),是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物應(yīng)用于抗原抗體的一種新型的免疫標(biāo)記技術(shù),有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。近年已在各種生物學(xué)研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術(shù)幾乎都使用其標(biāo)記。同時(shí)在流式、電鏡、免疫、分子生物學(xué)以至生物芯片中都可能例用到。它主要利用了金顆粒具有高電子密度的特性,在金標(biāo)蛋白結(jié)合處,在顯微鏡下可見黑褐色顆粒,當(dāng)這些標(biāo)記物在相應(yīng)的配體處大量聚集時(shí),肉眼可見紅色或粉紅色斑點(diǎn),因而用于定性或半定量的快速免疫檢測(cè)方法中,這一反應(yīng)也可以通過銀顆粒的沉積被放大,稱之為免疫金銀染色。

1971年Faulk 和Taytor將膠體金引入免疫化學(xué),此后免疫膠體金技術(shù)作為一種新的免疫學(xué)方法,在生物醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域得到了日益廣泛的應(yīng)用。目前在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用主要是免疫層析法和快速免疫金滲濾法,用于檢測(cè) HBsAg、HCG 和抗雙鏈DNA抗體等,具有簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確和無污染等優(yōu)點(diǎn)[2]。

從本組結(jié)果來看,膠體金法存在一定程度的假陰性和假陽性,但它具有快速操作簡(jiǎn)單標(biāo)本量少的優(yōu)點(diǎn),同時(shí)縮短獻(xiàn)血者等待血液檢測(cè)時(shí)間方便獻(xiàn)血者。從實(shí)際工作分析,還需要配合其他的方法進(jìn)行復(fù)檢,最大限度地降低所采血液的不合格率,減少血液資源浪費(fèi)。除嚴(yán)格按照檢驗(yàn)操作規(guī)程進(jìn)行檢測(cè),選擇較好的試驗(yàn)方法和試劑,提高檢測(cè)的特異性和靈敏度,確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性外,還應(yīng)認(rèn)真做好獻(xiàn)血前的健康征詢工作,加強(qiáng)獻(xiàn)血前的宣傳教育,進(jìn)一步加大宣傳力度,側(cè)重宣傳醫(yī)學(xué)科普知識(shí),宣傳血液的檢驗(yàn)、成分血的制備、血液利用的嚴(yán)格性和科學(xué)性,,使獻(xiàn)血者進(jìn)一步了解自己捐獻(xiàn)血液的質(zhì)量及所發(fā)揮作用的重要性。

【參考文獻(xiàn)】

篇8

【關(guān)鍵詞】臨床免疫檢測(cè)；現(xiàn)代醫(yī)學(xué)；設(shè)備管理；質(zhì)量控制

1 引言

伴隨著世界經(jīng)濟(jì)與學(xué)技術(shù)的蓬勃發(fā)展，醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展在現(xiàn)當(dāng)代取得了一系列舉世矚目的成就，就臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)工作而言，已成為現(xiàn)代醫(yī)院診療工中不可或缺的重要組成部分。隨著現(xiàn)代醫(yī)療診斷技術(shù)的不斷發(fā)展，如何有效地對(duì)臨床免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量進(jìn)行控制已直接影響到臨床的診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，同時(shí)也間接影響到最終地臨床治療效果。由于在整個(gè)標(biāo)本采集的過程中免疫檢驗(yàn)標(biāo)本從采集到結(jié)果的檢驗(yàn)需經(jīng)歷的環(huán)節(jié)較多，這就對(duì)臨床醫(yī)師對(duì)患者的生理、病理情況以及爭(zhēng)端方法的熟悉程度及綜合技能提出了很高的要求；同時(shí)，也對(duì)與之相關(guān)地護(hù)理人員及檢驗(yàn)人員對(duì)于整個(gè)臨床免疫檢驗(yàn)的所有與之相關(guān)的影響因素有全面系統(tǒng)地了解和認(rèn)識(shí)的能力有了更為嚴(yán)格的要求，對(duì)于護(hù)理人員和醫(yī)師及其檢驗(yàn)人員要求將每一個(gè)環(huán)節(jié)的操作及其順序須做到規(guī)范化和統(tǒng)一化，完全按照相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)來嚴(yán)格執(zhí)行，從而達(dá)到確保免疫檢驗(yàn)的可靠性和準(zhǔn)確性的要求，并提高臨床治療的效果。

2 臨床免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制

作為臨床免疫檢測(cè)以及質(zhì)量控制的兩個(gè)主要方面而言，室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)量評(píng)價(jià)對(duì)于整個(gè)臨床免疫檢驗(yàn)是不可或缺的；室內(nèi)質(zhì)量控制主要是指用來監(jiān)測(cè)樣本測(cè)定準(zhǔn)確度的措施，從而達(dá)到確保對(duì)檢測(cè)結(jié)果一致性的目標(biāo)；室間質(zhì)量評(píng)價(jià)是指聯(lián)合多家實(shí)驗(yàn)室對(duì)同一采樣樣本進(jìn)行分析，并且對(duì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證的一種處理措施，這種措施常常是在室內(nèi)質(zhì)控的基礎(chǔ)上進(jìn)行的，通過這種方法來對(duì)實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)水平進(jìn)行最終的評(píng)價(jià)，是實(shí)驗(yàn)室加強(qiáng)室內(nèi)控制的基礎(chǔ)。最近幾年，隨著質(zhì)量控制在整個(gè)實(shí)驗(yàn)管理所占比重的不斷增大，在將整個(gè)樣本的檢測(cè)準(zhǔn)確度不斷提高的前大提下，臨床免疫檢測(cè)人員對(duì)整個(gè)樣本檢測(cè)的所有步驟均需執(zhí)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制措施，從而達(dá)到所取得的臨床效果最大化的目的。

3 提高臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量的方法

3.1 標(biāo)本采集與設(shè)備管理的優(yōu)化

作為檢驗(yàn)分析前對(duì)質(zhì)量控制的要求來說，檢驗(yàn)人員首先需要做到對(duì)標(biāo)本的采集和保存工作；密切注意整個(gè)樣本采集過程中的樣本采集的時(shí)間、止血帶的使用時(shí)間和方法、采血的姿勢(shì)、抗凝劑和穩(wěn)定劑的選用情況。免疫檢驗(yàn)工作，首先要求檢驗(yàn)人員注意對(duì)整個(gè)標(biāo)本的采集和處理工作。不同的采樣試驗(yàn)對(duì)所采集的標(biāo)本的要求有所不同。對(duì)于大多數(shù)以病人血清為標(biāo)本的免疫檢驗(yàn)而言，采集血清的時(shí)間應(yīng)在清晨被采集者未進(jìn)食前為宜，保持針筒的干燥性，抽血完成后需要馬上除去針頭并將所采集到的血液注入到干燥的試管內(nèi)，注意在整個(gè)注血過程中采樣人員的注血速度不宜過快，不能對(duì)所采樣本進(jìn)行振搖等一系列不允許的動(dòng)作，以防溶血。在將整個(gè)血清分離完成后，應(yīng)及時(shí)送往檢測(cè)，如需要求對(duì)所采試樣進(jìn)行保存的話，可將試樣置于冰箱內(nèi)冷藏，不宜速凍，以防止因?yàn)榉磸?fù)凍融而對(duì)整個(gè)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生不良的影響。作為對(duì)測(cè)定的血清標(biāo)本的收集過程來說，激素類和治療藥物的使用要特別注意收集時(shí)間的變化以及檢驗(yàn)人員的變化對(duì)整個(gè)測(cè)定結(jié)果的影響；其次，在采購人員對(duì)于相關(guān)儀器設(shè)備及試劑的選擇方面也同樣對(duì)整個(gè)測(cè)量結(jié)果有著十分大的影響；作為整個(gè)檢驗(yàn)的執(zhí)行者來說儀器設(shè)備性能的好壞將直接對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的精確度造成非常大的影響。在整個(gè)檢測(cè)結(jié)束后要注意地成套儀器的保養(yǎng)和維護(hù)工作，工作人員要經(jīng)常對(duì)溫度計(jì)、水浴箱、酶標(biāo)儀、稀釋棒、恒溫箱、吸量管、分光光度計(jì)等臨床免疫檢驗(yàn)的儀器設(shè)備進(jìn)行核定、校正以及檢查等工作，從而確保儀器設(shè)備的使用性能，減少實(shí)驗(yàn)過程中因?yàn)閮x器所引起的誤差，繼而來保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的目的，最終為意識(shí)的治療及患者的康復(fù)提供最有用的保障。對(duì)于當(dāng)今品魚龍混雜，質(zhì)量不一的試劑市場(chǎng)來說，慎重選擇且經(jīng)常對(duì)試劑性能進(jìn)行有關(guān)試劑的檢定工作是保證檢驗(yàn)成功的重要因素。

3.2 提高技術(shù)人員的素質(zhì)

人是整個(gè)免疫檢驗(yàn)過程中的主體，是整個(gè)免疫檢驗(yàn)過程中最積極、表現(xiàn)最為活躍的因素。在免疫檢驗(yàn)過程工作的所有環(huán)節(jié)，都需要靠人來對(duì)整個(gè)試驗(yàn)進(jìn)行操作和把握，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)整個(gè)臨床免疫檢驗(yàn)質(zhì)量控制的目標(biāo)。因此，在整個(gè)臨床免疫檢測(cè)過程中檢驗(yàn)技術(shù)人員的綜合素質(zhì)與業(yè)務(wù)能力會(huì)對(duì)整個(gè)免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量和結(jié)果產(chǎn)生重大的影響。因此，就要求臨床免疫檢驗(yàn)的工作人員要每天按時(shí)對(duì)相關(guān)檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行消毒、搞好實(shí)驗(yàn)室的衛(wèi)生；做好相關(guān)實(shí)驗(yàn)儀器的定期檢查工作：如冰箱、恒溫箱、水浴箱、酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡等，做好對(duì)整個(gè)實(shí)驗(yàn)儀器的記錄使用情況，并如實(shí)填寫實(shí)驗(yàn)報(bào)告，按規(guī)定進(jìn)行免疫檢驗(yàn)的質(zhì)控工作，并分析情況做好記錄，簽字等工作。

4 小結(jié)

因此，對(duì)于整個(gè)臨床免疫檢驗(yàn)的過程而言，對(duì)免疫檢驗(yàn)做好全面的質(zhì)量管理是確保整個(gè)臨床免疫檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要保證。由于在對(duì)免疫檢驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行采集到對(duì)標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)的這個(gè)過程需經(jīng)歷很繁瑣且比較復(fù)雜的一系列環(huán)節(jié)，因此，就要求臨床醫(yī)師必須要熟悉患者的生理、病理情況，同時(shí)，也要求護(hù)理人員及檢驗(yàn)人員對(duì)臨床免疫檢驗(yàn)的各種影響因素要有全面系統(tǒng)的了解和認(rèn)識(shí)，每一個(gè)環(huán)節(jié)的操作須做到規(guī)范化，完全按照標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行，以確保免疫檢驗(yàn)的可靠性和準(zhǔn)確性，并提高臨床治療效果。

參考文獻(xiàn)

[1] 馬洪濱，王晗，劉立明，等.質(zhì)量控制在臨床免疫檢驗(yàn)中的作用[J].醫(yī)療衛(wèi)生裝備，2012，33（4）.

[2] 董書民.臨床免疫檢驗(yàn)的質(zhì)量控制效果分析[J].中國衛(wèi)生產(chǎn)業(yè)，2011（8）.

篇9

【摘要】 為了切實(shí)提高物理實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量，培養(yǎng)學(xué)生實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?，針?duì)當(dāng)前實(shí)際教學(xué)中出現(xiàn)的問題，對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，教學(xué)方法和考核方式進(jìn)行改革。

【關(guān)鍵詞】 醫(yī)學(xué)物理實(shí)驗(yàn)； 存在問題； 教學(xué)改革

在醫(yī)學(xué)院校中，醫(yī)學(xué)物理學(xué)是一門公共基礎(chǔ)課，一般開設(shè)在大學(xué)第一學(xué)期，是高中生升入醫(yī)學(xué)院校后進(jìn)行專業(yè)學(xué)習(xí)的首要科目。它可以將學(xué)生從高中的物理知識(shí)逐步引入到專業(yè)醫(yī)學(xué)中來，特別是醫(yī)學(xué)物理實(shí)驗(yàn)作為實(shí)踐課程，是學(xué)生系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)技能和方法訓(xùn)練的開端，對(duì)培養(yǎng)醫(yī)學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能和創(chuàng)新能力具有舉足輕重的作用［1］。而在現(xiàn)今醫(yī)學(xué)院校中，醫(yī)學(xué)物理實(shí)驗(yàn)是薄弱環(huán)節(jié)，存在著一些問題，因此有必要對(duì)其進(jìn)行教學(xué)改革。

1 醫(yī)學(xué)院校物理實(shí)驗(yàn)教學(xué)存在的突出問題

1.1 實(shí)驗(yàn)安排陳舊，創(chuàng)新之處不足

在醫(yī)學(xué)物理實(shí)驗(yàn)安排上，驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)多，設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)少；單一性實(shí)驗(yàn)多，綜合性實(shí)驗(yàn)少；傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容多，反映醫(yī)學(xué)物理學(xué)最新進(jìn)展的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容少。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容陳舊、甚至個(gè)別內(nèi)容與中學(xué)內(nèi)容重復(fù)，內(nèi)容多偏物理性與醫(yī)學(xué)應(yīng)用聯(lián)系較少，不利于醫(yī)學(xué)生個(gè)性發(fā)揮、創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。

1.2 過分強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，忽視物理思想和過程

由于過分強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練，學(xué)生機(jī)械地進(jìn)行儀器使用調(diào)整、實(shí)驗(yàn)步驟、數(shù)據(jù)的記錄處理，得出符合理論的結(jié)果，對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行的思考、分析、研究少。學(xué)生感到醫(yī)學(xué)物理實(shí)驗(yàn)的收獲不大，過一段再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，就沒有了印象，教學(xué)效果不佳。

1.3 學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)重要性認(rèn)識(shí)不足，缺乏實(shí)驗(yàn)興趣

學(xué)生從思想上沒有認(rèn)識(shí)到物理實(shí)驗(yàn)對(duì)綜合能力培養(yǎng)的重要性，認(rèn)為純物理性的實(shí)驗(yàn)與醫(yī)學(xué)聯(lián)系甚少，對(duì)醫(yī)學(xué)的學(xué)習(xí)、發(fā)展缺少幫助。學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)中要求掌握的實(shí)驗(yàn)思維方法、技巧及實(shí)驗(yàn)作用等都沒有清晰的認(rèn)識(shí)，表現(xiàn)為學(xué)生實(shí)驗(yàn)技能較差，不愿意做實(shí)驗(yàn)，有相當(dāng)一部分學(xué)生存在嚴(yán)重畏難厭學(xué)情緒，缺乏對(duì)物理實(shí)驗(yàn)的興趣，學(xué)習(xí)狀況不佳。

1.4 實(shí)驗(yàn)課教師講的過多，灌的過多，學(xué)生學(xué)習(xí)效果不佳

實(shí)驗(yàn)的課時(shí)少，在這么短的時(shí)間內(nèi)要求學(xué)生理解實(shí)驗(yàn)原理和儀器原理，掌握儀器的操作、使用并最終完成實(shí)驗(yàn)是相當(dāng)難的。教師只有不厭其煩地將實(shí)驗(yàn)原理、步驟、儀器原理和使用，甚至數(shù)據(jù)處理交代清楚，學(xué)生按部就班地按照教師要求進(jìn)行操作，沒有自由發(fā)揮空間。隨著大學(xué)擴(kuò)招實(shí)驗(yàn)學(xué)生人數(shù)的增多，生源基礎(chǔ)的多樣化，教師工作量不斷加大，學(xué)生對(duì)老師的依賴性較強(qiáng)［2］。

1.5 儀器設(shè)備陳舊，閑置時(shí)間長(zhǎng)

由于經(jīng)費(fèi)投入不足，一些近代物理實(shí)驗(yàn)儀器、綜合性實(shí)驗(yàn)儀器、研究性儀器很難配齊，有些亟待更新的實(shí)驗(yàn)由于資金短缺而不能實(shí)現(xiàn)汰劣納新。物理實(shí)驗(yàn)安排上課時(shí)少，集中在一個(gè)學(xué)期，造成實(shí)驗(yàn)儀器短時(shí)間內(nèi)集中使用，很容易出現(xiàn)故障，部分實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備陳舊老化，影響實(shí)驗(yàn)教學(xué)順利進(jìn)行。物理實(shí)驗(yàn)儀器閑置時(shí)間長(zhǎng)，資源利用率低，不能使有限的教學(xué)資源充分發(fā)揮其效能，造成財(cái)力和物力的極大浪費(fèi)。

轉(zhuǎn)貼于 2 醫(yī)學(xué)物理實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的探討

2.1 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的調(diào)整與革新

為提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)的內(nèi)涵，體現(xiàn)醫(yī)學(xué)物理實(shí)驗(yàn)的特點(diǎn)，首先要取消一些內(nèi)容陳舊、方法過時(shí)的實(shí)驗(yàn)，保留部分對(duì)訓(xùn)練學(xué)生基礎(chǔ)技能行之有效的傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)。如取消利用扭稱測(cè)液體表面張力過時(shí)的實(shí)驗(yàn)方法，采用霍爾傳感器測(cè)液體表面張力更為準(zhǔn)確、方便。重點(diǎn)加強(qiáng)示波器及傳感器應(yīng)用的實(shí)驗(yàn)教學(xué)，介紹物理方面的測(cè)量?jī)x器和測(cè)量手段在醫(yī)學(xué)臨床及科研中的應(yīng)用，為學(xué)生進(jìn)一步使用現(xiàn)代化實(shí)驗(yàn)儀器，獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)打下良好的基礎(chǔ)。其次在實(shí)驗(yàn)內(nèi)容上開設(shè)設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)和綜合性實(shí)驗(yàn)，這樣就要求學(xué)生自己查資料，自己設(shè)計(jì)才能完成。如讀數(shù)顯微鏡，過去只是利用該儀器測(cè)頭發(fā)絲直徑、毛細(xì)管直徑，如今要求學(xué)生利用該儀器測(cè)透明液體的折射率，給學(xué)生提示利用幾何光學(xué)中的單球面物像公式，學(xué)生們經(jīng)過充分思考，最終測(cè)出了液體的折射率。這樣的實(shí)驗(yàn)學(xué)生既動(dòng)手又動(dòng)腦，很有利于學(xué)生個(gè)性發(fā)展，又有利于學(xué)生靈活地運(yùn)用物理基本理論，把知識(shí)轉(zhuǎn)化為能力。最后應(yīng)該注入一些新穎的、與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)聯(lián)系緊密的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。因?yàn)榭紤]到學(xué)生將來進(jìn)入各大醫(yī)院及醫(yī)、藥研究所、生產(chǎn)部門會(huì)遇到一些現(xiàn)代化設(shè)備和實(shí)驗(yàn)方法，因此在學(xué)生掌握基本物理實(shí)驗(yàn)方法和誤差理論的基礎(chǔ)上，盡可能多地接觸現(xiàn)代化儀器設(shè)備及現(xiàn)代化的實(shí)驗(yàn)方法，如利用醫(yī)用傳感器測(cè)量脈搏波、呼吸波、心音、壓力，利用原子光譜儀分析研究藥物成分、結(jié)構(gòu)以及進(jìn)行醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)。再如對(duì)血液粘度的測(cè)定、細(xì)胞流變性的測(cè)定和超聲醫(yī)學(xué)測(cè)量等實(shí)驗(yàn)。通過實(shí)驗(yàn)來說明物理學(xué)原理和技術(shù)應(yīng)用于醫(yī)學(xué)，不僅可以提高學(xué)生學(xué)習(xí)物理課的興趣，對(duì)其后續(xù)課程內(nèi)容的理解及今后的工作都是十分有益的。

2.2 教學(xué)方法的革新

培養(yǎng)學(xué)生的興趣是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)的首要任務(wù)。建議在講緒論課前組織學(xué)生參觀醫(yī)院的X射線放射治療室、CT診斷室、B超室、彩色多譜勒診斷室等或者播放醫(yī)學(xué)物理學(xué)的教學(xué)影片，讓學(xué)生對(duì)醫(yī)用物理學(xué)與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)及其手段的關(guān)系有個(gè)初步的感性認(rèn)識(shí)，由此讓學(xué)生感到好奇，激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)興趣。學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性提高了，自然在后續(xù)實(shí)驗(yàn)時(shí)間中多做實(shí)驗(yàn)。教學(xué)過程中要求學(xué)生在每次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目前必須大量翻閱、預(yù)習(xí)講義及有關(guān)資料、說明書等，讓學(xué)生形成了良好的查閱資料、預(yù)習(xí)的習(xí)慣。這樣可以減少教師講授內(nèi)容，改變以前罐的過多，學(xué)生自由操作時(shí)間少的問題。學(xué)生自己看書獨(dú)立操作，獨(dú)立讀取數(shù)據(jù)，在教師指導(dǎo)下完成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析討論和實(shí)驗(yàn)報(bào)告內(nèi)容，逐步提高了他們的獨(dú)立思維及判斷能力，這樣學(xué)生會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容、儀器操作留下深刻的印象，不會(huì)出現(xiàn)做了就忘，沒有實(shí)驗(yàn)收獲的現(xiàn)象。在教學(xué)手段上應(yīng)用多媒體技術(shù)優(yōu)化教學(xué)過程，引入文字、圖片、聲音和動(dòng)畫多種信息表達(dá)方式，可以節(jié)約板書時(shí)間，增加講解的時(shí)間，提高教學(xué)效率，改善教學(xué)質(zhì)量。

2.3 建立“半開放式”、“選修實(shí)驗(yàn)”教學(xué)方式

為了提高學(xué)生基本操作，增加學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的興趣，發(fā)揮學(xué)生主動(dòng)性、積極性，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室設(shè)備和教學(xué)情況，可以對(duì)學(xué)生開放部分實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目［3］。由實(shí)驗(yàn)室提供儀器、設(shè)備和相關(guān)的資料說明書，讓學(xué)生自學(xué)實(shí)驗(yàn)原理、儀器使用方法，獨(dú)立進(jìn)行教學(xué)要求的各環(huán)節(jié)內(nèi)容。另外考慮到課時(shí)少，學(xué)習(xí)收獲不足；滿足學(xué)生濃厚的興趣和求知欲；對(duì)最新實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)方法的掌握；實(shí)驗(yàn)室經(jīng)費(fèi)資金短缺等一些實(shí)際問題，對(duì)學(xué)生開設(shè)選修實(shí)驗(yàn)課程。結(jié)合科研工作，選擇一些物理實(shí)驗(yàn)?zāi)康拿鞔_、經(jīng)過實(shí)踐檢驗(yàn)優(yōu)秀、具有實(shí)際臨床意義的實(shí)驗(yàn)作為選修實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目，同時(shí)購置一到兩臺(tái)具有現(xiàn)代化水平且用于醫(yī)學(xué)科研或臨床診斷的儀器，作為示范操作實(shí)驗(yàn)。學(xué)生根據(jù)自己的興趣自由選擇實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。全年開設(shè)選修實(shí)驗(yàn)課程同時(shí)可以解決實(shí)驗(yàn)儀器閑置時(shí)間長(zhǎng)，資源利用率低的問題。通過這些實(shí)驗(yàn)既可以讓學(xué)生多了解物理原理在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用，掌握先進(jìn)儀器的操作使用，又能培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的能力。

2.4 考核方式的改革

以往對(duì)于物理實(shí)驗(yàn)的考核是通過筆試?yán)碚摮煽?jī)和平時(shí)實(shí)驗(yàn)成績(jī)，平時(shí)實(shí)驗(yàn)成績(jī)只是實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)。這樣會(huì)造成學(xué)生重實(shí)驗(yàn)報(bào)告，輕實(shí)驗(yàn)操作，重理論，輕動(dòng)手的弊病，不利于素質(zhì)的培養(yǎng)。為督促學(xué)生認(rèn)真做實(shí)驗(yàn)，真正考核學(xué)生實(shí)驗(yàn)?zāi)芰?，可將物理?shí)驗(yàn)課成績(jī)分為三部分：一是筆試?yán)碚摮煽?jī)，考查學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)方法以及實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)的掌握；二是平時(shí)實(shí)驗(yàn)的成績(jī)，這包括每次實(shí)驗(yàn)課學(xué)生出勤情況，具體操作情況以及實(shí)驗(yàn)報(bào)告情況，每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束以后教師當(dāng)堂給出成績(jī)；三是期末操作能力的成績(jī)，應(yīng)采取對(duì)學(xué)生隨機(jī)抽查的形式，同時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目也進(jìn)行隨機(jī)選擇，對(duì)學(xué)生平時(shí)的實(shí)驗(yàn)效果進(jìn)行實(shí)際的檢驗(yàn)。這三部分各占一定比例。這樣的考核方式，既可以使學(xué)生重視平時(shí)的實(shí)驗(yàn)過程，調(diào)動(dòng)起學(xué)生的積極性和主動(dòng)性，又可以真正地提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作及分析、解決問題的能力。

參考文獻(xiàn)

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篇10

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組

相同遺傳背景的雄性SD大鼠（購自浙江省動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心）72只，體質(zhì)量300～350 g，隨機(jī)（隨機(jī)數(shù)字法）分為4組：Sham組（枕大池注生理鹽水）、SAH組（枕大池注血）、SAH+SP600125組（SAH模型建立前枕大池注射SP600125）和SAH+DMSO組（SAH模型建立前枕大池注射DMSO）。

1.2 枕大池注血法制作自發(fā)性SAH模型

大鼠左右耳根連線中點(diǎn)枕外隆凸往下約0.5 cm可及一凹陷，5號(hào)半頭皮針在此處以45°扎入0.5 cm左右，斷尾取自體血0.3 ml以0.1 ml/min緩慢注入枕大池。保持大鼠俯臥位、頭低30°，持續(xù)30 min，讓血液靠重力作用下進(jìn)入基底池。對(duì)于Sham組大鼠，則往枕大池內(nèi)注入0.3 ml生理鹽水，其余步驟均相同。造模完成后將大鼠放回籠中飼養(yǎng)，保證每天的飼料和飲水充足，觀察大鼠的精神、行為和飲食等情況并進(jìn)行記錄[4]。

1.3 JNK抑制劑SP600125

將JNK抑制劑SP600125（美國Sigma公司）溶解在1 ml 100% DMSO（美國Sigma公司）中，SAH+SP600125組在注血前15 min以0.3 mg/kg緩緩注入枕大池，而SAH+DMSO組則注入相同劑量DMSO[5-6]。

1.4 腦組織含水量及BBB通透性測(cè)定

各組大鼠分別在SAH 24 h后迅速斷頭取腦，濾紙吸去表面血液和水分，分別用分析天平稱濕質(zhì)量（分度值0.1 mg），然后置入試管內(nèi)，在105℃恒溫干燥箱內(nèi)烘烤至恒重（兩次質(zhì)量差≤0.2 mg）后取出稱干質(zhì)量，腦組織含水量=[（濕質(zhì)量-干質(zhì)量）/濕質(zhì)量]×100%[7]。以0.5、1、2、4、6、8、10 μg/ml為伊文氏藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)濃度，繪制伊文氏藍(lán)標(biāo)準(zhǔn)曲線。處死前1 h經(jīng)右側(cè)股靜脈注射2%伊文氏藍(lán)（5 ml/kg，美國Sigma公司），麻醉后常規(guī)灌注。迅速取腦，濾紙吸去表面血液和水分后稱重，加入5倍體積的二甲基甲酰胺（廣州金華大化學(xué)試劑有限公司），60℃水浴中孵育24 h，1500 r/min離心10 min，取上清液，用紫外分光光度計(jì)在伊文氏藍(lán)最大吸收光譜620 nm處測(cè)吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得伊文氏藍(lán)含量，結(jié)果以μg/g腦組織表示[8]。

1.5 免疫組織化學(xué)染色

SP法行Claudin 5及JNK免疫組織化學(xué)染色，常規(guī)脫蠟至水；3%H2O2去離子水室溫孵育20 min；微波爐加熱法抗原修復(fù)；滴加正常山羊血清工作液封閉，室溫孵育10～15 min；滴加兔抗Claudin 5及JNK抗體（1∶300），4℃過夜；滴加生物素化二抗工作液（IgG/Bio），37℃孵育20 min；滴加辣根酶標(biāo)記鏈霉卵白素工作液（SA/HRP），37℃孵育20 min；DAB顯色，顯微鏡下控制染色程度；蘇木素溶液復(fù)染、1%鹽酸乙醇溶液分化、1%氨水返藍(lán)；梯度乙醇逐級(jí)脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。其中，Claudin 5及JNK抗體購自Santa Cruz公司。

1.6 Western blot檢測(cè)

將冰凍的腦組織用蛋白提取試劑盒提取總蛋白，定量試劑盒（BCA法）測(cè)定蛋白濃度。依次加入5×上樣緩沖液煮沸、上樣、電泳、轉(zhuǎn)膜、封閉，滴加兔抗Claudin 5及JNK（1∶750）4℃搖晃12 h，PBST洗膜15 min×3次，滴加生物素標(biāo)記的二抗（1∶2000），4℃搖晃3 h，PBST洗膜10 min×3次后行ECL發(fā)光5 min，應(yīng)用膠片曝光，結(jié)果掃入凝膠成像系統(tǒng)進(jìn)行吸光度分析。用目的條帶與βactin條帶的吸光度比值表示樣本表達(dá)強(qiáng)度。其中，Claudin 5及JNK抗體購自Santa Cruz公司。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析，兩兩比較采用LSDt或SNKq檢驗(yàn)，并對(duì)JNK與Claudin 5之間進(jìn)行Pearson相關(guān)分析，以P

2 結(jié)果

2.1 腦組織含水量測(cè)定

干濕質(zhì)量法測(cè)定腦組織含水量，與Sham組（76.93±1.30）%相比，SAH（79.61±1.32）%和SAH+DMSO組（79.30±1.09）%在SAH 24 h后腦組織含水量顯著增加（P

2.2 BBB通透性測(cè)定

伊文氏藍(lán)法評(píng)估BBB通透性，SAH組在SAH誘導(dǎo)后24 h可見各腦區(qū)伊文氏藍(lán)明顯外滲，為（9.92±0.88） μg/g腦組織，相對(duì)于Sham組（3.47±0.32） μg/g腦組織，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.3 免疫組織化學(xué)染色

免疫組織化學(xué)染色后可見JNK與Claudin 5均為胞漿表達(dá)。Sham組眾多腦血管內(nèi)皮細(xì)胞和室管膜上皮細(xì)胞胞漿棕褐色著色，為Claudin 5陽性蛋白表達(dá)，而幾乎找不見JNK陽性蛋白表達(dá)。SAH誘導(dǎo)JNK表達(dá)，在SAH和SAH+DMSO組大腦半球可見很多胞漿深褐色著色，為JNK陽性表達(dá)神經(jīng)元，卻很難發(fā)現(xiàn)Claudin 5蛋白陽性表達(dá)。SP600125的干預(yù)則逆轉(zhuǎn)上述過程。

2.4 JNK及Claudin 5的表達(dá)

SAH 24 h后JNK表達(dá)的吸光度值高達(dá)（0.58±0.05），較Sham組（0.12±0.02）顯著升高（P

3 討論

盡管2/3的SAH患者在出血的最初48 h內(nèi)死亡，但是SAH急性期的重要性卻仍然沒有引起人們足夠的重視，EBI的機(jī)制知之甚少，因此，到目前為止仍然沒有有效的治療措施。EBI的特點(diǎn)是顱內(nèi)壓的突然上升，緊接著腦灌注壓和腦血流量的嚴(yán)重下降，從而導(dǎo)致全腦缺血，這些主要機(jī)制觸發(fā)了諸如BBB破壞、腦水腫、急性腦血管痙攣等次要現(xiàn)象，同時(shí)在分子水平上表現(xiàn)為缺氧狀態(tài)下的細(xì)胞呼吸作用、能量耗竭、興奮毒性以及自由基生成等[9-10]。這些早期損傷機(jī)制都能成為潛在的干預(yù)治療的靶點(diǎn)。EBI是SAH患者死亡的首要原因，這可能與顱內(nèi)壓上升及腦血流量下降所導(dǎo)致的腦缺血發(fā)揮的重要作用有關(guān)，然而，該急性期確切的潛在損傷機(jī)制仍然尚未確定。腦水腫作為SAH后EBI的重要組成部分，是BBB功能障礙的直接后果。Schller等[11]通過CT掃描后發(fā)現(xiàn)有8%的入院患者存在全腦水腫，同時(shí)，許多研究表明SAH被誘導(dǎo)后的24 h，雙側(cè)大腦半球的腦組織含水量明顯增加，并且這種水腫性改變以同側(cè)更為顯著，因而本研究選擇24 h作為觀察的時(shí)間點(diǎn)。

Claudin蛋白家族至少有24個(gè)成員，促使TJ的形成。Claudin有兩個(gè)細(xì)胞外環(huán)與毗鄰血管內(nèi)皮細(xì)胞上的Claudin相連，維持TJ的緊密性[12]。Claudin 3、5和12已被確定存在于BBB血管內(nèi)皮細(xì)胞上[13]。Claudin 1也被證實(shí)存在于腦組織中，但是在體外與體內(nèi)評(píng)估以及物種評(píng)價(jià)中存在差異性，目前仍有爭(zhēng)議[14]。有證據(jù)表明Claudin 5特異性地涉及BBB小分子旁細(xì)胞通透性的活性調(diào)節(jié)。目前發(fā)現(xiàn)，上調(diào)Claudin 5表達(dá)的藥物能增加跨血管內(nèi)皮細(xì)胞電阻，并減少BBB通透性[15]。此外，缺乏Claudin 5基因的大鼠顯示出BBB完整性的缺損，能增加相對(duì)分子質(zhì)量小于800的大分子的腦攝取。

本研究發(fā)現(xiàn)SAH 24 h各腦區(qū)伊文氏藍(lán)明顯外滲，腦水腫明顯，而與此同時(shí)，Claudin 5的表達(dá)亦顯著降低。這些現(xiàn)象說明SAH抑制Claudin 5表達(dá)，使其喪失調(diào)節(jié)活性，從而導(dǎo)致TJ復(fù)合體裝配紊亂，促使旁細(xì)胞通透性增加[16]。與此同時(shí)，JNK的表達(dá)則顯著升高，說明SAH引起腦組織廣泛的應(yīng)激反應(yīng)，從而激活數(shù)個(gè)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，經(jīng)過一系列連鎖反應(yīng)使JNK磷酸化而激活[17-18]，從而抑制了Claudin 5的轉(zhuǎn)錄和翻譯，Claudin 5合成和降解之間的動(dòng)態(tài)平衡被打破，從而破壞TJ復(fù)合體的完整性，導(dǎo)致BBB通透性增加，促使腦水腫的發(fā)生和發(fā)展。

JNK抑制劑SP600125是一種強(qiáng)效的ATP競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑，具有可逆性、選擇性以及細(xì)胞滲透性。本研究發(fā)現(xiàn)，SAH和SAH+DMSO組在SAH誘導(dǎo)后24 h各腦區(qū)伊文氏藍(lán)明顯外滲，腦水腫明顯，并出現(xiàn)腦組織結(jié)構(gòu)破壞及神經(jīng)元損傷。而SP600125則能逆轉(zhuǎn)上述過程，抑制JNK磷酸化，解除其對(duì)Claudin 5表達(dá)的負(fù)性調(diào)節(jié)作用，恢復(fù)TJ的正常裝配過程，維持BBB結(jié)構(gòu)和功能的完整性。因而SP600125能有效緩解SAH后腦水腫的發(fā)生和發(fā)展，為SAH EBI的診斷和治療提供新的靶點(diǎn)。

綜上所述，SAH激活JNK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，并通過負(fù)性調(diào)節(jié)Claudin 5的表達(dá)，破壞BBB結(jié)構(gòu)和功能的完整性，促使腦水腫的發(fā)生和發(fā)展，出現(xiàn)腦組織結(jié)構(gòu)破壞及神經(jīng)元損傷，導(dǎo)致EBI，而JNK抑制劑SP600125則能在一定程度上逆轉(zhuǎn)上述過程。

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