情人節英語范文
時間：2023-03-19 08:51:20
導語：如何才能寫好一篇情人節英語，這就需要搜集整理更多的資料和文獻，歡迎閱讀由公務員之家整理的十篇范文，供你借鑒。
篇1
英語的情人節祝福語一
1. you and me together, we can make magic.我們兩個一起可以創造奇跡。
2. i can be myself when i am with you.和你在一起的時候我才是真正的自己。
3. you always say what i need to hear.你的話總是那么悅耳動聽。
4. your love gives me the feeling that the best is still ahead.你的愛讓我相信我們的未來會更好。
5. you're the one who holds the key to my heart.只有你，握著開啟我心門的鑰匙。
6. you have taught me the true meaning of love. love is, what you mean to me - and you mean everything.你教會了我愛的意義。愛就是你在我心中的分量——而你，就是一切。
7. i have had the time of my life and i owe it all to you.我生命中的美好時光全都歸功于你。
8. your undying faith is what keeps the flame out of love alive.你永恒的信任讓我們的愛火永不熄滅。
9. you are my theme for a dream.你是我夢的主旋律。
10. every time i look at you, my heart misses a beat.每次看著你，我的心都會漏跳一拍。
11.天下有情人終成眷屬may i wish that all jacks shall have jills, all shall be well.
12.我想在情人節緊握你的手。親愛的，情人節快樂。i want to hold your hand on valentine’s day. happy valentine’s day, sweetie.
13.情人節快樂：happy valentine's day!!
14.希望你的心上人早日出現。wish your mr.right/miss right will appear soon.
15.祝你們朝朝暮暮，纏纏綿綿到永久。may you two linger on each other every day and night till the end of time.
16.我倆的愛，一年比一年更堅定。親愛的，情人節快樂。our love grows stronger with every passing year. happy valentine’s day, sweetie.
17.愿我倆的愛情永遠不變！：may our love will last forever.
18.愿你們一起分享生命中的每一天，直到永遠。may you two share every day of life together till forever.
19.一如既往的我，愿情人節快樂！as always ，i hope the sweetheart festival to be joyful!
20.你是我生命的全部。請說你愿意。情人節快樂，我親愛的。you mean everything to me. please say yes.happy valentine’s day, honey!
22.你走出了我的夢，投入我的懷里。我不能讓你走。情人節快樂。you stepped out of my dreams andsintosmy arms. i can’t let you go. happy valentine’s day.
23.送你一個吻，悄悄的說我很高興你是我的。情人節快樂！sending you a kiss to say i’m glad that you are mine. happy the day!
24.真誠，不必隱藏，把所有的話語，都寫在那小小的賀卡上。祝我新愛的人，情人節快樂。be genuine and conceal noting.i write every wiod i wand to say on this small card.i wish my honey a happy valentine’s day.
25.愿情人節帶給我們丘比特之愛和暖融融的浪漫。情人節快樂！may this valentine bless us with the cupid of love and warmth of romance. happy valentine’s day honey!
26.我一直不相信有真正的“幸福”，直到不久以后，我邂逅了你。親愛的，情人節快樂。i didn’t think that i could ever trust happiness. then i met you.happy valenti ne’s day, dear.
27、just because someone doesn‘t love you the way you want themto,doesn‘t mean they don‘t love you with alltheyhave.
愛你的人如果沒有按你所希望的方式來愛你，那并不代表他們沒有全心全意地愛你。
28、the worst way to miss someone is to be sitting center besidethemknowing you can‘t have them.
失去某人，最糟糕的莫過于，他近在身旁，卻猶如遠在天邊。
29、to the world you may be one person, but to one person you maybethe world.
對于世界而言，你是一個人;但是對于某個人，你是他的整個世界。
30、i love to be the one you always think of,
the one you share the joys and hardships with,
i'll always love to be the one you love.
我多想做你時刻思念的人，
你傾訴夢想的人，
與你同甘共苦的人，
我總想做你所愛的人。
31、i have been sleeping all alone,
you have been staring in my dreams.
i want to kiss you, my baby,
i want to kiss you tonight.
我一直孤獨入眠，
睡夢中你出現在我的眼前，
我要親吻你，我的愛人，
今夜我就要親吻你。
32、my love is like the grasses
hidden in the deep mountains.
though its abundance increase,
there is none that knows.
我的愛情 猶如青草，
藏在深山。
它郁郁蔥蔥，
卻無人知曉。
33、oh, my love, my darling,
i have hungered for you touch a long time.
and time goes by so slowly, and time can do so much.
are you still mine?
i need your love,
god speed your love to me.
哦!我的愛，親愛的，
我渴望你的撫摸已經好久了。
而時光難熬，它能改變許多事，
你還是我的嗎?
我需要你的愛。
愿上帝賜給我你的愛。
34、i just can't believe the loveliness of loving you.
i just can't believe the one to love this feeling, too.
i now know how sweet a kiss could be.
like the summer sunshine,
your sweetness over me.
我簡直不敢相信，愛你是如此地美好。
我不敢相信你也有如此感覺。
我現在才明白吻原是那么甜蜜，
就像夏日的陽光，
包含著你對我的柔情蜜意。
35、maybe god wants us to meet a few wrong people before meetingthecenter one, so that when we finally meet the person, we willknowhow to begrateful.
在遇到夢中人之前，上天也許會安排我們先遇到別的人;在我們終于遇見心儀的人時，便應當心存感激。
英語的情人節祝福語二
1.Every man is a poet when he is in love.
每個戀愛中的人都是詩人。
2.Love is a chord in life, not a solo.
愛是人生的和弦，而不是孤獨的獨奏曲。
3.Don't cry because it is over, smile because it happened.
不要因為結束而哭泣，微笑吧，為你的曾經擁有。
4.There will always be people who'll hurt you, so you need to continue trusting, just be careful.
生活中總會有人想傷害你，你仍然需要繼續相信別人，只是小心點而已。
5.Maybe God wants us to meet a few wrong people before meeting the right one, so that when we finally meet the person, we will know how to be grateful.
在遇到夢中人之前，上天也許會安排我們先遇到別的人；在我們終于遇見心儀的人時，便應當心存感激。
6.Love is ever matter of comedies, and how and then of tragedies.
愛情常是喜劇，偶爾是悲劇。
7.Love triumphs over everthing. Love has no age, no limit and no death.
情戰勝一切。愛情沒有壽命，沒有極限，不會死亡。
8.To the world you may be one person, but to one person you may be the world.
對于世界而言，你是一個人；但是對于某個人，你是他的整個世界。
9.Love is not only a sentiment but also an art.
愛情不僅僅是感情，它也是藝術。
10.Love and a cough cannot be hid.
愛情跟咳嗽一樣是掩飾不了的。
11.Never stop smiling, not even when you're sad, some man fall in love with your smile.
永遠都不要停止微笑，即使在你難過的時候，說不定有人會因為你的微笑而愛上你。
12.The worst way to miss someone is to be sitting right beside them knowing you can't have them.
失去某人，最糟糕的莫過于，他近在身旁，卻猶如遠在天邊。
13.To love and to be loved is the greatest happiness of existence.
愛人和被人愛是人生最大的幸福。
14.True love's the gift which God has given to man alone beneath the heaven.
真愛是上帝單獨賜予普天下蕓蕓眾生的禮物。
篇2
The mature never ask the past, the wise never ask the present and the open-minded never ask the future.
愛，又何必多問?成熟的人不問過去，聰明的人不問現在，豁達的人不問未來。
The key for happiness is not to find a perfect person, but find someone and build a perfect relationship with him.
幸福的關鍵不在與找到一個完美的人，而在找到一個人，然后和他一起努力建立一個完美的關系。
If you leave me, please don't comfort me because each sewing has to meet stinging pain.
離開我就別安慰我，要知道每一次縫補也會遭遇穿刺的痛。
The most special feeling of human is the one-sided love. That's the unique.
You would never see a cat loving another cat in secret.
人類的感情最特別的就是單戀，那是絕無僅有的。你絕不會看到一只貓，會偷偷地喜歡上另一只貓。
Do you think that the sourest feeling is to be jealous? No, the sourest thing is that you have no rights to be jealous. That's the sourest thing.
你以為最酸的感覺是吃醋嗎?不是的，最酸溜溜的感覺是沒權吃醋，根本就輪不到你吃醋
The love world is big, which can hold hundreds of disappointments; the love world is small which is crowded even with three people inside.
原來愛情的世界很大，大到可以裝下上百種委屈;原來愛情的世界很小，小到三個人就擠到窒息。
To the world you may be one person, but to one person you may be the world.
對于世界而言，你是一個人;但是對于某個人，你是他的整個世界。
Don‘t waste your time on a man/woman, who isn‘t willing to waste their time on you.
不要為那些不愿在你身上花費時間的人而浪費你的時間。
Don‘t try so hard, the best things come when you least expect them to.
不要著急，最好的總會在最不經意的時候出現。
Maybe God wants us to meet a few wrong people before meeting the right one, so that when we finally meet the person, we will know how to be grateful.
在遇到夢中人之前，上天也許會安排我們先遇到別的人;在我們終于遇見心儀的人時，便應當心存感激
It is better to have love and lost than never to have loved at all.
寧可曾經愛過而失敗，也不要從來未曾有過一次愛。
Love me little, love me long.
愛不貴親密，而貴長久。
To live in a world without you is more painful than any punishment. Do you know that no one can replace you in my heart?
生活在沒有的你的世界，比任何一種懲罰都要痛苦，你知道嗎，對我而言，你是任何人都無法取代的。
If love is a mountain, then if men go up, more women they will see while women will see fewer men.
如果愛情像座山，那么男人越往上走可以俯視的女人就越多，而女人越往上走可以仰視的男人就越少。
Love makes man grow up or sink down.
愛情，要么讓人成熟，要么讓人墮落。
The only thing you can do when you no longer have something is not to forget.
當你不能再擁有的時候，唯一可以做的就是令自己不要忘記。
Most of people are looking forward the crystal-like love—pure without any defect. However the truth is most people are having the glass-like love.
許多人向往水晶般的愛情,晶瑩剔透沒有瑕疵。但更多人擁有的是玻璃般的愛情。
When every love comes to the end, if you look back, you will find flowers and sorrows, but it's always beautiful.
每段愛情在走向終結時，倒帶回去，一路上或花草鮮美，或落英繽紛，而最初總是傾心的。
To lose in something you love is better than to win in something you hate.
寧可失敗在你喜歡的事情上，也不要成功在你所憎惡的事情上。
Sometimes you need to look back; otherwise you will never know what you have lost in the way of forever searching.
偶爾要回頭看看，否則永遠都在追尋，而不知道自己失去了什么
It's often said that you will have the same life as the person you find.
Therefore, different choices make different endings.
人們說，找到了什么樣的人就有了什么樣的生活，于是不同的選擇，就有不同的童話結尾。
No man or woman is worth your tears, and the one who is, won‘t make you cry.
沒有人值得讓你為他/她流淚，值得讓你這么做的人不會讓你哭泣。
I love you not because of who you are, but because of who I am when I am with you.
我愛你，不是因為你是一個怎樣的人，而是因為我喜歡與你在一起時的感覺。
An unacceptable love needs no sorrow but sometime for forgetting.
A badly-hurt heart needs no sympathy but understanding.
一段不被接受的愛情，需要的不是傷心，而是時間，一段可以用來遺忘的時間。
一顆被深深傷了的心，需要的不是同情，而是明白。
篇3
This festival is in mid-summer when the weather is warm and the grass and trees reveal their luxurious greens. At night when the sky is dotted with stars, and people can see the Milky Way spanning from the north to the south. On each bank of it is a bright star, which see each other from afar. They are the Cowherd and Weaver Maid, and about them there is a beautiful love story passed down from generation to generation.
Long, long ago, there was an honest and kind-hearted fellow named Niu Lang (Cowhand). His parents died when he was a child. Later he was driven out of his home by his sister-in-law. So he lived by himself herding cattle and farming. One day, a fairy from heaven Zhi Nu (Weaver Maid) fell in love with him and came down secretly to earth and married him. The cowhand farmed in the field and the Weaver Maid wove at home. They lived a happy life and gave birth to a boy and a girl. Unfortunately, the God of Heaven soon found out the fact and ordered the Queen Mother of the Western Heavens to bring the Weaver Maid back.
With the help of celestial cattle, the Cowhand flew to heaven with his son and daughter. At the time when he was about to catch up with his wife, the Queen Mother took off one of her gold hairpins and made a stroke. One billowy river appeared in front of the Cowhand. The Cowhand and Weaver Maid were separated on the two banks forever and could only feel their tears. Their loyalty to love touched magpies, so tens of thousands of magpies came to build a bridge for the Cowhand and Weaver Maid to meet each other. The Queen Mother was eventually moved and allowed them to meet each year on the 7th of the 7th lunar month. Hence their meeting date has been called "Qi Xi" (Double Seventh).
Scholars have shown the Double Seventh Festival originated from the Han Dynasty (206 BC-AD220). Historical documents from the Eastern Jin Dynasty (AD371-420) mention the festival, while records from the Tang Dynasty (618-907) depict the grand evening banquet of Emperor Taizong and his concubines. By the Song (960-1279) and Yuan (1279-1368) dynasties, special articles for the "Qi Xi" were seen being sold on markets in the capital. The bustling markets demonstrated the significance of the festival.
Today some traditional customs are still observed in rural areas of China, but have been weakened or diluted in urban cities. However, the legend of the Cowhand and Weaver Maid has taken root in the hearts of the people. In recent years, in particular, urban youths have celebrated it as Valentine's Day in China. As a result, owners of flower shops, bars and stores are full of joy as they sell more commodities for love.
雙七節,在陰歷7月7日,是中國傳統節日中最具浪漫色彩的。它經常在陽歷8月進入
這個節日是在仲夏,天氣溫暖,草木揭示其奢華的綠色。晚上天空點綴著星星時,人們可以看到銀河系跨越從北到南。在每個銀行是一顆明亮的星星,從遠處看到對方。他們是牛郎和織工女仆,對他們有一個美麗的愛情故事一代一代傳下來。
很久很久以前,有一個誠實和善良的名叫妞妞朗(牧牛工)。他的父母去世時,他還是個孩子的時候。后來他被他的嫂子趕出他的家。所以他靠自己放牧牲畜和農業。一天,一位仙女從天上之怒(編織女傭)愛上了他和秘密下來到地球并嫁給了他。牧童養殖領域和韋弗女仆編織在家里。他們過著幸福的生活,生了一個男孩和一個女孩。不幸的是,天上的神很快發現這樣一個事實,并下令太后西方天堂把韋弗女仆。
在老牛的幫助下,牛郎飛到天堂和他的兒子和女兒。時他正要趕上他的妻子,女王母親脫下她的一只金簪,中風。一個洶涌的河出現在前面的牧童。牧牛工和韋弗女仆永遠分離的兩家銀行,只會覺得自己的眼淚。他們的忠誠的愛情感動了喜鵲,成千上萬的喜鵲來建造一座橋梁牧牛工和韋弗女仆來滿足彼此。女王的母親最終被移動和允許他們來滿足每年的陰歷7月7日。習因此他們會議日期被稱為“氣”(雙第七)。
學者所示雙七節起源于漢朝(206 BC-AD220)。從東晉王朝歷史文獻(ad371 - 420)提到的節日,同時記錄從唐朝(618 - 907)描述的盛大晚宴唐太宗李世民和他的小妾。通過這首歌(960 - 1279)元(1279 - 1368)時期,特殊物品的“氣習”被認為在資本市場上出售。熙熙攘攘的市場展示了節日的意義。
篇4
有關情人節英文祝福語
1.May this Valentine bless us with the cupid of love and warmth of romance. Happy Valentine's Day Honey!
愿情人節帶給我們丘比特之愛和暖融融的浪漫。情人節快樂!
2.You stepped out of my dreams andsintosmy arms. I can't let you go. Happy Valentine's Day.
你走出了我的夢，投入我的懷里。我不能讓你走。情人節快樂。
3.I didn't think that I could ever trust happiness. Then I met you.Happy Valenti ne's Day, Dear.
我一直不相信有真正的“幸福”,直到不久以后，我邂逅了你。親愛的，情人節快樂。
4.Every man is a poet when he is in love.
每個戀愛中的人都是詩人。
5.Love is a chord in life, not a solo.
愛是人生的和弦，而不是孤獨的獨奏曲。
6.Love is ever matter of comedies, and how and then of tragedies.
愛情常是喜劇，偶爾是悲劇。
7.Love triumphs over everthing. Love has no age, no limit and no death.
情戰勝一切。愛情沒有壽命，沒有極限，不會死亡。
8.To the world you may be one person, but to one person you may be the world.
對于世界而言，你是一個人;但是對于某個人，你是他的整個世界。
9.Love is not only a sentiment but also an art.
愛情不僅僅是感情，它也是藝術。
10.Love and a cough cannot be hid.
愛情跟咳嗽一樣是掩飾不了的。
11.Never stop smiling, not even when you're sad, some man fall in love with your smile.
永遠都不要停止微笑，即使在你難過的時候，說不定有人會因為你的微笑而愛上你。
12.The worst way to miss someone is to be sitting right beside them knowing you can't have them.
失去某人，最糟糕的莫過于，他近在身旁，卻猶如遠在天邊。
13.To love and to be loved is the greatest happiness of existence.
愛人和被人愛是人生最大的幸福。
14.True love's the gift which God has given to man alone beneath the heaven.
真愛是上帝單獨賜予普天下蕓蕓眾生的禮物。
15.No man or woman is worth your tears, and the one who is, won't make you cry.
沒有人值得你流淚，值得讓你這么做的人不會讓你哭泣。
16.ust because someone doesn't love you the way you want them to, doesn't mean they don't love you with all they have.
愛你的人如果沒有按你所希望的方式來愛你，那并不代表他們沒有全心全意地愛你。
17.I love you not because of who you are, but because of who I am when I am with you.
我愛你，不是因為你是一個怎樣的人，而是因為我喜歡與你在一起時的感覺!
18.This card is to let you know that I still love you after all of these years.
這張卡片是要讓你知道，縱使時光荏苒，我卻愛你如初。
19.After 25 years, our love is even stronger than before.
25年已經過去，我倆的愛情歷久彌堅。
20.You were my high school sweetheart, And still are.
高中時代，你是我的意中人，一直到今天，你還是。
21.To my one and only Valentine: I love you.
獻給我惟一的愛人：我愛你。
22.You h***e always been there for me, And I will always be there for you. Happy Valentine's Day.
你永遠在那里等待著我，而我也將永遠在那里守候著你。情人節愉快。
23.I fell in love with you when I first saw you, And I still am after 40 years.
40年前，我對你一見鐘情。到如今，對你的感情仍絲毫未減。
24.I didn't think that I could ever trust happiness. then I met you. Happy Valenti ne's Day, Dear.
我一直不相信有真正的“幸福”,直到不久以后，我邂逅了你。親愛的，情人節快樂。
25.Our love grows stronger with every passing year. Happy Valentine's Day, Baby.
我倆的愛，一年比一年更堅定。小寶貝，情人節快樂。
26.You have been And still are my only true Valentine.
從過去到現在，你一直是我惟一真正愛戀的人。
27.To the girl of my dreams And the mother of our child: you are the only Valentine for me.
獻給我夢中的女孩及我們孩子的母親：你是我惟一的愛人
28.I will be your Valentine until the end of time.
我將是你的情人，直到地老天荒。
29.After all these years I still feel like a schoolboy when I hold your hand. I'm thinking of you this Valentine's Day.
縱使多年已過，但每當我緊握你的手時，仍有一種自己還是高中生的感覺。我在這個情人節，一直思念著你。
30.I made the right choice when I decided to marry you. Be my Valentine forever.
決定跟你結婚，是正確的選擇。愿你今生今世做我的情人。
31.No one has ever loved me the way you do. I love being your little Valentine.
從來沒有人像你這般地愛我。我喜歡做你的小情人。
32.On this Valentine's Day, just like every day, all I h***e is love for you.
如同每一個平常的日子，我在這個情人節里所擁有的東西，就是對你的愛。
33.We h***e had our difficulties recently, but you are still the one I call my Valentine.
雖然最近我們發生爭執，但我仍視你為我的情人
34.Please come back. I want to make up. I want to be your Valentine.
請回來。我希望能夠和解。我要當你的情人。
35.To my ever loving; I am yours forever.
獻給我永遠的愛人;我將永遠屬于你。
36.I knew that there would be ups And downs when I married you. But through it all you h***e always been my Valentine.
當年娶你，已知人生總有起伏不定的時候。但經歷過這一切的甘與苦，你終究是我的愛人。
37.I'm sorry that I can't be with you on this Valentine's Day. I send this Valen tine's card to remind you that I love you.
很抱歉，這個情人節我不能陪你。我送上這張卡片，為的是要提醒你，我愛你。
38.It is graceful grief and sweet sadness to think of you, but in my heart, there is a kind of soft warmth that can't be expressed with any choice of words.
想你，是一種美麗的憂傷的甜蜜的惆悵，心里面，卻是一種用任何語言也無法表達的溫馨。
39.Do you understand the feeling of missing someone? It is just like that you will spend a long hard time to turn the ice-cold water you have drunk into tears.
你知道思念一個人的滋味嗎，就像喝了一大杯冰水，然后用很長很長的時間流成熱淚。
40.I know you like this song most and I know what you are thinking about ,too, I miss you .
我知道你最喜歡這首歌，我也知道你的心思，我想你。
41.Those days when we were together appear in my mind time after time, because they were so joyful, happy, blest, disappointing, sad and painful. I miss you ,and miss you so mach……
常常想起曾和你在一起的那些日子。開心、快樂、幸福、失落、傷心、痛苦的所有日子。很想你，很想你……
42.Do you know there is someone thinking of you and caring you all the time ? Your smiling eyes are just like the sparkling stars hanging on the curtain of my heart.
你知道么，有個人時時想念著你，惦記你，你含笑的眼睛，象星光閃閃，綴在我的心幕上，夜夜亮晶晶。
43.Listening to my heart beating. Seeing how much I love you ,I dare to admit how much I love you .When thinking of you, I hope you can receive the passionat words I left for you!
心要讓你聽見，愛要讓你看見，不怕承認對你有多眷戀;想你的時候，盼你能收到我的真情留言!
44.Thousand of time I have thought of you .My heart is going high into the air and flying with my blessing towards you I don't care loneliness. I am satisfied when you are happy and I am happy when I think of you!
千萬個思念，在空氣中凝固。揚起風吹向你，帶著我的祝福，寂寞我不在乎，你快樂我就滿足，想你是我的幸福!
45.I miss you not because of my loneliness but I do feel lonely when I miss you. Only when I miss you deeply I feel so lonely.
不是因為寂寞才想你，是因為想你才寂寞。孤獨的感覺之所以如此之重，只是因為太想你。
46.miss you so deeply that my love just like a kite has broken its line and won't stop flying until it reaches you at last.
長長的思念，就像風箏斷了線，飄啊飄啊，飄到你的身邊。
47.Oh, How much I miss you! If the passionate refreshing breeze knows my heart, it can tell you that I miss you and care you for my life's time. If graceful white cloud knows my heart, it can tell you I love you and would be together with you forever.
好想，好想你!如果清風有情，請帶去我對你的思念，這一生都為你牽掛;如果白云有意，請帶去我對你的愛戀，生生世世都愿和你共纏綿!
48.Maybe God wants us to meet a few wrong people before meeting the right one, so that when we finally meet the person, we will know how to be grateful.
在遇到夢中人之前，上天也許會安排我們先遇到別的人;在我們終于遇見心儀的人時，便應當心存感激。
49.I want to hold your hand on Valentine's Day. Happy Valentine's Day, sweetie.
我想在情人節緊握你的手。親愛的，情人節快樂。
篇5
【關鍵詞】情景化教學 目標導向 自主學習
[背景]
小學英語有效教學需要教師根據學生的年齡、心理特征，創設真實的語言情境，幫助學生在情境中接觸、感知、習得、理解、運用英語。本文通過筆者一節展示課課堂實例及其研討（譯林版小學英語六年級上冊Unit 8 Chinese New Year Story time），內容是人們在中國年來臨之際的準備活動，呈現了小學英語情境教學如何做到回歸再現生活的，同時幫助學生更有效地綜合運用英語。
[案例]
1.我們要過年了嗎？
首先，教師在課前對教室做了一些布置，如掛鞭炮、貼窗花等（如下圖），營造一種現實情境，讓學生在學習時身臨其境。
2.原來，這是我們今天的目標！
上課開始前，教師用以下形式向學生展示了本節課的教學目標。
What are you going to learn at this lesson？
1.You’re going to learn the story time.
2.You’re going to talk about the topic.
3.You’re going to work with your classmates to do a skit.
3.西方人眼中的中年好美！
教師播放視頻《西方人眼中的中國年》。本節課的授課時間恰逢年末，接近新年，正好上個月又是西方的重要節日――萬圣節。筆者向學生發問：
T：What holiday did we have last month？
S：Halloween.
T：Right.It’s an important holiday in western countries. Do you know what holiday is important in China？
S：Chinese New Year.
T：Let’s see what is our Chinese New Year like in western countries.
4.我們都爭做學習的主人！
筆者大致設計了以下三個環節：
環節一 聽錄音，排序，看看Anna將要為中國年做哪些事。（如下圖）
環節二 在文章中找到幾個時間標志，小組合作說一說寫一寫每個時間段將要具體做哪些事情，并進行匯報。
Before Chinese New Year， they are going to ...
On Chinese New Year’s Eve，they are going to ...
On Chinese New Year’s Day，they are going to ...
On the second day of Chinese New Year，they are going to ...
環節三 自讀課文，找出疑難點，并復述總結課文。
5.看！我們的思維導圖精彩嗎？
課后的作業是小組合作做一張中國年的思維導圖，用上我們今天學的句型描述一下你這個春節將要做的事情。看看哪一小組的思維導圖能得到大家的青睞哦！以下是隨機選取的兩個小組的合作成果。
[案例反思]
1.情境中的目標知情，做學習的主人
《義務教育英語課程標準（2011年版）》（以下簡稱《標準》）更強調對學習對象的關注，這就要求教師在設計教學活動時從人本主義思想出發，讓學生對學習目標的知情權得以體現。比如案例中上課主題是中國年，教師先在課前對教室做了一些布置，如掛鞭炮、貼窗花等，營造一種現實情境，讓學生在學習時身臨其境，有利于開啟學生想象的思維，刺激表達的欲望。根據本節課的語言知識重難點現在進行時的一般構成：be going to表示將要做某事，教師在新授課之前就利用這個語言結構，將該語言結構富于情景化，即我們今天將要學習什么，在讓學生知道本節課學習目標的同時，也做到了讓學生初步感知語言重難點，即在現實情境中做到語言學習內容與形式的統一。語法是語言的骨骼，筆者設計的這一環節其實是將語法情景化。讓學生在自然的情境中真實地感知新的語言項目，為本節課語言學習目標的有效達成做鋪墊。該語法的情景化拉近了學生和英語語言之間的距離， 消除了學習焦慮感，學生在不知不覺中加深了對該語言點的理解。《標準》中明確規定把對學生的學習興趣、態度和自信心的培養放在英語教學的首要地位。我們在教學實踐中也深刻體會到創設大量的英語情景，讓學生在形式多變的教學中，時常處于興奮、活躍的狀態，對于學生產生濃厚的英語學習興趣，激活創新意識，發揮學習潛能是非常有利的。沒有良好的學習環境就沒有好的教育，要讓學生說好英語，就要重視環境的營造。讓學生在現實的情境中，知曉目標，使得教學更具人情味兒。
2.多媒w的合理怡情，增強共鳴
隨著教學中多媒體技術的引入，靈活運用各種電教手段，為學生提供真實自然的語言使用示范，使教學變得生動、活潑、感染力強，讓學生置身于以英語為母語的環境中，體驗英語的實際運用。在現代化電教設備創設的情境下，讓學生多看、多聽，獲取最大的信息量。本課可以結合中西文化，語言有豐富的文化內涵，在小學英語教學中，接觸和了解外國文化有益于對英語的理解和使用，有利于加深對中華民族優秀傳統文化的認識與感受。通過貼近生活的中西方文化對比，做到了學習的回歸與生活的再現。同時，筆者巧用視頻的形式，為學生呈現了一個直觀，形象的中國年習俗，有利于調動學生學習興趣以及喚醒他們的舊知識，開啟他們用英語表達的欲望，啟發學生的思維，起到了拋磚引玉的效果。實踐證明，學生不僅有話可說，而且有說不完的話，有的甚至大膽嘗試了一些沒有學習過的新詞來表達，課堂氛圍很是活躍，學生暢所欲言，學習熱情高漲，共鳴強烈。
3.明確要求下的自主學習，通情達理
自主學習是老生常談的話題，但往往流于形式，因此需要教師循序漸進，為學生提出明確的要求。案例中，筆者充分尊重了學生的學習自，小組合作的方式也幫助降低了學習難度，教師所創設的活動均是在中國年這一情景中，學生的語言學習的延續性得以保證，并且是循序漸進的，幫助了學生有效完成學習任務，習得語言。教師圍繞語篇話題創設恰當的情景，開展拓展活動，科學高效地設計各種活動或任務，供學生們在任務達成的過程中積極應用所學語言進行交際與展示，從而體現英語課堂教學的整體性與語言運用的真實性。
筆者設計了兩個教學拓展，學生可以自行選擇。一個是根據所學內容排演一個關于新年的情景劇，可以用上一些新年的祝福語，互相說一說自己新年的計劃，或者小組合作制作一張手抄報。情境會話貫串全套教材。其意圖在于體現《標準》“從學生已有經驗出發，重視學生的經驗和體驗”的基本理念。教材情境圖給學生提供了支架性的語言學習空間，教材提供了情境圖和文本的統一做到了現實情境和文本情境的結合，強化了學生提取、加工和分析問題的能力有利于培養學生的觀察力、分析力和口頭表達能力，讓學生形成有效的學習技能，養成良好的英語學習習慣。讓學生能較好地掌握文章內容，以至在文章的總結復述時基本做到自主復述，課堂文本內容達成度較高。明確的要求使得自主學習有了方向，有了指導意義，有了自主學習的可能性，更具人情味兒。
[結語]
總之，在情境中的英語教學，既能活躍課堂氣氛，激發學生的學習興趣，鍛煉學生的語言能力，又能培養學生的思維能力和空間想象能力。使學生產生仿佛置身于英語世界的感覺，在輕松、愉快的環境中積極地學習，養成良好的學習習慣，加深語言信息輸入，產生語言內化，做到學以致用，從而為學生進一步學習英語奠定良好的基礎。教師只有深入地鉆研教材，研究教學方法，講究教學藝術，最大限度地調動學生的學習積極性，才能更有效地提高課堂教學質量，真正讓情景教學為自己所用，讓學生的英語學習回歸到現實生活，讓英語課更有人情味兒。
【參考文獻】
篇6
今天我要侃的中心思想可以概括為：這是一個人民宰豬的時代，請還刀于民。
有人在下面笑：愛成你可真的胡整，好好地宰什么豬？誰是豬？先別急。這個“豬”我是指廣告客戶。大學教授講課的時候會說廣告客戶是媒體的上帝，因為他掏錢嘛！可我們傳媒的廣告業務員私底下卻把一個廣告客戶談成了，叫宰豬——從廣告客戶身上吃到了肉的意思。現實中其實就是這么回事，因為廣告客戶到底能不能通過銷售收回這筆投資還很難說——收不回來，或者投入產出不成比例，那可不就是當豬被人宰了一刀？！怎么說，廣告客戶是豬。但豬們現在都越來越聰明，比我們的媒體從業人員更聰明了？
那么如何做好傳媒提高廣告業務收成呢？我的想法就是：讓人民來宰豬，我們傳媒應該把刀還給人民。
為什么這么說？因為過去一直是官僚主宰媒體，而當前的中國正在從官僚主宰媒體的時代，逐步進化到人民主宰媒體的時代。在這樣的背景下，如果我們的傳媒仍然保守于讓官僚滿意、完全聽官僚的話、讓官僚充斥著我們的媒體，那就壞事了，你的媒體就因為無聊而死。你就是官僚手中的一根鞭子，沒人理你，大家都躲著你，誰會找你投廣告？
人民主宰，就是媒體要體現人民大眾的需求，聽人民的話，按人民的意愿辦媒體，你的內容要全是人民感興趣的東西。只有這樣，你的媒體才有發行量和收視率，你的廣告投放價格和收費才有支撐，廣告客戶才會爭著搶著哭著含著對說：“求求你，來宰我吧，我是最肥的豬！”
那么官僚主宰媒體和人民主宰媒體具體有什么不同？我想我可以用“三講”來說明這個問題。底下有人一聽我這邊要講“三講”，一定在心里罵上了：M的，今天算是見鬼了。三講不就是：你不講；我不講。你要講，我也講。你講我，我講死你。錯了，不是那個意思。
官僚主宰媒體的特點是這樣的三講：一是講權力，二是講級別，三是講資歷。
所謂講權力，比如說我們大家每年大年三十的晚上，都有一個集體性的弱智習慣，就是和家人在失望中去收看春節聯歡晚會。一個如此無聊缺乏新意的娛樂節目，在中國的收視率居然能達到95％個百分點。好像真的“全國人民看春晚，十億人民九億歡”。此情此景，讓那些不了解中國媒體情態的國外傳媒大亨都急死！心想中國人民這么低的“歡商”，他要是進來還不得賺死？是中國人民“歡商”“智商”低嗎？不是，你不讓別的電視臺自己辦春節聯歡晚會，你還逼著別的電視臺非轉播不可，那誰不傻B啊！這叫講權力，權力統治著娛樂。沒權力這層，春節聯歡晚會立馬就現招人煩的原形。今年美國AOB media搞了個2007年春節海外雙語晚會暨2007年度中美娛樂先鋒人物大獎北美頒獎晚會。它來找我說，央視這個晚會這么差勁，居然一晚上摟4、5個億，我再不怎么地摟個上千萬總沒問題吧！我說，就央視春節聯歡晚會的水平，丫確實不應該撈那么錢；你這春節海外雙語晚會干兩條就能蓋了它。一是你請美國現任總統布什給全球華人拜年；二是你請央視對抗性的人物超女、黃健翔、陳佩斯、朱時茂、王治郅、羽泉等出演節目。有這兩天才叫過年呢！！！問題是丫不讓你在國內同時播出啊！它要敢讓你播，隨便放到哪個驢兒不拉屎的省級衛視，你都至少能摟一個億！
所謂講級別，你比如當年各級電視臺的廣告業務去秦池拉廣告，有央視的、山東衛視的、臨朐電視臺的。結果怎么著？臨朐電視臺一進廠就被廠子的保安打跑了；山東衛視運氣要好點，可也被灌酒灌爬下了，躲到賓館的床底下不肯出來。只有央視的，人家秦池酒廠老老實實用加長林肯一路侍侯著送回北京。這就是講級別，你的媒體是哪一級的，頭上是幾品頂戴。
所謂講資歷，就是講您熬了多少年頭了，熬的日子越久越牛。比如我們央視的《動物世界》，就這么個拿動物賺眼球的節目，堅持用趙忠祥這樣一個身經百戰的老大爺來主持。搞得中央電視臺主持人的那些茅坑十年如一日地蹲著那些老家伙，好像中國進入老年社會后年輕人都死絕了。
以上是老“三講”。
我們要進入的人民主宰媒體的時代就完全不同了，它的特點也可概括為“三講”：講人民，講PK，講熱鬧。這是新“三講”。
提起講人民，大家就會想起“三個代表”，那里好像也有“人民”。三個代表是說，代表著中國先進社會生產力的發展要求，代表著中國先進文化的前進方向，代表著中國最廣大人民的根本利益。里面最根本的是代表人民群眾的根本利益。
但我申明，這里頭的人民和我要表達的是兩個意思。區別在于人民就是人民，沒有什么代表不代表的。我們今天討論的是媒體、廣告和賺錢之間的關系，媒體以外的政治什么的領域我管不著，也不讓我去管。就在媒體這領域，你別跟我玩什么代表。人民就是人民，你媒體內容、價值取向、節目品味等統統都要根據人民的意志來定，別去用一幫偽精英和傳媒官僚給我在那兒假裝人民的一份子，還死乞白賴地要代表人民——誰TMD要你來代表了？真不要臉！人民就不能直接把屬于他們的事按照他們的方式給辦了嗎？
篇7
關鍵詞： 漢英副詞性關聯詞語 情感域 認知識解
一、 引言
國內外學界對漢英副詞性關聯詞語的研究有Biber，Johannessen和Halliday認為連接副詞可以用做狀語，具有篇章銜接功能，并對該類詞語的功能做了一定的分類。國內學者如原蘇榮、張誼生等對副詞性關聯詞語的性質、范圍、分類和功能進行了闡釋和研究；桂嚴捷等、鄒清妹等和劉曜等探究漢英文本中副詞性關聯詞語的語篇銜接功能等。由此可見，國內學者不僅提出了該類詞語的功能及分類，而且做了比較深入的研究。然而，從認知語言學角度對副詞性關聯詞語的探究還少見。
本文基于“北京大學中國語言學研究中心語料庫”和“英國國家語料庫”，采用認知語法的研究方法，集中探究在語篇層面漢英情感域內的副詞性關聯詞語的分類和特點。
二、副詞性關聯詞語的認知識解
認知識解是認知語法的重要部分，是學界研究的熱點問題。Langacker認為認知識解是當人們使用語言時用不同方法詮釋同一場景的能力。Hamawand則認為認知識解是“說話者在語篇上使場景概念化并且在語言上選擇合適的結構時采用的語言策略” 。
副詞性關聯詞語和認知機制有著密切聯系，因此從認知語法角度研究副詞性關聯詞語是一個很好的選擇。
轄域又叫認知域或語義域，是認知語法的一項重要內容。轄域是人們描寫語義結構時涉及的概念領域。任何對詞語的描述都要在認知域范圍內進行。
認知語法描寫詞語的意義時主要用“認知域”代替傳統的意義特征，將意義視為概念化的過程和結果，認知域就是在這一過程中形成的一個內在的、連貫的、凝聚在一起的范圍，并進行語義描寫。在某種程度上，認知域等同于語境，因為所有語言單位都是依靠語境的。在認知域中，通過次結構的凸顯限定并描寫語義單位。然而，認知域又不同于語境，它是人們大腦中的知識語境。
認知域有兩種類型：基本認知域和抽象認知域。前者是一個簡單的概念，包括時間域、空間域、情感域、顏色域、嗅覺域、觸覺域、上位域及下位域。 基本認知域是概念復雜性的最底層（Langacker 1987：149），是人類概念化過程的出發點。抽象認知域是一個復雜的概念或者知識系統，又稱為“概念復合體”。本文主要討論基本認知域下的副詞性關聯詞語。值得一提的是，本文探究的副詞性關聯詞語是基于原蘇榮的界定標準和限定范圍內的副詞性關聯詞語（功能類型分8個大類20個次類）。
根據Langacker的觀點，情感有兩類：一類是積極情感，如欣喜、熱愛和興奮；另一類是消極情感，如傷心、焦慮和絕望。然而，他也提出這兩類情感的交叉。我們發現有一些副詞性關聯詞語可以表達情感或態度，它們屬于情感域，下面看一些從語料庫中精心選取帶有副詞性關聯詞語的例子是如何表達情感的：
（1）沈愛民本人就曾兩次踏入冰縫，幸好冰縫不算寬，如果跌入一條很寬的冰縫，那生還的希望是渺茫的。（1994年報刊精選）
例（1）中的句意為：如果沈愛民掉入很寬的冰縫，他幾乎無法生還。從例句中我們可以感覺到“幸好”后面的事情是好事，屬于積極的情感域。
（2）傳說伍子胥一連幾夜愁得睡不著覺，連頭發也愁白了。幸虧他們遇到了一個好心人東皋公，同情伍子胥，把他接到自己家里。（《中華上下五千年》）
例（2）中的“幸虧”也是表達積極的語義，即對于伍子胥而言，有好心人愿意收留他的積極情感。伍子胥在逃出鄭國后，被人追捕情況窘迫，因此有人收留是一件好事。所以，“幸虧”傳達的語義屬于積極情感域。
（3）在美國，死于心臟病的人更超過了100萬，而且人數還在不斷增加之中。不過，好在我們還有發展健康的習慣，減少這些疾病的危險。（《哈佛管理培訓系列全集》）
從例（3）中我們得知，在美國超過100萬人死于心臟病，而且數量還在上升；針對這種情況，作者表露出自己的一絲安慰――人們發展健康的習慣將有助于緩解該趨勢。例句中的“好在”傳遞了一種積極的情感態度。
（4）Fortunately， the United States and Irish camps came to our rescue， and we got Marcus out on to the track. （The Daily Mirror， 1985-1994）
（5）There was a time when a popular cocktail food was salame （usually Danish） rolled round a cream or cottage cheese filling to form a cornet. Luckily， this fashion seems to have passed as such things were never very easy to eat in a dignified way. （Delicatessen： a celebration and cookbook， 1985-1994）
（6）Unfortunately， this means that any residential building you design could be littered with satellite dishes in no time at all. Not a pretty sight， we’re sure you’ll agree. Happily， however，it’s one you can easily avoid by talking to BSB today.（Adverts from The National Trust Magazine，1985-1994）
副詞性關聯詞語fortunately、luckily和happily可以表達相同的語義特征。它們描述的事件都是讓人們感到欣慰的，至少在說話者看來。例（4）的語義為：如果美國和愛爾蘭方沒有提供及時的援助，Marcus將無法返回賽場繼續參加比賽。所以，在說話者看來這是一件好事。例（5）可以理解為：如果意式臘腸的這種吃法沒有過時，那人們永遠不會以一種優雅的方式吃它。可見luckily后面的事件在說話者看來是好事，屬于積極的情感域。例（6）的說話者很開心，因為人們可以通過向BSB反映情況避免居民濫用信號器接收衛星電視信號。從以上分析我們可以看出fortunately、luckily和happily傳達的語義都屬于積極情感域。
（7）正走著，突然，我發現石徑右側有一平坦巨石，可以歇腳，便拐了過去。（1995年9月份《人民日蟆罰
（8）陣陣腰痛和對邊疆缺水的極度焦灼，使得李國安無法入睡。突然，一陣敲門聲打斷了他的思路，推門一看，是從百里外的托克托縣團結村趕來的兩位老大爺，身上的霜就像灑了一層面粉。（1996年1月份《人民日報》）
例（7）和例（8）中的“突然”表達不同的情感。前者表達的是一個精疲力竭的說話者的積極情感。令他驚奇的是他發現一塊可以休息的石頭，因此他很興奮。而在后面的一個例子中，它表達的是消極的情感。李先生的腰痛和對邊疆缺水的極度焦急，使得他無法入睡，并且在這個時刻，使情況更加糟糕的是敲門聲打斷了他的思路。
（9）本來，作為一個領導干部，有一件風雨衣，拿應得的獎金，一些急難險重的工作交給下級干部去做，等等，情理之中，合理合法，但是他們偏偏從嚴要求自己，這就大大提高了他們的威望和感召力，激發了廣大干部和群眾的積極性，化為推動改革和發展的強大動力。（1994年第三季度《人民日報》）
（10）偏偏，我們就是執迷地相信，失敗者都是咎由自取的。我們從來沒有認真反省過，真正失敗的是我們這個社會！（香港中文大學學生會《為我們未來的社會建言》）
副詞性關聯詞語“偏偏”后面的內容既可以是肯定的又可以是有悖于人們的邏輯的。例（9）領導者應當把緊急的、困難的事情下發給下級干部去做，然而他們對自己要求很嚴格，這也激發了群眾的熱情，無疑是一件好事情。例（10）中的“偏偏”表達的就是一個消極的情感。通過使用“偏偏”讀者可以意識到他們失敗的原因應該歸咎于社會，而不是失敗者自己。
（11）終于，我們平安地抵達目的地。（《讀者》）
（12）終于，宋、蔣矛盾加劇，一場孕育已久的暴風雨來臨了。（陳廷《宋氏家族全傳》）
盡管上面兩個例子中都運用了“終于”，但是不同的情感被表達出來了。很明顯，例（11）表達的是積極的情感，因為“我們”安全地到達目的地，但是例（12）中的“終于”表達的是消極的情感，因為隨著宋、蔣矛盾加劇，一場孕育已久的暴風雨最后終于來臨了。
（13）We were sitting there， and then suddenly I don’t remember anything afterwards. （PBS_News hour， 1994）
（14）I realized that I had forgotten about the party at my house after school.Suddenly I was not sad anymore， but excited.（Writing， 2001）
（15）In 2013， there were about 3，000 people on death row. Only， 2% of those were executed. （ABC， 2014）
（16）He expects to come here next year because I’m here. Only， he wants to be a doctor. （New York Times， 2011）
（17）Finally， she whispers， with love， with hate. （Three Musketeers， 1993）
例（13）中的suddenly告訴讀者說話者那時很無助，因為當他和家人坐在一起的時候什么事都記不起來了，所以這里的suddenly表達的情感是否定的。但是例（14）中的suddenly表達的是積極的情感，說話者感到很興奮而不是傷心的是當他放學后忘記去參加派對了。例（15）的only表明與監獄里的人們相比被處死的人數是相當少的。讀者可以從兩方面理解說話者的意思，一是說話者認為那些沒有被處死的人是很幸運的。二是說話者對不完善的司法系統感到失望。也許說話者認為犯法的人應當被判以死刑。例（16）中的only與want一起連用表達了說話者想成為醫生的強烈愿望。除了醫生，他都不想做。既可以理解為積極的情感，因為我在，又可以理解為消極的情感，除這個職業找別的都不干。同樣，例（17）中的“她”既愛又恨地耳語某件事，表達一種交集的情感。
根據以上討論我們將漢英副詞性關聯詞語的情感域歸納為下圖：
上面兩個圓A 和B，A代表積極情感域，B代表消極情感域，A∩B代表交叉情感域，也就是說，這部分的副詞性關聯詞語既可以表示積極的情感又可以表示消極的情感。然而，經過分析我們發現幾乎沒有副詞性關聯詞語純粹地表示消極的情感。
三、結語
通過對情感域下的漢語副詞性關聯詞語的研究分析，可以看出情感域中的副詞性關聯詞語可以分為積極情感域內的副詞性關聯詞語，消極情感域內的副詞性關聯詞語和交叉情感域內的副詞性關聯詞語三類。我們發現讀者可以較容易地洞察到說話者的情感。某些副詞性關聯詞語是處于積極和消極之間的，即它們在一種語境中表達積極的情感，而在另一種語境中表達的卻是消極的情感。
參考文獻：
[1]Biber，D.and Leech，G.et al.Longman Grammar of Spoken and Written English[M].Beijing：Foreign Language Teaching and Research Press，2000.
[2]Halliday，M.A.K.An Introduction to Functional Grammar [M].London：Arnold. 2004.
[3]Hamawand，Z.The Construal of Salience in Atemporal Complement Clauses in English [J].Language Sciences 27.3 （2005）：193-213.
[4]Johannessen，J.B.The Syntax of Correlative Adverbs[J].Lingua International Review of General Linguistics 115.4 （2005）：419-443.
[5]Langacker，R.W.Foundations of Cognitive Grammar（Vol.I.）[M].Theoretical Prerequisites.Stanford：Stanford University Press，1987.
[6]Langacker， R. W. Foundations of Cognitive Grammar（Vol.II.）[M]. Descriptive Application.Stanford： Stanford University Press，1991.
[7]桂瀾藎原蘇榮.英語：“nowonder”和漢語“難怪”比較研究[J].現代語文，2014（2）：130-135.
[8]鄒清妹，原蘇榮.“僥幸”類副詞性關聯詞語的語篇功能比較[J].宜春學院學報，2015（10）：88-91.
[9]劉曜，原蘇榮.巴金散文漢英文本中副詞性關聯詞語的語篇銜接功能[J].蚌埠學院學報，2016（2）：119-126.
[10]原蘇榮.漢英副詞性關聯詞語比較研究[M].上海：生活?讀書?新知三聯書店，2013.
[11]原蘇榮.漢英特殊類詞語―副詞性關聯詞語的性質特點和界定標準[J].西安外國語大學學報，2015（1）：12-15.
篇8
關鍵詞 黃曲霉毒素B1；人血清白蛋白；結合反應；光譜法
1 引 言
霉菌毒素中黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1， AFB1）是目前已知的最強化學致癌物之一，能通過多種途徑污染糧油等農產品、食品和飼料等，直接或間接進入人類食物鏈[1]。據估計，全球約有50億人暴露于高水平的AFB1中[2]。血清白蛋白占整個血漿蛋白的52%～60%，是循環系統中主要的可溶性蛋白組分，能結合、運輸許多內源性和外源性的化合物[3]，且可與外源性物質在特異性結合部位形成非共價復合物。毒素分子與血清蛋白結合，不僅會延長毒素的半衰期，而且會更有利于對器官的定位和形成高劑量毒素。此外，一旦血漿中的毒素濃度比胃腸道高很多，也會形成對毒素分子的被動吸收[4]。研究人血清白蛋白與AFB1作用的毒代動力學，對黃曲霉毒素的毒理學及其安全風險評估具有極大的借鑒意義，對于尋找低毒性的潛在競爭分子及其降低在體內吸收提供理論依據。
熒光光譜是研究小分子與蛋白相互作用的重要手段[5～7]，而圓二色譜技術可以從蛋白質二級結構變化的層次討論小分子與蛋白質作用情況。目前利用熒光、CD技術研究藥物與蛋白質的相互作用已有許多報道，但研究外源性毒素分子與血清白蛋白作用的報道還較少。本研究利用多種分析技術研究了模擬生理條件（pH 7.40，離子強度0.1）下AFB1與人血清白蛋白的相互作用。先對加入AFB1的各濃度AFB1-HSA的熒光值進行校正，再利用修正的雙對數方程分別求出反應的結合常數和結合位點數，由Frster′s能量轉移確定了AFB1與色氨酸殘基的距離，并根據熱力學參數確定了它們之間的主要作用力類型，以酮洛芬和布洛芬討論了AFB1在人血清白蛋白上的結合位置，同時結合3D熒光和圓二色譜討論了AFB1對HSA的二級結構的影響。
2 實驗部分
2.1 儀器與試劑
UV-2450紫外分光光度計（日本島津公司）； F-4500熒光分光光度計（日本日立公司）；MOS-450圓二色譜儀（法國Bio-logic公司）。 人血清白蛋白（Human serum albumin，HAS， Sigma 公司），使用時用緩沖液配制成0.1 mmol/L。黃曲霉毒素B1（AFB1，純度≥98%，Sigma公司），使用前用甲醇配置成濃度為4.0 mmol/L， 4℃避光保存。酮洛芬（Ketoprofen，純度≥99%，上海化學技術上海有限公司）；布洛芬（Ibuprofen，純度≥98%，北京百靈威科技有限公司）。上述試劑使用前都用無水乙醇配制成4.0 mmol/L，其它試劑都為分析純。用0.1 mol/L Tris， 0.01 mol/L HCl和NaCl最終配制成含0.1 mol/L NaCl，pH為7.4的緩沖液。
2.2 實驗方法
2.2.1 “內濾光效應”的校正 由于黃曲霉毒素在熒光激發波長280 nm處有吸收，隨著樣品中毒素濃度增加，其淬滅行為存在內濾光效應，需要按下列操作對實驗數據進行校正。在1 cm比色皿中加入2.0 mL緩沖液， 用微量進樣器加入適量4.0 mmol/L AFB1溶液，使AFB1濃度分別為2.0， 4.0， 6.0， 8.0， 10.0， 12.0， 14.0， 16.0， 18.0和20.0 μmol/L，混勻后，掃描紫外波段190～500 nm。按公式（1）對實驗熒光數據進行校正[5]：
Fcor=Fobs×e（Aex+Aem）/2（1）
式中， Fobs和Fcor分別為測定得到的熒光值和校正后的熒光值； Aex和Aem分別為HSA激發和發射波長下相應濃度的AFB1吸收值，實驗結果的熒光數據均為校正后的熒光值。
2.2.2 熒光淬滅 和3D熒光的測定 在1 cm比色皿中加入1.0 mL 2.0 μmol/L HSA溶液，用微量進樣器每次加入適量4.0 mmol/L AFB1溶液，使AFB1濃度分別為2.0， 4.0， 6.0， 8.0， 10.0， 12.0， 14.0， 16.0， 18.0和20.0 μmol/L，混勻后，在不同的溫度條件下，固定激發波長λex=280 nm，狹縫寬度為5/5 nm，發射波長在220～400 nm范圍內掃描HSA的熒光光譜及AFB1-HSA作用的熒光光譜。將激發波長掃描范圍設置為200～450 nm，發射波長設置為220～600 nm，激發波長每遞增5 nm掃描一次譜圖，可得HSA及作用后AFB1-HSA的三維熒光光譜。
2.2.3 競爭實驗 Site I位點標記藥物酮洛芬和AFB1與HSA的競爭結合實驗：在1 cm比色皿中加入1.0 mL 2.0 μmol/L HSA溶液，用微量進樣器加入4.0 mmol/L AFB1溶液，使AFB1濃度為30 μmol/L，再分別加入微量4 mmol/L酮洛芬，最終酮洛芬的濃度分別為4.0， 8.0， 12.0， 16.0， 20.0， 24.0， 28.0和32.0 μmol/L，混合均勻，在熒光光譜相同的測定條件下測定熒光強度。用相同的方法測得AFB1和Site II位點標記藥物-布洛芬的競爭結合實驗。
2.2.4 圓二色譜掃描 配制1.0 μmol/L HSA和復合物混合液（1.0 μmol/L HSA和10 μmol/L AFB1）， 用光程為1 mm的比色皿， 單位掃描間隔設置為1 nm， 單位掃描時間為2 s， 掃描波段為190～250 nm。
3 結果與討論
3.1 結合常數與結合位點數的研究分析
AFB1與HSA結合時，HSA熒光強度和毒素濃度與K和n的關系滿足方程式（2）[6]：
其中，F0和F分別是加入毒素前后的HSA熒光強度。[Q0]和[P0]分別是毒素和HSA的總濃度。通過lg[（F0-F）/F]對lg{[Q0]-[P0]（F0-F）/F0}作圖，得到圖1。通過線性擬合得到直線的斜率和截距，可測得AFB1與HSA在不同溫度下的結合位點數n和結合常數K。從表1可見，AFB1-HSA在4個溫度下測定得到的結合位點數n值均約為1，表明HSA與AFB1的結合過程中只有一個結合位點，同時結合常數K值隨著溫度的升高而變小，說明淬滅機制是靜態淬滅。因靜態淬滅時，溫度升高復合物穩定性下降，會導致結合率降低，而動態淬滅屬于分子擴散過程，溫度升高，擴散系數增大，K值相應增大。另外，AFB1-HSA在4個溫度下K值的數量級均為104，比很多其它的血清蛋白-配體復合物結合常數高很多，表明AFB1與HSA存在較強的親和力，在血漿中有很長的半衰期， 推測AFB1-HSA能夠在血液中存儲較長時間，能遠距離運輸，持續發揮毒性。
3.2 結合距離的確定
能量轉移現象是一個分子發射光譜（供體）與另一個分子吸收光譜（受體）重疊，此時分子在偶極-偶極共振耦合作用下發生能量轉移，最終供體熒光降低，受體熒光升高。根據Frster′s非輻射能量轉移，供體和受體之間的轉移效率E與臨界距離R0、距離r的關系式如下[10]：
3.3 作用力類型的確定
通常，蛋白質與配體形成超分子復合物主要通過疏水作用、靜電作用、范德華力及氫鍵等實現[12]。ΔH（焓變）、ΔS（熵變）、ΔG（自由能變化）可通過Van′t Hoff方程進行計算，再根據熱力學參數判斷AFB1與HSA主要作用力類型，方程如下：
AFB1與HSA反應的ΔG
3.4 AFB1與HSA結合位點的確定
HSA的高級結構可分為3個結構域，從N-端開始依次為Domain Ⅰ， Domain Ⅱ和Domain Ⅲ， 這些結構域主要由α-螺旋反向平行形成，每個域又由槽口相對的兩個疏水性亞域（Sub domain A和Sub domain B）空腔形成[3]，且HSA中主要有兩個疏水性口袋（Site Ⅰ）和（Site Ⅱ）是配體的主要結合部位，為了確定AFB1在HSA上的結合位置，使用酮洛芬（Site Ⅰ）和布洛芬（Site Ⅱ）作為位點探針，位點探針通常發生的反應有競爭反應和非競爭反應兩種[16]。
競爭反應：
根據2.2.3節實驗操作，依次向AFB1-HSA體系加入不同體積的酮洛芬和布洛芬溶液，根據體系中HSA和AFB1熒光變化情況（因AFB1與HSA之間存在能量共振，使得毒素熒光強度增強），確定AFB1與HSA的結合位點。Sudlow等[17]提出了計算取代百分比的表達式：
式中， F2和F1分別為存在和不存在探針時的熒光強度。
在實驗中，為了確保探針產生最小的非特異性結合，控制AFB1與HSA摩爾比為15∶1。測得體系的熒光光譜，根據公式（8）求得取代百分比，以取代百分比對探針與HSA的濃度之比作圖。從圖4可知，加入布洛芬對AFB1-HSA體系中HSA、AFB1的熒光強度影響較小，但隨著酮洛芬的加入量，AFB1與HSA的二元體系中HSA和毒素的熒光強度都發生較大降低，由此可推斷出，酮洛芬取代了AFB1，與HSA發生結合。以上結果表明，AFB1與HSA的結合反應發生在Site I中，靠近Trp-214位色氨酸。OTA的動物實驗表明，將OTA毒素從血清蛋白中置換出來，可以加快消除OTA在靶器官中的積累[18]， 因此研究在該結合位點低毒的與AFB1存在競爭關系的小分子，可以發展AFB1中毒的體內預防措施。
3.5 AFB1誘導HSA構象發生的變化
3.5.1 三維熒光掃描 三維熒光光譜表現的是熒光強度隨激發和發射波長同時變化的信息，擁有譜圖特征以及豐富的信息含量，為有機小分子作為介質熒光探針的研究，以及它們與生物大分子血清白蛋白相互作用機理的研究提供了有力手段。圖5是測得加入AFB1前后HSA的3D熒光等高線圖，對應的一些參考數據見表2。
圖5中的峰1主要顯示了色氨酸和酪氨酸殘基的光譜特性；峰2主要顯示多肽鏈主鏈結構的熒光特征，是由多肽骨架結構具有CO發生nπ*躍遷引起的，該峰的熒光強度與蛋白質的二級結構密切相關[19]。加入AFB1后，HSA的峰1和峰2的熒光強度都呈現明顯下降，但程度有所不同。峰1降低了26.3%，峰2降低了33.2%。從表2可知，AFB1-HSA系統中的峰1和峰2的斯托克斯位移都略有藍移，說明AFB1的加入使得HSA生色團氨基酸殘基（主要是色氨酸和酪氨酸）微環境及其二級構象發生了變化。
3.5.2 AFB1 與HSA的圓二色譜分析 在蛋白質或多肽的規則的二級結構中，肽鍵是高度有規律排列的，排列的方向性決定了肽鍵能級躍遷的分裂情況。因此，不同二級結構的蛋白質或多肽所產生的CD譜帶的位置、吸收的強弱都不相同。因此CD譜帶的位置、吸收相關的變化反映蛋白質的二級結構變化。蛋白質的典型的α-螺旋結構式在208 nm（肽鍵的π-π*躍遷）和222 nm（肽鍵的n-π*躍遷）處出現負的吸收峰，α-螺旋結構的含量可用下列公式求得[20]：
CHSA=1.0 μmol/L； CAFB1=10 μmol/L.實驗中測得nHSA∶nAFB1=0∶0和1∶10時體系的CD光譜，結果見圖6。
在AFB1存在的條件下，在208和222 nm處存在HAS的α-螺旋特征峰。通過計算，單獨HSA的α-螺旋含量為49.3%，加入10 μmol/L AFB1后，HSA的α-螺旋含量增加到61.1%。α-螺旋結構主要是由多肽鏈上羰基CO（）和氨基（說明NH）之間的氫鍵穩定[21]，說明AFB1與HSA的結合誘導了HSA多肽鏈的重排，引起原有的氫鍵網絡的結構改變，使得卷曲結構增加，肽鏈的二級結構發生了較大變化，推斷可能是AFB1與HSA相互作用，使蛋白質分子的疏水性增強，導致HSA的肽鏈結構收縮使得α-螺旋含量增加。
4 結 論
本研究采用了熒光淬滅法、同步、三維熒光光譜3種熒光光譜技術在模擬人體血液pH值條件下研究AFB1和HSA的相互作用，獲得了AFB1-HSA系統的淬滅機制、結合常數、結合位點數、結合距離、結合位置、作用力類型、構象變化等相關信息。結果表明，AFB1對HSA的主要淬滅機制為形成靜態復合物的靜態淬滅，且結合時只有一個結合位點，二者相互作用力主要為疏水作用和氫鍵，結合位置為靠近Trp-214的疏水腔中，二者的結合引起了HSA的氨基酸殘基微環境及其α-螺旋含量的增加。AFB1與HSA較強的結合常數說明，AFB1能夠通過HSA被運輸到各個靶器官中，可在血液中貯存較長的時間，存在潛在的毒性。本研究為評價黃曲霉毒素的毒性提供了有用信息，且從分子水平上研究了血液運輸過程中黃曲霉毒素的毒理學效應及其對血清蛋白構效影響等。
References
1 Zhang D H， Li P W， Yang Y. Talanta， 2011， 85（1）： 736-742
2 Vineis P， Xun W. Ann. Oncol.， 2009， 20：205-212
3 He X M， Carter D C. Nature， 1993， 364： 362
4 Il′Ichev Y V， Perry J L， Rüker F. Chemico-biological Interactions， 2002， 141（3）： 275-293
5 GONG Xia， SHI Yong-Hui， YUE Guo-Wei. Spectroscopy and Spectral Analysis， 2005， 25（3）： 420-423
宮 霞， 施用暉， 樂國偉. 光譜學與光譜分析， 2005， 25（3）： 420-423
6 ZHANG Ai-Mei， SUN Kun， WANG Rong， XIE Hua， XIE Xi-Hui， SHI You-Qin. Chinese J. Anal. Chem.， 2011， 39（12）： 1817-1822
張愛梅， 孫 坤，王 榮， 謝 華， 謝希暉， 施有琴. 分析化學， 2011， 39（12）： 1817-1822
7 HUANG Rui， XIA Zhi-Ning， GONG Ping. Spectroscopy and Spectral Analysis， 2008， 28（1）： 161-164
黃 銳， 夏之寧， 龔 萍. 光譜學與光譜分析， 2008， 28（1）： 161-164
8 Cao S N， Liu B S， Li Z Y， Chong B H. J. Lumin.， 2014， 145： 94-99
9 van de Weert M. J. Fluoresc.， 2010， 20（2）： 625-629
10 Ge F， Jiang L X， Liu D Q， Chen C Y. Anal. Sci.， 2011， 27（1）： 79-84
11 Bertucci C， Domenici E. Curr. Med. Chem.， 2002， 9（15）： 1463-1481
12 Klotz I M. Ann N Y. Acad. Sci.， 1973， 226（1）： 18-35
13 Ross P D， Subramanian S. Biochem.， 1981， 20（11）： 3096-3102
14 Ding F， Liu W， Liu F， Li Z Y. J. Fluoresc.， 2009， 19（5）： 783-791
15 Lakowicz J R. Instrumentation for Fluorescence Spectroscopy. Principles of Fluorescence Spectroscopy. Springer US， 1999： 25-61
16 Dufour C， Dangles O. Biochim. Biophys. Acta， 2005， 1721：164-173
17 Sudlow G， Birkett D J， Wade D N. Mol. Pharmacol.， 1976， 12： 1052-1061
18 Poór M， Kunsági-Mt S， Czibulya Z. Luminescence， 2013， 28（5）： 726-733
19 Kandagal P B， Ashoka S， Seetharamappa J. J. Pharm. Biomed. Anal.， 2006， 41（2）：393-399
20 Sano T， Ohno T， Otsuka-Fuchino H， Tsuchiya T. J. Food Sci.， 1994， 59（5）： 1002-1008
篇9
山東省高級人民法院：
你院魯法（民）發〔1990〕25號關于許秀英夫婦與王青蕓間是否已事實解除收養關系的請示報告收悉。
經我們研究認為，一九三七年王青蕓兩歲時被其伯父母王在起、許秀英夫婦收養，并共同生活了二十年，這一收養事實為親戚、朋友，當地群眾、基層組織所承認，應依法予以保護。雖然王青蕓于一九五七年將戶口從王在起處遷出到其單位落戶，后又遷入其生母處，但雙方未以書面或口頭協議公開解除收養關系。而且，王在起生前與王青蕓有書信來往，并以父女相稱，王青蕓對王在起夫婦也盡有一些義務。據此，我們同意你院第一種意見，即以認定許秀英夫婦與王青蕓的收養關系未事實解除為妥。
以上意見，供參考。
篇10
聽朋友語氣如此輕松，我有些吃驚，去年情人節前夕，她也曾打電話，不過卻是氣憤地抱怨，幼兒園的孩子那么小，老師居然要給他們慶祝情人節，實在不像話。要知道，在國內，家長們恨不得屏蔽這個節日，好讓孩子永遠保持天真純潔。
朋友說，就是因為對情人節抵觸，所以去年她只給兒子準備了巧克力，想應付一下了事，沒想到，老師和其他家長都非常重視，都親手做了精美的禮物，讓她非常尷尬，所以今年她要好好地補回來。
我覺得挺好奇，幼兒園里的情人節要怎么過呢？轉眼情人節就到了，朋友再次打電話回來，興高采烈地給我講述起當天的情形。
一大早，當朋友帶著五歲的兒子走進學校時，只見校園內早已被裝飾一新，彩色氣球拼成一個個大大的心形，紅色的橫幅上用英語寫著：“情人節快樂！”每個孩子都穿著最漂亮的衣服，手里拿著各種各樣的禮物，額頭上還畫著心形的彩圖，臉上洋溢著喜悅和期待。
走進教室，發現墻上掛著一排顏色各異的心形紙袋，上面寫著每個孩子的名字。如果想給哪位小朋友送禮物，就可以直接放到寫有他名字的紙袋里。孩子們頓時活躍起來，拿著自己和父母一起精心準備的禮物，跑著放到其他小朋友的紙袋子里。不一會兒，所有的袋子都裝滿了，有孩子們充滿童趣的涂鴉，有手工做的卡片，雖然不昂貴，但都是孩子們自己做的，讓人覺得特別溫暖。
送完了禮物，老師還帶著大家一起做游戲。地上畫著一個心形的圖案，老師讓所有的孩子都站進去，然后從紙袋子里拿出心形的卡片，捧在自己胸口。老師手里拿著針線，將孩子手中的卡片緊緊串在一起，并大聲問孩子們：“讓我們大家的心永遠在一起好不好？”孩子們開心地回答：“好！”