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篇1

關(guān)鍵詞：肌球蛋白；超高壓；凝膠機(jī)理

Abstract： High pressure processing （HPP） technology is a non-thermal processing technology that could affect functional properties of meat gel. Myosin， one of the myofibrillar proteins， contributes dominantly to the meat gelation process. Although the effect and underlying mechanism of high pressure processing on meat gelation have been elaborately investigated， knowledge is still lacking as to the complex system consisting of muscle and myofibrillar proteins. Studies focused on the alterations of myosin under high pressure environment might provide us an opportunity to drill down to the details of this complex system and in turn provide a better guidance for practical production. This paper is centered on a review of the progress which has been made in understanding the mechanism of the high pressure induced gelation of myosin as well as technical restrictions for relevant studies. Future prospects are also discussed.

Key words： myosin； high pressure processing； gelation mechanism

DOI：10.15922/ki.rlyj.2016.10.008

中圖分類(lèi)號(hào)：TS251.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1001-8123（2016）10-0040-05

引文格式：

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肌球蛋白，是肌原纖維蛋白在凝膠形成過(guò)程中起最主要作用的蛋白質(zhì)，對(duì)肉類(lèi)凝膠的功能特性如保水性、保油性、乳化特性等都起決定性作用，它在特定條件下會(huì)形成多聚體，在生理?xiàng)l件或者低離子強(qiáng)度條件下是不可溶解的，大部分的肌球蛋白分子在0.5 mol/L氯化鉀和20 mmol/L磷酸鉀緩沖液中呈單體狀態(tài)（pH 7.0）[1]。

肌球蛋白分子是形如豆芽狀的單體蛋白分子（有頭部和尾部），由6 條多肽鏈組成，分別為2 條重鏈（myosin heavy chain，MHC）和4 條輕鏈（light chain，LC），

經(jīng)胰蛋白酶水解后會(huì)形成重酶解肌球蛋白（heavy meromyosin，HMM）和輕酶解肌球蛋白（light meromyosin，LMM）[2]。在肌球蛋白的頭部有Ca-ATPase的活性位點(diǎn)，它會(huì)隨著加熱或者加壓逐步失活而導(dǎo)致蛋白構(gòu)象的變化。有研究認(rèn)為當(dāng)有50%的Ca-ATPase失去活性時(shí)，肌球蛋白就會(huì)聚集形成良好的凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)[3]。

超高壓加工（high pressure processing，HPP）技術(shù)是近幾十年來(lái)興起的非熱加工技術(shù)之一，較傳統(tǒng)技術(shù)而言，其不僅可以有效滅菌、鈍酶，還能通過(guò)修飾蛋白來(lái)改善產(chǎn)品的質(zhì)構(gòu)和保油、保水性；同時(shí)又不會(huì)破壞小分子及共價(jià)鍵，能最大程度地保持產(chǎn)品的風(fēng)味與色澤[4-5]。隨著相應(yīng)設(shè)備的不斷開(kāi)發(fā)，該技術(shù)已被廣泛運(yùn)用于商業(yè)化生產(chǎn)中[6]。

許多學(xué)者針對(duì)高壓處理對(duì)肉制品或肌原纖維蛋白的影響做過(guò)相應(yīng)的研究探討，發(fā)現(xiàn)將肉類(lèi)蛋白質(zhì)在合適的參數(shù)下進(jìn)行高壓處理能夠顯著改善其加工特性，起促溶、增強(qiáng)乳化、持水以及凝膠能力的效果；更能在不改變或提高其功能特性的前提下達(dá)到減少氯化鈉或磷酸鹽添加量的目的[7-10]，即高壓作用會(huì)影響鹽離子對(duì)肌球蛋白分子的修飾作用以及他們之間的相互作用。但同時(shí)高壓參數(shù)的微小變化也會(huì)使蛋白質(zhì)的功能特性呈現(xiàn)出極為顯著的變化，對(duì)肉類(lèi)蛋白造成不良的影響從而減弱其功能特性。為最大程度地在肉品加工領(lǐng)域應(yīng)用超高壓技術(shù)，需要更深入地研究高壓對(duì)肌肉或者肌原纖維蛋白體系的作用。而肌球蛋白層面的基礎(chǔ)研究有助于對(duì)這一復(fù)雜體系的深入了解，從而為高壓凝膠類(lèi)肉制品的生產(chǎn)提供理論指導(dǎo)和技術(shù)支持。

1 超高壓作用于肌球蛋白分子的主要方式

高壓對(duì)肌球蛋白分子的影響與熱處理不同。加熱是一個(gè)時(shí)間較長(zhǎng)的過(guò)程，在20世紀(jì)末，Yamamoto[11]、Sharp[12]等分別利用金屬投影透射電鏡和負(fù)染法透射電鏡觀察，發(fā)現(xiàn)在加熱過(guò)程中肌球蛋白的頭部與頭部、尾部與尾部、頭部與尾部之間相互作用交聯(lián)，在非共價(jià)鍵（疏水相互作用、范德華力等）和共價(jià)鍵（二硫鍵等）作用下形成相互交聯(lián)的凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。Sharp等[12]更發(fā)現(xiàn)溫度越高，參與的肌球蛋白分子越多，肌球蛋白形成的聚合體越大，隨著溫度進(jìn)一步升高到50 ℃以上，尾部開(kāi)始變得模糊，形成交聯(lián)，研究強(qiáng)調(diào)肌球蛋白頭-頭之間的交聯(lián)形成了球狀聚合物，而尾部之間的交聯(lián)可能才是形成鏈之間交聯(lián)和凝膠網(wǎng)絡(luò)的重要作用。

高壓處理是瞬時(shí)、均一的作用過(guò)程，整個(gè)反應(yīng)體系沒(méi)有顯著的壓力梯度變化。當(dāng)壓力作用于蛋白質(zhì)時(shí)，產(chǎn)生的最大影響是蛋白質(zhì)的體積會(huì)被壓縮，分子形態(tài)會(huì)變化以及凝膠形成過(guò)程中分子間會(huì)形成相互作用，從而發(fā)生可逆或不可逆的改變；而這一過(guò)程也離不開(kāi)溫度的作用，在升壓過(guò)程中，壓力使得腔體的體積變小，引起腔體內(nèi)的溫度升高；而降壓時(shí)溫度也會(huì)隨之下降，且溫度高低、變化快慢都與升壓/降壓速率密切相關(guān)[13]。因此前人關(guān)于肌球蛋白熱凝膠的研究也是今后探究高壓對(duì)肌球蛋白成膠機(jī)理的重要基礎(chǔ)。但與熱變性成膠不同的是，肌球蛋白的高壓變性聚集和之后的凝膠形成沒(méi)有一個(gè)統(tǒng)一的模式且高壓參數(shù)的影響很大；更有許多學(xué)者研究指出高壓作用下的凝膠和熱凝膠機(jī)制不同，頭部極有可能是關(guān)鍵區(qū)域[14-15]。

超高壓技術(shù)在肉制品中的應(yīng)用根據(jù)參數(shù)和與熱處理的結(jié)合主要分4 種，而其中對(duì)肌球蛋白凝膠特性有顯著影響的主要是非變性溫度下高壓處理后熱加工以及變性溫度下高壓處理直接形成凝膠，這2 種工藝分別稱(chēng)為高壓輔助凝膠和高壓凝膠，兩者使蛋白變性以及成膠的影響也不同。Fernández-Martín等[16]的研究便發(fā)現(xiàn)非變性溫度下高壓處理會(huì)使肌球蛋白穩(wěn)定性降低，有利于其進(jìn)一步變性；而變性溫度下高壓處理，高壓作用反而會(huì)保護(hù)肌球蛋白分子中的某些天然構(gòu)象，延遲其變性，繼而導(dǎo)致整個(gè)體系的變性溫度升高，過(guò)程減緩。故形成的高壓凝膠與單純的熱誘導(dǎo)凝膠相比，保水保油性有較大改善，但凝膠的質(zhì)構(gòu)特性有所下降。同時(shí)由于高壓凝膠所要求的壓力水平較高，對(duì)設(shè)備的要求也更為苛刻，因此從企業(yè)效益出發(fā)，高壓輔助凝膠技術(shù)更受青睞，該技術(shù)不僅能夠有效地改善蛋白質(zhì)的功能特性（例如可以改善雞肉中的類(lèi)PSE肉的功能特性[17]），還能達(dá)到減鹽、減脂的目的[18]，

更能大幅度提高肉制品的安全性，在肉制品加工行業(yè)有廣闊的應(yīng)用前景[19]。

2 高壓對(duì)肌球蛋白分子的影響

2.1 高壓對(duì)肌球蛋白分子形態(tài)的影響

由于高壓輔助凝膠技術(shù)能顯著地改善肉制品蛋白凝膠的功能特性，且所施加的壓力水平一般低于400 MPa，在現(xiàn)有的高壓工藝肉制品加工中應(yīng)用較多，高壓作用對(duì)于蛋白分子最直觀的影響是使其分子形態(tài)產(chǎn)生變化。Yamamoto[11]發(fā)現(xiàn)，當(dāng)壓力達(dá)到140 MPa以上時(shí)，溶解于0.5 mol/L KCl、pH 6.0溶液中的肌球蛋白分子開(kāi)始聚集，而當(dāng)壓力進(jìn)一步加大到210 MPa時(shí)，溶液中大量肌球蛋白分子頭部發(fā)生聚集，尾部向外分散，形成輪狀的分子簇結(jié)構(gòu)；且有部分肌球蛋白分子經(jīng)高壓處理后會(huì)丟失一個(gè)頭部結(jié)構(gòu)。Sikes等[20]發(fā)現(xiàn)對(duì)牛肉加熱前高壓處理可以增加肌球蛋白的溶解性促進(jìn)黏結(jié)，同時(shí)使分子部分解折疊；這有助于在后續(xù)的加熱過(guò)程中形成良好的蛋白凝膠，從而降低生產(chǎn)過(guò)程中食鹽和磷酸鹽的添加量，這和Crehan等[21]的研究結(jié)果一致。Iwasaki等[22]發(fā)現(xiàn)200 MPa以上壓力處理會(huì)壓縮肌球蛋白分子的體積，從而使凝膠強(qiáng)度和表面彈性下降。Simonin[14]、Sun[15]等研究發(fā)現(xiàn)，高壓輔助凝膠工藝會(huì)改變肌球蛋白的變性機(jī)制。在非變性溫度下高壓處理，肌球蛋白分子會(huì)先解聚，這不僅可增加肌球蛋白的溶解，還會(huì)破壞其頭部肌動(dòng)蛋白和ATP結(jié)合位點(diǎn)的天然構(gòu)象，這些變化在很大程度上都會(huì)影響其熱凝膠的性質(zhì)。

2.2 高壓對(duì)肌球蛋白間化學(xué)作用力的影響

Hsu等[23]的研究發(fā)現(xiàn)，在高壓處理的過(guò)程中，蛋白質(zhì)的流變特性和熱動(dòng)力特性逐步轉(zhuǎn)變；高壓下蛋白質(zhì)分子的聚集和膠凝現(xiàn)象主要是活性巰基被氧化后形成分子間和分子內(nèi)二硫鍵，蛋白發(fā)生變性形成交聯(lián)引起的，這與Yamamoto[11]的研究結(jié)果一致。通過(guò)比較，Ko等[24]認(rèn)為肌球蛋白經(jīng)150 MPa高壓處理后加熱可以形成有強(qiáng)度和彈性的凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，而其中發(fā)揮主要作用的是分子間疏水作用力和二硫鍵。但同時(shí)也有研究指出，非變性溫度下高壓處理會(huì)保護(hù)或增強(qiáng)氫鍵，從而穩(wěn)定肌球蛋白分子內(nèi)部一部分天然構(gòu)象[25]。

Cao等[26]將兔肌球蛋白溶液在100～400 MPa、20 ℃條件下保壓10 min，通過(guò)測(cè)定高壓處理后蛋白溶液的表面疏水性、巰基含量、動(dòng)態(tài)流變等指標(biāo)，并結(jié)合活性電泳圖譜分析，發(fā)現(xiàn)在100～200 MPa條件下，肌球蛋白溶液的表面疏水性和活性巰基含量略有升高，但是當(dāng)壓力到達(dá)300～400 MPa時(shí)，這兩者含量顯著增加，動(dòng)態(tài)流變結(jié)構(gòu)顯示肌球蛋白溶液（20 mg/mL）在400 MPa壓力作用下會(huì)形成凝膠。他們認(rèn)為高壓誘導(dǎo)肌球蛋白變性成膠的機(jī)制可主要概括為壓力作用下肌球蛋白解折疊，暴露出疏水基團(tuán)和包埋的巰基基團(tuán)，當(dāng)壓力進(jìn)一步升高時(shí)，壓力、溫度和氧化劑的共同作用使巰基氧化成二硫鍵以及疏水相互作用形成，肌球蛋白分子進(jìn)一步變性、聚集，最終連結(jié)成凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)。

多位學(xué)者的研究結(jié)果還表明，不同物種來(lái)源的肌球蛋白對(duì)高壓的敏感性也有差異，如魚(yú)類(lèi)的肌球蛋白一般在150 MPa的壓力作用下就能發(fā)生變性，而畜禽類(lèi)的肌球蛋白分子需要在200 MPa以上的壓力作用下才能觀察到其對(duì)凝膠形成的影響[17，27-31]。但到目前為止，大部分研究都認(rèn)為，高壓作用主要通過(guò)影響肌球蛋白分子的表面疏水性及二硫鍵（凝膠形成過(guò)程中最重要的2 種化學(xué)作用力）的形成，進(jìn)而抑制或促進(jìn)蛋白凝膠網(wǎng)絡(luò)的形成。

2.3 高壓對(duì)肌球蛋白形成的凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的影響

肌球蛋白凝膠的功能特性受其所處的環(huán)境（離子濃度、溶液體系中的添加物等）以及成膠處理（加熱或加壓）影響。高壓處理通過(guò)外部施加的作用力使肌球蛋白分子發(fā)生變性與聚集，而聚集的蛋白簇進(jìn)一步相互交聯(lián)形成凝膠網(wǎng)絡(luò)。和熱處理相似，高壓處理也需要達(dá)到一定的壓強(qiáng)才能使肌球蛋白充分變性、聚集、交聯(lián)[32-34]。因此，不同高壓參數(shù)下處理后肌球蛋白間的相互作用以及凝膠結(jié)構(gòu)是存在差異的。

Yamamoto[11]對(duì)兔骨骼肌肌球蛋白進(jìn)行210 MPa高壓處理后，利用旋轉(zhuǎn)陰影透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)雖然肌球蛋白頭部形成聚集，但是無(wú)凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)形成，需要進(jìn)一步加熱，且加熱后的凝膠微結(jié)構(gòu)與未經(jīng)高壓誘導(dǎo)的凝膠網(wǎng)絡(luò)微結(jié)構(gòu)沒(méi)有顯著差異。也有研究發(fā)現(xiàn)，在低離子濃度條件下，將肌球蛋白先高壓處理再線(xiàn)性升溫所形成凝膠的強(qiáng)度較未經(jīng)高壓處理組的更大，且與肌球蛋白纖絲的長(zhǎng)度呈正相關(guān)關(guān)系[35-36]。

Cao等[26]通過(guò)分析掃描電鏡結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在200 MPa以下的壓力作用下形成的凝膠呈纖絲結(jié)構(gòu)并有許多小的空洞，當(dāng)壓力達(dá)到300 MPa時(shí)，凝膠開(kāi)始形成球形聚集并伴隨有大的空洞出現(xiàn)，再升高壓力到400 MPa時(shí)形成的空洞變大，球狀聚積物出現(xiàn)，肌球蛋白分子之間的交聯(lián)減少，活性電泳的結(jié)果表明肌球蛋白在400 MPa壓力下已經(jīng)發(fā)生變性。但目前的研究中鮮有關(guān)于更高壓力（>500 MPa）作用下肌球蛋白形成的凝膠網(wǎng)絡(luò)微結(jié)構(gòu)的研究。

2.4 高壓對(duì)肌球蛋白分子結(jié)構(gòu)的影響

拉曼光譜法、傅里葉變換紅外光譜法、圓二色譜法、熒光探針?lè)ǘ际茄芯康鞍锥?jí)、三級(jí)結(jié)構(gòu)的常用方法。Huppertz等[37]發(fā)現(xiàn)在整個(gè)高壓處理過(guò)程中，蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)都會(huì)受到不同程度的影響，如150 MPa高壓處理會(huì)破壞蛋白多聚體之間的非共價(jià)鍵，影響蛋白質(zhì)的高級(jí)結(jié)構(gòu)；壓力大于200 MPa時(shí)，維持蛋白三級(jí)結(jié)構(gòu)的疏水作用力和離子鍵遭破壞，這些均會(huì)導(dǎo)致蛋白的三維凝膠網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)在進(jìn)一步的加熱過(guò)程中改變，進(jìn)而引起蛋白凝膠的功能特性變化。這與Yamamoto等[38]的發(fā)現(xiàn)一致。King等[39]將雞骨骼肌肌球蛋白進(jìn)行酶解，以其桿狀部分和桿狀纖絲部分為研究對(duì)象，利用熒光探針?lè)ê蛨A二色譜法研究發(fā)現(xiàn)43～49 MPa的壓力可以使桿狀纖絲部分（0.4 mg/mL）發(fā)生中等程度的分解，但是桿狀部位的2 條螺旋鏈則要在更高的壓力條件（約130 MPa）下才會(huì)解離，桿狀部位的2 條α螺旋鏈的分子內(nèi)相互作用比桿狀纖絲部分的分子間相互作用更穩(wěn)定。

Iwasaki等[40]利用ANS熒光探針?lè)ㄑ芯考∏虻鞍滓约捌浯谓Y(jié)構(gòu)（S-1和桿狀部位）在高壓作用下分子結(jié)構(gòu)的變化。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在400 MPa下肌球蛋白的內(nèi)熒光光譜會(huì)發(fā)生4 nm的紅移，且ANS熒光強(qiáng)度隨著壓力的增加而變大；肌球蛋白及其次結(jié)構(gòu)的內(nèi)熒光光譜的變化經(jīng)量化后表達(dá)為質(zhì)譜中心，該質(zhì)譜中心與壓力的大小呈線(xiàn)性正相關(guān)關(guān)系；但ANS標(biāo)記的桿狀部分的熒光強(qiáng)度卻沒(méi)有隨壓力水平的變化而改變；壓力大于300 MPa時(shí)S-1部分的質(zhì)譜中心出現(xiàn)滯后現(xiàn)象，在壓力高于350 MPa時(shí)該現(xiàn)象更加明顯。在高于350 MPa的壓縮過(guò)程中，質(zhì)譜中心并沒(méi)有減小，表明S-1部分在高于350 MPa時(shí)部分變性且保持穩(wěn)定；直到400 MPa時(shí)，S-1部分相應(yīng)熒光強(qiáng)度的變化仍能檢測(cè)到，并且會(huì)隨著壓力的增加而增加，但在壓力釋放后卻沒(méi)有改變。ANS熒光強(qiáng)度在恒定壓力下增加意味著壓力誘導(dǎo)的肌球蛋白的變性在升壓過(guò)程中加速。內(nèi)熒光和ANS分子熒光強(qiáng)度的檢測(cè)結(jié)果表明，肌球蛋白的頭部和尾部對(duì)高壓的敏感程度不同，在肌球蛋白頭部，色氨酸殘基的極性增加，疏水內(nèi)芯暴露到分子表面，相比之下尾部的多肽鏈結(jié)構(gòu)只有部分發(fā)生變性。故對(duì)高壓最敏感的部分是肌球蛋白的頭部，這些也符合Ko等[24]將肌球蛋白酶解為頭部S-1和尾部Rod，再經(jīng)高壓處理后發(fā)現(xiàn)S-1解聚交聯(lián)并成膠。而Rod并無(wú)太大變化的結(jié)果[20]。

這些研究結(jié)果均表明，較低壓力水平（

3 結(jié) 語(yǔ)

肌球蛋白形成高壓凝膠是一個(gè)復(fù)雜的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，包括蛋白構(gòu)象、化學(xué)作用力、分子形態(tài)等各個(gè)方面的綜合作用。另外，肌球蛋白的高壓輔助凝膠和高壓凝膠的成膠機(jī)制不盡相同，形成凝膠的作用力也有所差異，而今受研究設(shè)備和方法的局限，高壓凝膠過(guò)程的肌球蛋白變化還沒(méi)有得到充分徹底的研究。雖然超高壓技術(shù)目前已經(jīng)日趨成熟，在肉類(lèi)工業(yè)中的應(yīng)用也日漸廣泛，但仍需從理論角度去詮釋肌球蛋白在超高壓作用下變化的動(dòng)力學(xué)過(guò)程，才能更深入地研究高壓作用對(duì)肌肉、肉糜以及肌原纖維蛋白等復(fù)雜體系的影響，真正使科學(xué)基礎(chǔ)研究造福肉類(lèi)工業(yè)，減少生產(chǎn)浪費(fèi)，提高產(chǎn)品品質(zhì)，研發(fā)新型肉制品。因此，如何在現(xiàn)有技術(shù)的基礎(chǔ)上研究不同高壓條件處理下肌球蛋白的變化將是相關(guān)科研人員的挑戰(zhàn)。

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篇2

【關(guān)鍵詞】 心力衰竭；丙種球蛋白；IgG抗體；心功能

DOI：10.14163/ki.11-5547/r.2015.10.103

在慢性心力衰竭中患者出現(xiàn)死亡的常見(jiàn)原因在于擴(kuò)張型心肌病， 相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)這一疾病會(huì)受到患者自身免疫功能影響， 因此提升患者自身免疫力、改善心功能是治療心力衰竭的重點(diǎn)[1]。丙種球蛋白可調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞與白細(xì)胞粘附， 減少心臟細(xì)胞凋亡， 對(duì)心功能起到改善作用， 目前在臨床上應(yīng)用廣泛。本院基于這一背景， 研究了在常規(guī)治療基礎(chǔ)上加用丙種球蛋白的臨床效果， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1. 1 一般資料 選取本院2012年5月～2014年3月收治的擴(kuò)張型心肌病患者共64例， 隨機(jī)分為觀察組A與觀察組B， 每組32例。選取同期健康體檢正常者30例作為對(duì)照組。觀察組A中男20例， 女12例；年齡41～76歲， 平均年齡（59.3±6.2）歲；按照紐約心臟病協(xié)會(huì)（NYHA）心功能分級(jí)， 19例患者處于Ⅲ級(jí)， 13例患者處于Ⅵ級(jí)。觀察組B中男18例， 女14例；年齡43～77歲， 平均年齡（58.7±6.4）歲；按照NYHA心功能分級(jí)， 18例患者處于Ⅲ級(jí)， 14例患者處于Ⅳ級(jí)。三組患者性別、年齡、心功能分級(jí)上比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。

1. 2 方法 觀察組A采用傳統(tǒng)模式治療， 通過(guò)利尿劑、強(qiáng)心苷、多巴胺及血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑（ACEI）類(lèi)藥物治療。觀察組B在上述基礎(chǔ)上另加用丙種球蛋白治療， 具體操作如下：對(duì)患者靜脈滴注丙種球蛋白， 根據(jù)患者體質(zhì)量每千克靜脈滴注400 mg， 連續(xù)滴注5 d。治療3個(gè)月之后檢測(cè)患者IgG抗體情況。

每位研究對(duì)象均取其肘靜脈血樣， 將3 ml血氧按照每分鐘3000轉(zhuǎn)的速度離心15 min將血清分離， 靜置在-70℃冷柜中保存待測(cè)。在患者入院24 h內(nèi)檢測(cè)其超聲心動(dòng)圖， 對(duì)患者心功能予以評(píng)估并測(cè)量患者心臟大小。

1. 3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P

2 結(jié)果

2. 1 患者IgG抗體研究 統(tǒng)計(jì)兩組研究對(duì)象IgG抗體情況， 組間對(duì)比治療前后觀察組與健康對(duì)照組數(shù)值差異， 詳情如下：對(duì)照組研究對(duì)象IgG檢測(cè)平均值為（0.0299±0.0152）， 觀察組A IgG檢測(cè)平均值為（0.0953±0.0455）， 觀察組B IgG檢測(cè)平均值為（0.0303±0.0203）。

觀察組A在治療后與對(duì)照組IgG抗體診斷數(shù)值比較， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）。

2. 2 心功能研究 統(tǒng)計(jì)兩組患者治療前后心功能情況， 對(duì)比組間LVEDD與LVEF診斷數(shù)值， 心功能變化情況如下：觀察組A治療前LVEDD為（58.81±9.99）mm、LVEF為（36.77±11.05）%， 治療后LVEDD為（53.31±9.44）mm、LVEF為（38.06±10.77）%；觀察組B治療前LVEDD為（59.69±9.61）mm、LVEF為（36.13±9.97）%， 治療后LVEDD為（50.06±10.21）mm、LVEF為（46.16±12.19）%。觀察組A與觀察組B在治療前兩項(xiàng)診斷值對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；在治療后兩組心功能均有改善， 但觀察組B的LVEDD與LVEF診斷數(shù)值改善程度更大， 兩組治療后對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

3 討論

近年來(lái)， 臨床研究上進(jìn)一步證明了患者自身免疫抗體對(duì)疾病的影響， 包含抗肌球蛋白抗體、β-腎上腺素能受體抗體、ATP載體抗體、ADP載體抗體等， 均具有較高的特異性以及敏感性， 對(duì)擴(kuò)張型心肌患者者密切相關(guān)[2]。因此， 在臨床治療上發(fā)病機(jī)制的研究與病因、免疫等方面的干預(yù)成為了早期治療疾病的新靶點(diǎn)。

根據(jù)本次研究結(jié)果， 在治療后觀察組AIgG抗體明顯高于健康對(duì)照組， 但觀察組B治療后IgG抗體已經(jīng)明顯低于觀察組A， 且與正常對(duì)照組差異較小。心功能方面， 觀察組A與觀察組B在治療前LVEDD與LVEF診斷數(shù)值差異并不大， 治療后兩組患者心功能情況均有明顯改善， 但相對(duì)之下加用了丙種球蛋白的觀察組B改善程度更大。

IgG抗體親和力較強(qiáng)， 廣泛存在于人體血液中， 在免疫球蛋白中屬于二次免疫應(yīng)答的重要參與部分， 能夠參與心室重構(gòu)與心肌損傷， 對(duì)機(jī)體免疫反應(yīng)產(chǎn)生誘發(fā)作用， 從而加大心力衰竭程度， 因此治療上應(yīng)抑制IgG抗體程度[3]。丙種球蛋白能夠?qū)Ζ?腎上腺素能受體抗體產(chǎn)生中和效果， 在一定程度上減輕患者心臟細(xì)胞凋亡程度， 對(duì)IgG抗體免疫吸附直至清除， 改善心肌重塑及心功能狀態(tài)[4]。本次研究結(jié)果表明， 通過(guò)大劑量丙種球蛋白能夠通過(guò)對(duì)患者免疫機(jī)制的調(diào)節(jié)達(dá)到提升心功能的效果， 干預(yù)患者IgG抗體， 讓患者可得到更安全的治療， 并在短時(shí)間內(nèi)心功能得到更佳改善， 對(duì)患者后期治療及預(yù)后提供幫助。

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篇3

【關(guān)鍵詞】 尿白蛋白；免疫球蛋白；微球蛋白；老年糖尿病；臨床應(yīng)用效果 

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.13.021 

糖尿病是一種以高血糖為癥狀的代謝類(lèi)疾病， 主要是由于患者體內(nèi)胰島素分泌障礙或者胰島素生物作用受損而導(dǎo)致發(fā)病[1]。糖尿病是一種終身性的慢性代謝疾病， 其病情復(fù)雜， 療程漫長(zhǎng)， 目前在醫(yī)學(xué)上還沒(méi)有徹底根治的技術(shù)手段和方法。本研究就尿白蛋白、免疫球蛋白 G及β2微球蛋白在老年糖尿病患者臨床檢查中的應(yīng)用效果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析， 報(bào)告如下。 

1 資料與方法 

1. 1 一般資料 選取2014年7月～2015年8月本院收治的老年糖尿病患者30例作為觀察組研究對(duì)象。其中男16例， 女14例， 年齡58～96歲， 平均年齡（74.93±7.15）歲。另選取30例體檢健康者作為對(duì)照組， 其中男15例， 女15例， 年齡55～94歲， 平均年齡（73.44±7.67）歲， 兩組一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）， 具有可比性。 

1. 2 方法 兩組均進(jìn)行尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白水平生化檢測(cè)， 具體如下：①兩組受檢者檢查前保持空腹及靜息狀態(tài)；②采集受檢者晨起第一次尿液；③將采集的尿液樣本采用免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)出尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白水平。 

1. 3 觀察指標(biāo)及評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 統(tǒng)計(jì)比較兩組尿液檢測(cè)中的尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白水平。尿檢指標(biāo)水平正常標(biāo)準(zhǔn)為：尿白蛋白<14.8 mg/L， 免疫球蛋白 G<5.45 g/L， β2微球蛋白<154 μg/L， 臨床檢測(cè)指標(biāo)數(shù)值超過(guò)正常范圍即為陽(yáng)性。 

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用spss17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 

2 結(jié)果 

觀察組患者尿檢結(jié)果中， 尿白蛋白水平（16.28±2.62）mg/L， 

免疫球蛋白 G水平（14.26±3.97）g/L， β2微球蛋白水平（212.36± 

12.36） μg/L， 均顯著高于對(duì)照組患者的（7.28±1.29）mg/L、（5.17± 

1.99）g/L、（108.37±9.36） μg/L， 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 

3 討論 

糖尿病是臨床上一種十分常見(jiàn)的慢性終身性代謝綜合征疾病， 主要是由于患者體內(nèi)的胰島素分泌功能出現(xiàn)障礙性受損， 導(dǎo)致的一組以高血糖量為特征的新陳代謝性疾病， 具有病情復(fù)雜、治愈困難、療程漫長(zhǎng)以及發(fā)病率高等特點(diǎn)[2]。糖尿病的致病機(jī)制較為復(fù)雜， 醫(yī)學(xué)上尚未有明確結(jié)論， 其致病因素主要有遺傳、年齡、種族以及患者的生活方式等。到目前為止， 遺傳、年齡與種族等因素醫(yī)學(xué)上還無(wú)法控制， 但是可以對(duì)環(huán)境以及人們的生活方式進(jìn)行干預(yù)， 以降低糖尿病的發(fā)病幾率。老年糖尿病患者由于機(jī)體代謝功能低下， 體內(nèi)多個(gè)組織器官出現(xiàn)功能性弱化， 再加上體內(nèi)脂肪、蛋白質(zhì)的流失， 一般會(huì)伴有身體內(nèi)部臟器的功能性衰退， 導(dǎo)致出現(xiàn)血管、心臟、腎臟以及眼睛等重要器官的損傷， 嚴(yán)重影響患者的生命健康安全。研究表明， 糖尿病由于胰島素分泌異常所致， 而胰島素是由β2微球蛋白細(xì)胞合成和分泌， 同患者體內(nèi)的特異受體相結(jié)合引發(fā)代謝循環(huán)， 整個(gè)過(guò)程中任意環(huán)節(jié)出現(xiàn)異常都會(huì)引起糖尿病的發(fā)生[3]。早期及時(shí)有效的診斷、治療和護(hù)理干預(yù)對(duì)于控制糖尿病疾病的進(jìn)一步發(fā)展具有極重大的意義， 可以有效控制患者血糖的繼續(xù)升高， 調(diào)整患者的不良飲食習(xí)慣， 預(yù)防糖尿病并發(fā)癥進(jìn)一步侵害患者的生命健康。尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白的指標(biāo)水平含量同糖尿病病癥密切相關(guān)， 病情嚴(yán)重程度越高， 尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白的含量就越高， 臨床中具有比較高的診斷參考指標(biāo)意義。 

本研究結(jié)果顯示， 觀察組患者尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白水平較對(duì)照組患者高， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 說(shuō)明尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白水平與糖尿病關(guān)聯(lián)密切， 具有較高的特異性和準(zhǔn)確性， 可以作為臨床糖尿病診斷和檢查的參考依據(jù)。 

綜上所述， 老年糖尿病患者病情同尿液中的尿白蛋白、免疫球蛋白 G以及β2微球蛋白水平關(guān)系密切， 可以作為早期病情診斷與檢查的依據(jù)和參考指標(biāo)， 臨床應(yīng)用效果明顯， 值得臨床應(yīng)用和推廣。 

參考文獻(xiàn) 

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篇4

[關(guān)鍵詞]大劑量；免疫球蛋白；封閉抗體陰性；反復(fù)自然流產(chǎn)

自然流產(chǎn)也被稱(chēng)為習(xí)慣性流產(chǎn)，指兩次懷孕在同一妊娠周內(nèi)并且發(fā)生自然流產(chǎn)的現(xiàn)象，反復(fù)自然流產(chǎn)屬于婦產(chǎn)科不育癥范疇，是婦女在妊娠期常見(jiàn)的一種并發(fā)癥。有關(guān)統(tǒng)計(jì)顯示，反復(fù)自然流產(chǎn)患者約占我國(guó)已婚育齡婦女的10%，對(duì)患者身體健康以及家庭幸福造成了巨大影響。封閉抗體缺乏是反復(fù)自然流產(chǎn)患者的病發(fā)原因之一，本次研究探討大劑量免疫球蛋白治療封閉抗體陰性反復(fù)自然流產(chǎn)患者的臨床效果，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

本研究對(duì)象為我院2012年5月～2014年6月收治的確診為封閉抗體陰性反復(fù)自然流產(chǎn)孕婦患者116例，隨機(jī)分為觀察組以及對(duì)照組各58例。觀察組年齡25～40歲，平均（33.4±1.8）歲，孕周5～12周，平均（7.8±1.5）周，其中2次流產(chǎn)者34例、3次流產(chǎn)者15例、4次流產(chǎn)者9例；對(duì)照組年齡24～40歲，平均（32.8±1.8）歲，孕周5～12周，平均（7.6±1.6）周，2次流產(chǎn)者35例、3次流產(chǎn)者16例、4次流產(chǎn)者7例。兩組患者治療前均給予尿HCG以及B超檢查并確診為宮內(nèi)妊娠。

兩組患者給予封閉抗體檢測(cè)，結(jié)果均顯示為封閉抗體陰性，檢測(cè)方法如下：于清晨空腹抽取靜脈血樣3mL給予酶聯(lián)免疫法檢測(cè)，使用北京所奧生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)檢驗(yàn)試劑，檢測(cè)結(jié)果確診為封閉抗體陰性。

兩組患者均符合以下人選標(biāo)準(zhǔn)：①患者均確診為由于封閉抗體陰性而引發(fā)的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)；②患者血清HCG檢查結(jié)果顯示其孕酮值>25ng/mL；③本次研究經(jīng)過(guò)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及家屬均知曉本次研究且簽訂知情同意書(shū)。

同時(shí)兩組患者均符合以下排除標(biāo)準(zhǔn)：①?lài)?yán)重內(nèi)分泌異常、感染疾病患者；②生殖器官解剖結(jié)構(gòu)異?；颊?；③有過(guò)往黃體酮藥物、HCG等保胎治療方法無(wú)效史患者；④由于生殖道解剖結(jié)構(gòu)異常、生殖道感染、男方異常以及其他免疫異常等原因造成的患者反復(fù)性流產(chǎn)。

兩組患者在年齡、流產(chǎn)次數(shù)等資料上對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），具有可比性。

1.2治療方法

對(duì)照組患者入院后均給予傳統(tǒng)保胎治療，患者給予黃體酮（浙江愛(ài)生藥業(yè)有限公司，H20031099，規(guī)格：0.1g*6s）20mg肌肉注射，1次/d，給予HCG2000U注射，注射方法每2天1次，口服相關(guān)類(lèi)型的保胎藥物。

觀察組患者在對(duì)照組治療基礎(chǔ)上給予大劑量免疫球蛋白（上海生物制品研究所，S10970081，規(guī)格：300mg/3.0mL）靜脈注射?；颊呤状巫⑸鋭┝?00mg/kg，此后3～4周內(nèi)給予300mg/kg+5%葡萄糖注射液500mL靜脈滴注，滴注速度1～5mL，直至患者妊娠周數(shù)達(dá)到24周為止。此時(shí)每天為患者補(bǔ)充0.4mg葉酸，1次/d，維生素C100mg，3次/d，維生素E100mg，1次/d，以及孕康口服液（江西濟(jì)民可信藥業(yè)有限公司，Z10920062，規(guī)格：29mL'5支）20mL，3次/d，直至患者妊娠3個(gè)月為止。

兩組患者持續(xù)治療妊娠24周為止，患者治療期間均定期給予肝腎功能檢查，確保患者肝腎功能無(wú)異常后方可繼續(xù)治療。

1.3觀察指標(biāo)

①兩組患者治療效果：患者治療期間均給予嚴(yán)密監(jiān)護(hù)并定期檢查，行B超以及血清、孕酮含量檢測(cè)，患者妊娠時(shí)間直至7月以后或者分娩活嬰則被視為妊娠成功；若患者仍然出現(xiàn)自然流產(chǎn)或者B超檢查結(jié)果顯示胚胎停止發(fā)育則視為治療失敗。②統(tǒng)計(jì)兩組患者治療前后封閉抗體對(duì)照結(jié)果差異；③統(tǒng)計(jì)兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

使用SPSS17.0處理數(shù)據(jù)，以（x±s）形式表示計(jì)量資料，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分比形式表示，采用x2檢驗(yàn)。若P

2結(jié)果

2.1兩組患者治療效果比較

觀察組患者妊娠成功率94.8%，對(duì)照組患者妊娠成功率65.5%，觀察組患者妊娠成功率明顯高于對(duì)照組，對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.2兩組患者治療前后封閉抗體比較

兩組患者治療前封閉抗體檢查結(jié)果均呈陰性，治療后觀察組患者封閉抗體呈陽(yáng)性者52例，另外3例流產(chǎn)、3例陰性，陽(yáng)性比例89.7%；對(duì)照組患者治療后封閉抗體呈陽(yáng)性者30例，另外20例流產(chǎn)，8例陰性，陽(yáng)性比例51.7%。兩組患者治療后封閉抗體檢查結(jié)果中陽(yáng)性比例對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=7.712，P

2.3兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率對(duì)比

兩組患者治療過(guò)程中均未出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)，輕微不良反應(yīng)治療過(guò)程中均自行緩解。其中觀察組患不良反應(yīng)發(fā)生率8.6%，對(duì)照組患者不良反應(yīng)發(fā)生率8.6%，兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率對(duì)比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

3討論

反復(fù)自然流產(chǎn)患者往往歷經(jīng)多次妊娠以及多次流產(chǎn)，嚴(yán)重者流產(chǎn)次數(shù)甚至高達(dá)7～8次，患者本人身心受到巨大創(chuàng)傷的同時(shí)也對(duì)家庭生活造成一定影響。有關(guān)研究已經(jīng)證實(shí)，封閉抗體缺乏是反復(fù)自然流產(chǎn)患者病發(fā)的重要誘因，封閉抗體是一種抗配偶淋巴細(xì)胞的特異性lgG抗體，能夠有效抑制淋巴細(xì)胞反應(yīng)、封閉母體淋巴細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)滋養(yǎng)層的細(xì)胞毒作用、防止輔助T細(xì)胞識(shí)別胎兒抗原的抑制物、阻止母體生理免疫系統(tǒng)對(duì)胚胎發(fā)出攻擊。封閉抗體包括抗溫B細(xì)胞抗體、抗冷B細(xì)胞抗體、抗特異性抗體、抗TLX抗體以及抗Fc受體抗體等多種類(lèi)型。孕婦體內(nèi)缺乏封閉抗體，就會(huì)導(dǎo)致母體介面免疫保護(hù)作用不斷減弱，同時(shí)母體與胚胎之間免疫失衡，母體內(nèi)排斥反應(yīng)不斷占據(jù)主流，最終引發(fā)產(chǎn)婦妊高癥癥狀。

篇5

【關(guān)鍵詞】 免疫球蛋白類(lèi);作用機(jī)制;免疫調(diào)節(jié)

免疫球蛋白（Ig）是從健康人血液中提取的血漿制品，含有正常人血漿中所有的特異性抗體成分，其中主要是IgG及少許的IgA，IgM.Ig的應(yīng)用始于原發(fā)性和獲得性免疫球蛋白缺乏癥的替代治療，后因發(fā)現(xiàn)它具有免疫調(diào)節(jié)功能而被廣泛應(yīng)用于治療其他疾病，如各種細(xì)菌和病毒感染性疾病及自身免疫性疾病.WHO制定的Ig制劑的基本質(zhì)量要求如下:1）具有完整的Fab片斷和Fc部位功能的IgG單體分子，至少含90%;2）抗體具有與獻(xiàn)血人群相似的抗病毒抗原和抗細(xì)菌抗原的雙重功能;3）存在IgG的4種亞類(lèi)且含量正常;4）不含可激活補(bǔ)體的IgG多聚體和血管活性肽;5）生物半衰期正常;6）不傳播肝炎病毒、HIV等疾病.大多數(shù)Ig制劑還含有IgA，可溶性CD4，CD8和HLA分子以及某些細(xì)胞因子，Ig的半衰期約為3周，Ig上的Fc段可與巨噬細(xì)胞、B細(xì)胞及其他細(xì)胞的Fc受體結(jié)合并進(jìn)行信號(hào)傳遞.由于IgG來(lái)源于數(shù)目眾多的供血者，因而含有各種不同的抗原結(jié)合部位，通過(guò)與T細(xì)胞受體的不同部位結(jié)合來(lái)調(diào)節(jié)T細(xì)胞功能.

1 免疫調(diào)節(jié)機(jī)制

1.1 封閉Fc受體 Nagata ［1］ 在給予25例免疫性血小板減少性紫癜（ITP）患者Ig后發(fā)現(xiàn)，所有患者血小板數(shù)迅速增多，但將IgG的Fab段輸注給另外一些ITP患者，卻未見(jiàn)血小板增多，因此認(rèn)為Ig是通過(guò)Fc段阻斷巨噬細(xì)胞上的Fc受體（FcR）而抑制巨噬細(xì)胞對(duì)抗體披覆的血小板的破壞和清除.Cormick等 ［2］ 在使用Ig治療多發(fā)性系統(tǒng)性硬化癥中又證實(shí)了Ig同樣可封閉T細(xì)胞上的FcR.多發(fā)性系統(tǒng)性硬化癥的發(fā)生是由于激活的T細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞黏附因子如整合素和選擇素，使之易于穿過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞通過(guò)血腦屏障而進(jìn)入腦組織，引起一系列炎癥反應(yīng)，而Ig可封閉T細(xì)胞表面的FcR，通過(guò)對(duì)受體的調(diào)節(jié)阻止T細(xì)胞激活.Ig通過(guò)與免疫細(xì)胞表面的FcR結(jié)合，使FcR失去對(duì)前炎癥刺激因子的反應(yīng)，最終阻斷靶細(xì)胞的免疫激活，抑制免疫反應(yīng)的發(fā)生. 1.2 調(diào)節(jié)炎癥性細(xì)胞因子的合成和釋放 體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Ig可調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的生成.Wang等 ［3］ 報(bào)道，可抑制細(xì)菌脂多糖誘導(dǎo)的T細(xì)胞產(chǎn)生IL-2，IL-10，TNFβ，IFN-γ，還可抑制細(xì)菌脂多糖刺激下培養(yǎng)24h的淋巴細(xì)胞產(chǎn)生各種淋巴因子，但對(duì)單核細(xì)胞無(wú)效.IL-6是造血干細(xì)胞的激活劑，參與T和B細(xì)胞的分化，可使表達(dá)lL-6的單核細(xì)胞數(shù)目減少，但可使血漿中IL-6水平明顯上升，提示Ig不僅可促進(jìn)IL-6的表達(dá)，同時(shí)也可促進(jìn)其釋放.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Ig對(duì)某些細(xì)胞因子產(chǎn)生的調(diào)節(jié)是通過(guò)控制其轉(zhuǎn)錄水平而實(shí)現(xiàn)的，目前已被證實(shí)的受這種轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)的細(xì)胞因子有IL-6，TNF-γ，IL-1，IL-8.Ig與FcRs的作用還可導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)第二信使環(huán)磷酸腺苷水平升高，從而激活環(huán)磷酸腺苷依賴(lài)的蛋白激酶的磷酸化，最終通過(guò)相應(yīng)的信號(hào)傳導(dǎo)途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的產(chǎn)生.Ig中包含某些細(xì)胞因子的特異性中和抗體，其存在也可下調(diào)某些細(xì)胞因子的水平 ［4］ .

1.3 抑制補(bǔ)體的激活 Ig可結(jié)合補(bǔ)體C 3b ，C 4b 片段，阻斷其與靶細(xì)胞的結(jié)合.Forssman休克是以肺水腫和肺出血為主要表現(xiàn)的典型的補(bǔ)體介導(dǎo)的免疫病理反應(yīng)，當(dāng)給豚鼠注射兔抗Forssman血清后，豚鼠在幾分鐘后即死亡.若立即給予Forssman休克的豚鼠注射Ig，則75%的豚鼠可獲存活 ［5］ .給予皮肌炎患者注射Ig也可發(fā)現(xiàn)其小血管內(nèi)C 3b ，C 5b 的沉積明顯減少，提示Ig對(duì)補(bǔ)體有抑制作用.目前Ig抑制補(bǔ)體的作用機(jī)制尚不清楚，有人認(rèn)為Ig可抑制C 3 轉(zhuǎn)化酶，阻止紅細(xì)胞對(duì)C 4 的攝取.

1.4 促進(jìn)內(nèi)源性IgG的清除 內(nèi)源性IgG水平的調(diào)節(jié)主要依賴(lài)于機(jī)體對(duì)其分解代謝的強(qiáng)弱.當(dāng)體內(nèi)IgG水平增高時(shí)，過(guò)多的IgG與保護(hù)性受體FcRn結(jié)合，使IgG的分解加強(qiáng)，從而維持IgG的水平.Xu等 ［6］ 認(rèn)為，內(nèi)皮細(xì)胞可表達(dá)IgG的保護(hù)性受體FcRn，在酸性環(huán)境中FcRn與IgG具有較強(qiáng)的親和力，而在中性環(huán)境中二者親和力明顯下降.內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)IgG的攝取是通過(guò)液相的胞飲作用而使之進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的核內(nèi)體，在核內(nèi)體中（酸性）FcRn與IgG緊密結(jié)合，但當(dāng)核內(nèi)體再次移至細(xì)胞表面時(shí)由于接觸了中性的血漿環(huán)境而二者親和力迅速下降，IgG被重新釋放入血，保持血漿中IgG的動(dòng)態(tài)平衡，而在核內(nèi)體中未與FcRn結(jié)合的IgG則被轉(zhuǎn)運(yùn)至溶酶體內(nèi)降解.FcRn也可結(jié)合外源性IgG，Ig的輸入加大FcRn負(fù)荷，從而抑制與內(nèi)源性IgG的結(jié)合，因此無(wú) 論是生理性的還是病理性的內(nèi)源性IgG皆不與 FeRn結(jié)合而被轉(zhuǎn)運(yùn)至溶酶體被分解，從而清除體內(nèi)的致病性IgG.Ig的這種清除作用已被廣泛地應(yīng)用于自身免疫性疾病的治療.

1.5 中和自身抗體 自身免疫性疾病的發(fā)生是由于體內(nèi)自身反應(yīng)性B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生大量的自身抗體作用于自身抗原，導(dǎo)致組織細(xì)胞的破壞.Ig含有正常人體內(nèi)的抗特異性自身抗體的抗體，可與自身抗體的可變區(qū)結(jié)合，從而減少與抗原的結(jié)合.

1.6 中和上層抗原 上層抗原是來(lái)源于微生物的抗原物質(zhì)，例如葡萄球菌內(nèi)毒素B（SEB），可激活T細(xì)胞，使其表達(dá)特異的T細(xì)胞受體Vβ序列，并有較強(qiáng)的親和力，同時(shí)SEB與Ⅱ型主要組織相容性抗原復(fù)合物分子的某些區(qū)域相結(jié)合.上層抗原在主要組織相容性抗原復(fù)合物分子和T細(xì)胞受體分子間架起橋梁而進(jìn)一步促進(jìn)T細(xì)胞激活，而Ig也可結(jié)合T細(xì)胞受體Vβ序列，從而競(jìng)爭(zhēng)性地抑制SEB與β序列的結(jié)合，阻止T細(xì)胞受體與上層抗原的相互作用，最終抑制T細(xì)胞激活.上層抗原同樣可激活單核/巨噬細(xì)胞系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，SEB可激活巨噬細(xì)胞產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子，如IL-6，TNF，而Ig可通過(guò)其F（ab′）2片段阻止這種激活作用 ［7］ .

1.7 調(diào)節(jié)淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞的增殖與凋亡 Ig可抑制淋巴細(xì)胞的增殖，這種作用主要是通過(guò)干擾調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡的基因表達(dá)來(lái)實(shí)現(xiàn).在體外，Ig可抑制細(xì)胞對(duì)植物血凝素、刀豆素A及美洲商陸有絲分裂原的促增殖反應(yīng).此外，Ig對(duì)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的調(diào)節(jié)也對(duì)淋巴細(xì)胞的增殖產(chǎn)生正調(diào)節(jié)作用，例如IL-4水平的下降可抑制Th0細(xì)胞向Th2的分化，而IL-2的存在可以誘導(dǎo)T細(xì)胞的增殖和分化.因此Ig在體內(nèi)可通過(guò)上調(diào)IL-2水平，下調(diào)T細(xì)胞增殖來(lái)維持T細(xì)胞數(shù)目的穩(wěn)定.此外，Ig中的其他成分，如可溶性CD 4 分子可通過(guò)抑制Ⅱ型人體白細(xì)胞抗原與膜CD 4 分子的相互作用而干擾抗原的呈遞，最終阻止T細(xì)胞的激活和擴(kuò)增 ［8］ .

1.8 其他作用 Ig可通過(guò)間接作用使神經(jīng)髓鞘修復(fù).在膠質(zhì)細(xì)胞及其前體細(xì)胞的抗體介導(dǎo)性的補(bǔ)體損傷過(guò)程中起著保護(hù)作用，它是通過(guò)抗體聯(lián)合介導(dǎo)的，而不影響補(bǔ)體激活過(guò)程.這種對(duì)炎癥過(guò)程的抑制作用，可能是Ig發(fā)揮髓鞘修復(fù)作用的基礎(chǔ) ［9］ .Ig具有腦組織的局部作用，對(duì)腦脊液有滲透性，因血管-神經(jīng)屏障在神經(jīng)根部及神經(jīng)末端不完整，Ig可自由地在這些部位進(jìn)入神經(jīng)而發(fā)揮系統(tǒng)和局部的作用.

2 臨床應(yīng)用

Ig是機(jī)體免疫系統(tǒng)重要組成部分，在免疫調(diào)節(jié)和防御感染中起著重要作用.Ig的應(yīng)用包括替代療法（一般應(yīng)用劑量為每月0.4g/kg）和大劑量療法（每月2g/kg），分別用于治療不同疾病.

2.1 替代療法 Ig可升高抗體缺乏或原發(fā)性免疫缺陷病患者IgG水平，降低急性感染發(fā)生率.Ig替代治療低丙種球蛋白血癥，可使體內(nèi)IgG，IgM，IgA及球蛋白量均明顯升高.Ig與抗生素聯(lián)合治療嚴(yán)重感染，療效顯著，亦可行大劑量間歇療法，獲得理想的療效.

2.2 獲得性免疫缺陷病 先天性獲得性免疫缺陷綜合征嬰兒接受Ig后細(xì)菌感染和敗血癥發(fā)生率降低，細(xì)胞免疫功能增強(qiáng)，可提高存活率.

2.3 感染性疾病的輔助治療 Ig具有調(diào)理素及特異性抗體作用，增加吞噬細(xì)胞殺菌能力，具有較強(qiáng)的抗菌及抗病毒作用，對(duì)B組β溶血性鏈球菌、大腸桿菌、呼吸道合胞病毒、巨細(xì)胞病毒、肝炎病毒等感染引起的疾病有確切療效，也可用于燒傷后預(yù)防綠膿桿菌感染.

2.4 自身免疫性疾病 Ig可用于治療神經(jīng)系統(tǒng)自身免疫性疾病，治療格林-巴利綜合征、多發(fā)性硬化、急性脊髓炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡及狼瘡性腎炎等，其次為皮肌炎、類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎及系統(tǒng)性硬皮病.研究結(jié)果表明，大劑量Ig（每月2g/kg）對(duì)機(jī)體具有明顯的免疫調(diào)節(jié)作用，已應(yīng)用于多種自身免疫性疾病的治療.

3 不良反應(yīng)

Ig的不良反應(yīng)發(fā)生率約為5%，大多發(fā)生在首 次輸注時(shí)，常見(jiàn)的癥狀有惡心、頭疼、寒戰(zhàn)、皮疹和背痛，但反應(yīng)大多輕微.發(fā)生不良反應(yīng)的機(jī)制尚不清楚，可能與下列因素有關(guān):1）IgG激活補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)，隨即釋放過(guò)敏毒素及C3a，C5a;2）血管活性蛋白酶，如前激肽釋放酶激活劑或前激肽釋放酶的釋放;3）某些血管活性物質(zhì)的釋放，如單核細(xì)胞來(lái)源的IL-6，IL-10及由于組織損傷血小板聚集引起的血栓素β 2 、前列環(huán)素E 2 、組織胺等.

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篇6

[關(guān)鍵詞] 小兒喘息性疾病；血清總免疫球蛋白E；特異性免疫球蛋白E

[中圖分類(lèi)號(hào)] R725.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-4721（2015）07（b）-0068-03

[Abstract] Objective To study the application value of detection of total serum immunoglobulin E（tIgE） and specific immunoglobulin E（sIgE） in diagnosis of children with respiratory allergic disease. Methods 60 Children with respiratory allergic disease admitted into our hospital from September 2011 to September 2014 were selected as observation group，another 30 cases of healthy children was as control group.The observation group had already been diagnosised as respiratory allergic disease.Serum tIgE and sIgE was measured by enzyme linked immunosorbent assays，and the relevant results was compared between two groups. Results Levels of serum tIgE and sIgE in the observation group respectively was （501±219） U/ml and （3450±1240） U/L，which was remarkably higher than that of control group，the difference was significant（P

[Key words] Children with respiratory allergic disease；Total serum immunoglobulin E；Specific immunoglobulin E

小兒喘息性疾病是臨床兒科一種常見(jiàn)的小氣道疾病[1-2]，其臨床表現(xiàn)是以特異性或非特異性小氣道病理改變?yōu)榛A(chǔ)的病癥[3]。臨床治療棘手，且早期診斷困難。相關(guān)研究表明，小兒喘息性疾病同免疫球蛋白E關(guān)系緊密[4]。有學(xué)者指出，血清總免疫球蛋白的含量越高，其喘息的發(fā)作率越高[5]，但在實(shí)際研究中發(fā)現(xiàn)部分患兒血清總免疫球蛋白含量并未升高，而特異性免疫球蛋白水平升高。本研究通過(guò)對(duì)本院60例喘息性疾病患兒體內(nèi)總免疫球蛋白E（tIgE）及特異性免疫球蛋白E（sIgE）水平進(jìn)行檢測(cè)，探討其與小兒喘息性疾病的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇本院2011年9月～2014年9月收治的60例喘息性疾病患兒作為觀察組，另外選取同期體檢健康的30例小兒作為對(duì)照組。觀察組：男42例，女18例，年齡3個(gè)月～9歲，平均（2.2±1.5）歲；對(duì)照組：男17例，女13例，年齡3個(gè)月～10歲，平均（2.6±0.9）歲。觀察組中喘息性支氣管炎患兒16例，支氣管哮喘患兒24例，毛細(xì)支氣管炎患兒20例。病例納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患兒符合《實(shí)用兒科學(xué)》中關(guān)于喘息性疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)。病例排除標(biāo)準(zhǔn)[6]：患有嚴(yán)重心、腎、神經(jīng)系統(tǒng)疾病的患兒，異物吸入、小氣道發(fā)育異常、先天性發(fā)育畸形的喘息性疾患及已經(jīng)接受糖皮質(zhì)激素和免疫調(diào)節(jié)劑等治療的患兒。對(duì)照組中排除家族及個(gè)人過(guò)敏疾病史。兩組兒童的年齡、性別等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

1.2 方法

兩組兒童均采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測(cè)tIgE，其試劑盒購(gòu)自上海森胸有限科技實(shí)業(yè)公司，操作按試劑盒說(shuō)明逐步進(jìn)行，酶標(biāo)儀選擇BIO-RAD公司提供的550型；sIgE檢測(cè)采取歐蒙印跡法檢測(cè)，血清不需稀釋?zhuān)闷桨鍜呙鑳x掃描實(shí)驗(yàn)條，并用歐蒙專(zhuān)用EUROlineScan分析軟件進(jìn)行結(jié)果分析。注意鑒別抗原檢測(cè)抗原著色的深淺，檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)[7]：tIgE>200 U/ml則視為陽(yáng)性；sIgE>350 U/L視為過(guò)敏原檢測(cè)陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析相關(guān)數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；以P

2 結(jié)果

2.1 兩組tIgE及sIgE水平的比較

觀察組兒童血清tIgE及sIgE水平均高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P

2.2 觀察組血清免疫球蛋白及過(guò)敏癥狀的檢查結(jié)果

60例喘息性疾病患兒中，65%患兒（36/60）的血清免疫球蛋白偏高，另外變態(tài)反應(yīng)癥狀患兒27例，占45%。

2.3 tIgE或sIgE檢測(cè)喘息性疾病的靈敏度

單獨(dú)采用血清tIgE檢測(cè)的靈敏度為67%，單獨(dú)采用sIgE檢測(cè)的靈敏度為65%，兩者聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度為78%，受試者工作特征（receiver operating characteristic curve，ROC）曲線(xiàn)下面積為89%（圖1）。

3 討論

小兒喘息性疾病是兒科較為常見(jiàn)的疾病[8]。研究發(fā)現(xiàn)，遺傳、感染、過(guò)敏或免疫性質(zhì)改變等因素均是造成小兒喘息性疾病的重要原因[9]。其作用器官主要以小氣道和毛細(xì)支氣管炎、喘息性氣管炎、哮喘為主要癥狀[10]，且此3類(lèi)病癥相互作用密切。研究發(fā)現(xiàn)，喘息性疾病患兒體內(nèi)CD4+相對(duì)于CD8+顯著升高[11]，兩者比例相對(duì)增高。小氣道由于變應(yīng)原刺激發(fā)生變態(tài)反應(yīng)，免疫β細(xì)胞大量增多，免疫球蛋白E的合成增多[12]，炎癥細(xì)胞加速了炎性因子包括白細(xì)胞介素（IL）-1、IL-8、腫瘤壞死因子的水平，造成氣管支氣管痙攣，引起氣道高反應(yīng)，成為喘息性疾病的誘因。

研究[13]表明，喘息性疾病患兒的tIgE水平升高，其發(fā)病原因同Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)具有顯著相關(guān)性，而免疫球蛋白E升高是Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)發(fā)生的基礎(chǔ)，也是喘息性疾病反復(fù)發(fā)作的重要原因。本研究中，喘息性疾病患兒的tIgE和sIgE水平較健康正常兒童顯著升高，說(shuō)明喘息性疾病患兒血清tIgE、sIgE水平同疾病發(fā)生具有一定的關(guān)系，同以往的報(bào)道結(jié)果一致。由此說(shuō)明，早期檢測(cè)患兒血清tIgE和sIgE水平有助于及時(shí)發(fā)現(xiàn)過(guò)敏體質(zhì)[14]，排除其他疾病，及時(shí)給予早期治療，有利于改變病情，且對(duì)于病情預(yù)后具有指導(dǎo)性意義。

在研究tIgE對(duì)于喘息性疾病的診斷意義中可見(jiàn)，已確診的患兒中部分經(jīng)tIgE檢測(cè)結(jié)果正常，而sIgE顯示結(jié)果為陽(yáng)性，說(shuō)明兩者診斷可以進(jìn)行互補(bǔ)，且本研究結(jié)果也說(shuō)明，單一采用任何一種作為檢驗(yàn)方法的結(jié)果都不可靠，仍然存在較大的差異。本研究通過(guò)采用ROC曲線(xiàn)發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)應(yīng)用tIgE檢測(cè)的靈敏度為67%，單獨(dú)應(yīng)用sIgE檢測(cè)的靈敏度為65%，但兩者聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度為78%，且ROC曲線(xiàn)下面積為89%，說(shuō)明在實(shí)際工作中應(yīng)當(dāng)將tIgE和sIgE聯(lián)合檢測(cè)做為診斷手段，才能提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性。

此外，喘息性疾病的發(fā)生與外界過(guò)敏原的激發(fā)及年齡的不同有關(guān)[15]。有研究表明，喘息性疾病患兒中發(fā)生支氣管炎時(shí)，血清sIgE陽(yáng)性率較低，其發(fā)生原因可能與毛細(xì)支氣管炎產(chǎn)生免疫球蛋白E的能力低有關(guān)，而且毛細(xì)支氣管炎喘息發(fā)作也會(huì)受到其他相關(guān)因素的作用，但這方面的研究還較為欠缺。但不論怎樣，應(yīng)用特異性變應(yīng)原檢測(cè)是目前檢測(cè)變態(tài)反應(yīng)的重要手段，臨床上對(duì)于tIgE和sIgE檢測(cè)的界值仍然較難確定，今后還需要更多臨床研究，確定兩者最佳的診斷值，以期提高小兒喘息性疾病的檢出率。

綜上所述，小兒喘息性疾病同免疫球蛋白水平具有密切的關(guān)系，采用血清tIgE和sIgE聯(lián)合檢測(cè)可以顯著提高小兒喘息性疾病的檢出率，值得臨床推廣應(yīng)用。

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篇7

關(guān)鍵詞：紫球藻；抗菌蛋白；純化；性質(zhì)

中圖分類(lèi)號(hào)：Q949．29＋2．1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：0439－8114（2011）08－~1587-03

Purification and Some Characteristics of Antimicrobial Protein from

Porphyridium cruentum

CHEN Xiao－qing1，ZHENG Yi2，LIN Xiong－ping3

（1．Department of Biology Science and Technology， Zhangzhou Normal College， Zhangzhou 363000，F(xiàn)ujian，China； 2． Fujian Higher Educational Key Laboratory of Development and Neural Biology，College of Life Sciences／Fujian Normal Univerity， Fuzhou 350108，China； 3． Department of Biology Technology， Ningde College， Ningde 352100， Fujian，China）

Abstract： An antibiotic protein was isolated and purified from Porphyridium cruentum by ammonium sulfate precipitation andchromatography on HA． According to SDS－PAGE determination， the protein appeared two bands with molecular weight of 21kD and 30kD． The protein was sensitive to temperature change． The protein consisted of seventeen kinds of amino acids， among which the content of Glu， Gly and Asp was high respectively． The purified protein had strong antifungal activity against Penicillium chrysogenum． Antifungal activities were stronger than antibacterial activities in the antimicrobial protein of Porphyridium cruentum．

Key words： Porphyridium cruentum； antimicrobial protein； purification； characterization

植物含有豐富的抗菌蛋白，有數(shù)百種之多，如蘿卜［1］、尾穗莧［2］、銀杏［3］和葫蘆種子［4］中的抗菌蛋白以及幾丁質(zhì)酶、葡聚糖酶、蛋白酶抑制劑、核糖體失活蛋白等［5］，它們都有不同程度的抑菌作用。Melo等［6］報(bào)道沙菜（紅藻類(lèi)）的粗蛋白具有抗真菌作用及從墨角藻中提取的類(lèi)凝集素能抑制大腸桿菌和腦膜炎雙球菌生長(zhǎng)；陳國(guó)強(qiáng)等［7］研究發(fā)現(xiàn)，3種大型海藻的粗蛋白對(duì)6種植物病原真菌的菌絲生長(zhǎng)及孢子萌發(fā)具有不同程度的抑制效果，但目前對(duì)微藻抗菌蛋白的研究報(bào)道較少。

紫球藻（Porphyridium cruentum）是一種比較原始的單細(xì)胞紅藻，具有獨(dú)特的物理特征，在生長(zhǎng)過(guò)程中能合成多種有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的生物活性物質(zhì)。前期的研究發(fā)現(xiàn)紫球藻的蛋白質(zhì)提取物具有抗菌活性［8］。本試驗(yàn)對(duì)此抗菌蛋白進(jìn)行了分離純化，并測(cè)定了其部分性質(zhì)，為進(jìn)一步開(kāi)展微藻資源的研究提供參考。

1材料和方法

1．1材料

試驗(yàn)藻種為紫球藻，引自中國(guó)科學(xué)院水生生物研究所，以KOCH培養(yǎng)基進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，培養(yǎng)光照強(qiáng)度為3 000 μmol／（m2?s），光周期為12 h光照／12 h黑暗，培養(yǎng)溫度為25～30℃，取對(duì)數(shù)期（培養(yǎng)10 d后）的培養(yǎng)物，離心洗滌，收集藻泥，4℃保存?zhèn)溆谩＞N來(lái)自福建師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院（6種細(xì)菌）和福建農(nóng)林大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院（6種真菌）。

1．2方法

1．2．1抗菌蛋白質(zhì)的分離純化將紫球藻泥懸浮于pH值為6．8的10 mmol／L磷酸緩沖液（PBS）中，反復(fù)凍融，結(jié)合超聲波破碎，離心，取上清液，加入硫酸銨至飽和度為55％，充分?jǐn)噭?，?℃冰箱保存12h后離心，收集沉淀并溶于少量的PBS中，透析，離心，獲上清液，即為紫球藻蛋白提取物，檢測(cè)抗菌活性，獲得抗菌蛋白粗品，4℃保存。

將適量濃縮后的抗菌蛋白粗提液上羥基磷灰石（HA）柱層析，用pH值為6．8的1 mmol／L PBS預(yù)平衡HA（1．8cm×30cm層析柱），上樣量2 mL，以離子強(qiáng)度不斷增加的PBS（分別為1、5、50、100、200 mmol／L，pH值為6．8并加入0．1 mol／L NaCl）洗脫，洗脫速度為20 mL／h，樣品4 mL／管，分部收集洗脫液，測(cè)定280 nm的吸光度（A），待A280＜0．01時(shí)換洗脫液。以考馬斯亮藍(lán)染色法（CBB－G250）測(cè)定蛋白質(zhì)濃度，用不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）測(cè)定純度，在室溫下用日立U－3400紫外分光光度計(jì)測(cè)定其吸收光譜［9］。

1．2．2測(cè)定蛋白質(zhì)亞基分子量參考Laemmli的方法［10］，采用十二烷基硫酸鈉－聚丙烯酰胺凝膠電泳（SDS－PAGE）測(cè)定蛋白質(zhì)亞基分子量，分離膠濃度為12％，濃縮膠濃度為3．9％。

1．2．3氨基酸組成分析取純品1 mg，加入6 mol／L鹽酸，至安瓿瓶中120℃水解6 h，用去離子水反復(fù)沖洗去除鹽酸，采用日立835－50型氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定氨基酸組成。

1．2．4抑菌活性的測(cè)定純化后的蛋白質(zhì)，配制成10 mg／mL的溶液，參照文獻(xiàn)［11］，采用圓形紙片法測(cè)定其抑菌活性，觀察結(jié)果并測(cè)量抑菌圈直徑的大小。各個(gè)步驟均按無(wú)菌條件操作，每個(gè)樣品設(shè)2個(gè)平行樣，取平均值。

1．2．5熱穩(wěn)定性分析純化的抗菌蛋白質(zhì)（10 mg／mL）分別置于50～100℃處理30 min，每10℃ 1個(gè)溫差，以最敏感菌為指示菌，測(cè)定其抑菌活性。

2結(jié)果與分析

2．1抗菌蛋白的分離純化

紫球藻蛋白提取液以HA柱層析，在洗脫過(guò)程中，隨磷酸鹽離子濃度的提高而逐漸出現(xiàn)一個(gè)鮮艷的粉紅色洗脫峰（圖1），收集此洗脫部分并透析濃縮，以產(chǎn)黃青霉為指示菌進(jìn)行檢測(cè)，具有抗菌活性，即為收集的抗菌蛋白。

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用紫外分光光度計(jì)測(cè)定此抗菌蛋白吸收光譜，在545nm有特征性吸收峰。以抗菌蛋白溶液在最大可見(jiàn)光吸收峰波長(zhǎng)的吸光度與蛋白質(zhì)的特征吸收值之比來(lái)表示純度，可得A545／A282＝5．23?？咕鞍纂娪荆≒AGE）得到1條帶，說(shuō)明經(jīng)過(guò)1次HA柱層析即可得到純化的蛋白。

2．2抗菌蛋白的性質(zhì)

2．2．1亞基分子量紫球藻抗菌蛋白的SDS－PAGE顯示出2條帶（圖2），表明是由2個(gè)亞基組成，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)蛋白的相對(duì)遷移率（Rf）比較，它們的分子量為21.0 kD與30.0 kD。

2．2．2氨基酸組成氨基酸測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1，可知除色氨酸全部被破壞未測(cè)出以外，紫球藻抗菌蛋白含有17種氨基酸，其中，谷氨酸含量最高，其次為天冬氨酸與甘氨酸含量，組氨酸與胱氨酸含量最少。

2．2．3抑菌活性從表2可以看出，純化的紫球藻抗菌蛋白對(duì)6種真菌和4種細(xì)菌有抑制活性。對(duì)產(chǎn)黃青霉的抑制活性最為明顯，對(duì)細(xì)菌的抑制不如對(duì)真菌的抑制作用強(qiáng)。紫球藻抗菌蛋白對(duì)各個(gè)真菌的抑制活性并不完全相同，這也與許多報(bào)道的抗菌蛋白性質(zhì)相一致。

2．2．4熱穩(wěn)定性以產(chǎn)黃青霉為指示菌做抑菌試驗(yàn)，紫球藻抗菌蛋白在50℃處理30 min后仍有抗菌活性，在60℃處理30 min后抗菌活性消失，說(shuō)明此抗菌蛋白對(duì)溫度較為敏感。

3討論

國(guó)內(nèi)外研究人員已進(jìn)行了大量關(guān)于植物抗真菌蛋白的研究，并從70多種植物中發(fā)現(xiàn)了170余種具抗真菌功能的蛋白，這些蛋白對(duì)多種植物病原菌有抑制作用，是植物防御體系的重要組成部分［12］。本試驗(yàn)所得蛋白質(zhì)對(duì)供試的動(dòng)植物病原菌有一定的抑制作用，對(duì)溫度變化較為敏感，這與海水小球藻抗菌蛋白對(duì)熱較為穩(wěn)定不同［13］。

目前，對(duì)植物病蟲(chóng)害的防治，主要采用化學(xué)合成的殺菌劑，但由于化學(xué)合成的農(nóng)藥毒性大，在自然界難以降解，致使生態(tài)環(huán)境受到嚴(yán)重的破壞。利用生物產(chǎn)生的天然活性物質(zhì)直接作為殺菌劑或以其新穎的化學(xué)結(jié)構(gòu)作先導(dǎo)化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化開(kāi)發(fā)合成的類(lèi)似物，已日益受到重視［14］。本試驗(yàn)中所獲得的抗菌蛋白具有廣譜抗動(dòng)植物病原菌的活性，因此，有必要深入探討其抑菌作用的內(nèi)在分子機(jī)制，為抗菌蛋白的研究建立基礎(chǔ)［5］。

自20世紀(jì)60年代以來(lái)，國(guó)內(nèi)外許多學(xué)者圍繞紫球藻的分類(lèi)、生態(tài)營(yíng)養(yǎng)、培養(yǎng)及應(yīng)用等方面進(jìn)行了研究，取得了良好進(jìn)展，但對(duì)其蛋白質(zhì)生物活性的研究較少。因此，本研究可為今后進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用紫球藻提供有用的參考資料。

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篇8

關(guān)鍵詞 大劑量　靜脈注射丙種球蛋白 早產(chǎn)兒　感染性疾病

資料與方法

一般資料：根據(jù)金漢珍主編的第3版《實(shí)用新生兒學(xué)》中對(duì)早產(chǎn)兒的定義標(biāo)準(zhǔn)收集2002年12月-2007年12月住院早產(chǎn)兒84例，出生日齡

方法：兩組均給予保暖、吸氧、抗生素預(yù)防感染，及對(duì)癥支持治療，維持水電解質(zhì)平衡。治療組加用丙種球蛋白(IVIG)1g/(kg?次)，連用3天。

結(jié)果

發(fā)病情況：2組早產(chǎn)兒入院后發(fā)生感染性疾病病例次數(shù)比較，見(jiàn)表1～2組發(fā)病情況經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理差異有顯著性意義(P

轉(zhuǎn)歸：治療組治愈38例(90.48％)，死亡4例(9.52％)。對(duì)照組治愈32例(76.19％)，死亡10例(23.81％)。

平均住院天數(shù)：治療組9.5+4.6天，對(duì)照組12.7±5.3天，兩組住院天數(shù)差異有顯著性意義(P

篇9

急性脊髓炎是神經(jīng)科一種常見(jiàn)的自身免疫性脫髓鞘疾病,過(guò)去多應(yīng)用地塞米松治療,見(jiàn)效慢,療效差,不良反應(yīng)大。應(yīng)用甲基強(qiáng)的松龍治療后效果較地塞米松為好,不良反應(yīng)減少[1]。近年丙種球蛋白開(kāi)始應(yīng)用于神經(jīng)疾病。我院近5年來(lái)對(duì)18例急性脊髓炎患者進(jìn)行了大劑量甲基強(qiáng)的松龍合用丙種球蛋白治療,現(xiàn)將觀察結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料方法

1.1 一般資料 治療組18例,男10例,女8例。年齡16~61歲,平均34歲。對(duì)照組18例,男11例,女7例,年齡18~62歲,平均33歲。發(fā)病時(shí)間均在7 d以?xún)?nèi),兩組均符合急性脊髓炎臨床診斷標(biāo)準(zhǔn),入院時(shí)雙下肢肌力在0~3級(jí),均有感覺(jué)平面障礙及括約肌功能障礙,脊髓MRI腦脊液檢查支持脊髓炎診斷。兩組患者的性別、年齡、病情的嚴(yán)重程度差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。兩者具有可比性。

1.2 治療方法從入院確診時(shí)治療組給予丙種球蛋白0.4/kg•d,連用5 d,同時(shí)合用甲基強(qiáng)的松龍1000 mg加入5%葡萄糖液500 ml中靜點(diǎn)3 d,后500 mg甲基強(qiáng)的松龍靜點(diǎn)3 d,既每3 d減半,分別240,120,60,30,16,8,4。各3 d,60 mg時(shí)改為甲基強(qiáng)的松龍(美卓樂(lè))口服,共28 d。對(duì)照組單用甲基強(qiáng)的松龍,用法同上。在治療期間抗生素、抑酸劑、營(yíng)養(yǎng)神經(jīng)劑、理療正常應(yīng)用。未合用其他免疫抑制劑。

1.3 療效判定[2,3] 治愈:癱瘓恢復(fù)至自行行走,大小便功能恢復(fù)。顯效:由癱瘓恢復(fù)至持物行走。膀胱功能好轉(zhuǎn)。好轉(zhuǎn):肌力有恢復(fù),不能持物行走。無(wú)效:治療前后無(wú)變化,或死亡。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件包,率的比較采用 χ2檢驗(yàn),神經(jīng)功能恢復(fù)時(shí)間應(yīng)用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 治療組治愈顯效共16例,好轉(zhuǎn)2例,無(wú)無(wú)效及死亡病例。對(duì)照組治愈顯效共10例,好轉(zhuǎn)7例,死亡1例。結(jié)果表明治療組在治愈顯效率明顯高于對(duì)照組。見(jiàn)表1。

2.2 看出治療組神經(jīng)功能恢復(fù)時(shí)間較對(duì)照組明顯縮短。

3 討論

急性脊髓炎主要侵犯脊髓髓鞘,主要表現(xiàn)為髓鞘腫脹、脫失,周?chē)馨图?xì)胞顯著增生,軸索變性,血管周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn)。臨床癥狀主要表現(xiàn)為下肢癱瘓,傳導(dǎo)束性感覺(jué)障礙,和植物神經(jīng)受損表現(xiàn)的尿便障礙。發(fā)病機(jī)制可能為病毒感染后誘發(fā)的異常免疫應(yīng)答[2]。大劑量甲基強(qiáng)的松龍治療急性髓炎能有效的改善脊髓神經(jīng)功能,廣泛應(yīng)用臨床。近年丙種球蛋白開(kāi)始廣泛應(yīng)用于神經(jīng)系統(tǒng)疾病。兩者合用的報(bào)道不多。本組病例顯示兩者合用可以明顯減少脊髓功能恢復(fù)的時(shí)間。

甲基強(qiáng)的松龍與丙種球蛋白治療脊髓炎作用機(jī)制尚不完全清楚。但急性脊髓炎作為一種免疫相關(guān)的疾病,兩者可以在免疫不同環(huán)節(jié)發(fā)揮作用。甲基強(qiáng)的松龍激素沖擊治療可誘導(dǎo)神經(jīng)系統(tǒng)侵潤(rùn)的T細(xì)胞的凋亡,抑制炎性反應(yīng),增強(qiáng)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞功能,從而減少毛細(xì)血管的通透性,減輕水腫,修復(fù)血腦屏障,改善脫髓鞘區(qū)的神經(jīng)傳導(dǎo)功能。改善局部血液循環(huán),降低脊髓中的脂質(zhì)過(guò)氧化物含量。免疫球蛋白可以封閉免疫細(xì)胞表面的Fc受體,通過(guò)對(duì)受體的調(diào)節(jié)阻止T細(xì)胞激活,可干擾調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和死亡基因表達(dá),從而抑制免疫反應(yīng)。促進(jìn)神經(jīng)髓鞘修復(fù)和少突膠質(zhì)細(xì)胞增生。中和補(bǔ)體、細(xì)菌毒素和病毒,干擾免疫復(fù)合物的生成沉積及免疫復(fù)合物對(duì)靶細(xì)胞所產(chǎn)生的溶解破壞作用,阻止了補(bǔ)體復(fù)合物與巨噬細(xì)胞結(jié)合,抑制巨噬細(xì)胞對(duì)自身組織的侵襲[3]。國(guó)外學(xué)者報(bào)道,多種免疫抑制劑聯(lián)合應(yīng)用治療自身免疫性疾病可提高有效率[4]。兩者應(yīng)用過(guò)程中應(yīng)注意激素副作用,肺部感染,血糖升高,血壓驟升,股骨頭壞死。丙種球蛋白相對(duì)副作用報(bào)道較小,但價(jià)格較昂貴,血液制品,應(yīng)注意其安全性。兩者合用遠(yuǎn)期療效還缺乏充分臨床證據(jù)支持。

參 考 文 獻(xiàn)

[1] 陳衛(wèi)東.大劑量甲基強(qiáng)的松龍沖擊治療在神經(jīng)免疫疾病的應(yīng)用.臨床神經(jīng)病學(xué)雜志,1992,5(2):120.

[2] 王維治.神經(jīng)病學(xué). 人民衛(wèi)生出版社,2006,518.

篇10

[關(guān)鍵詞] 高原；創(chuàng)傷；免疫球蛋白；C反應(yīng)蛋白

[中圖分類(lèi)號(hào)] R641 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2015）10（a）-0047-04

Change and significance of serum immunoglobulin and C reactive protein in patients with severe trauma in high plateau

QIAN Huigang FAN Jianlin GONGBAO Caidan CHEN Yuanqing

Department of Emergency Center， People′s Hospital of Qinghai Province， Xining 810007，China

[Abstract] Objective To investigate the change and clinical significance of serum immunoglobulin and C reactive protein （CRP） in patients with severe trauma in high plateau. Methods 30 cases of patients with serve trauma treated in Department of Emergency， People′s Hospital of Qinghai Province from January 2010 to December 2014 were selected， according to whether complicated with multiple organ dysfunction syndrome （MODS）， they were divided into MODS group （16 cases） and non-MODS group （14 cases）. Another 10 healthy subjects were selected as health group. Serum immune globulin and CRP levels were tested by rate scatter immune turbidimetric method， serum immune globulin and CRP levels of MODS group and non-MODS group on admission and after operation of 2， 4， 6， 8， 14 d were observed dynamicly and compared with those of health group. Results Compared with healthy group， the level of immunoglobulin in non-MODS group on admission was significantly decreased， CRP level was significantly elevated， the level of immunoglobulin in 14 d after operation was significantly higher （P < 0.01）. Compared with healthy group， levels of immunoglobulin in MODS group were decreased on admission and postoperative 2， 4， 6， 8 d， CRP level was increased， immunoglobulin and CRP levels were increased on postoperative 14 d （P < 0.05 or P < 0.01）. Immunoglobulin and CRP levels of MODS group and non-MODS group in 14 d after operation were compared， with statistical differences （P < 0.05 or P < 0.01）. Conclusion The changes of serum immune globulin and CRP levels can be used as an early warning factor after severe trauma， and dynamic observation is helpful to the assessment of patient′s condition.

[Key words] High plateau； Severe trauma； Immunoglobulin； CRP

創(chuàng)傷是當(dāng)今世界范圍內(nèi)的重大疾患之一，在所有疾患死因中，創(chuàng)傷居第4位，在年輕人群中居首位。隨著創(chuàng)傷急救體系的不斷完善和救治技術(shù)的不斷提高，創(chuàng)傷患者因傷所致的早期（傷后48 h內(nèi)）死亡率已明顯降低，但傷后并發(fā)癥所致的后期死亡率并無(wú)明顯降低。感染不僅是較為常見(jiàn)的創(chuàng)傷并發(fā)癥，而且是導(dǎo)致傷后急性呼吸窘迫綜合征（ARDS）、多器官功能障礙綜合征（MODS）等并發(fā)癥的重要原因，也是創(chuàng)傷患者后期死亡的主要原因[1]。嚴(yán)重創(chuàng)傷可以導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)神經(jīng)、內(nèi)分泌、免疫功能紊亂，造成創(chuàng)傷后一系列的炎性反應(yīng)，表現(xiàn)為全身性炎性反應(yīng)綜合征（SIRS）與MODS等，引發(fā)SIRS-MODS-多器官功能衰竭（MOF）動(dòng)態(tài)過(guò)程[2]。有學(xué)者提出，嚴(yán)重創(chuàng)傷以及隨即出現(xiàn)的SIRS、MODS等并發(fā)癥與機(jī)體受傷后部分炎癥介質(zhì)的變化密切相關(guān)[3-4]。本研究主要觀察30例嚴(yán)重創(chuàng)傷患者血清中部分炎性因子水平的變化，探討其在嚴(yán)重創(chuàng)傷中的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取青海省人民醫(yī)院急診科2010年1月～2014年12月住院的嚴(yán)重創(chuàng)傷[（創(chuàng)傷嚴(yán)重度（ISS）評(píng)分≥ 25分[5]患者30例，其中男21例，女9例；年齡21～52歲；創(chuàng)傷原因：交通傷18例，高處墜落傷4例，鈍器傷3例，例銳器傷3例，擠壓傷1例，爆炸傷1例；損傷部位：均以腹部損傷為主，入院即行剖腹探查術(shù)，其中創(chuàng)傷性脾破裂行脾切除術(shù)17例，腸修補(bǔ)或部分切除6例，肝修補(bǔ)填塞止血4例，結(jié)腸造口術(shù)2例，胰體尾切除1例。將入選患者按照是否并發(fā)MODS分為MODS組（16例）和非MODS組（14例），其中16例在入院后2～4 d出現(xiàn)MODS，且ISS評(píng)分均≥ 25分，30例患者中有26例存活，4例死亡，均死于MODS。另選10例健康體檢者作為健康組，男6例，女4例，年齡25～38歲。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 入院后結(jié)合創(chuàng)傷程度進(jìn)行病情評(píng)估，早期給予心肺復(fù)蘇及抗休克治療，同時(shí)及時(shí)針對(duì)創(chuàng)傷部位及創(chuàng)傷分級(jí)，積極通過(guò)急診手術(shù)有效控制和處理原發(fā)??；術(shù)后維護(hù)臟器功能、胃腸內(nèi)及胃腸外營(yíng)養(yǎng)支持、糾正酸堿失衡和電解質(zhì)紊亂，選用廣譜、有效抗生素防治感染。30例患者均行急診手術(shù)治療。

1.2.2 檢測(cè)方法 入院時(shí)及術(shù)后2、4、6、8、14 d各采集空腹靜脈血2 mL，離心后分離血清，注入2個(gè)0.5 mL EP管內(nèi)，每管0.5 mL，-70℃凍存，采用TMS-1024i全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，血清IgG、IgA、IgM水平測(cè)定采用速率散射免疫比濁法，C反應(yīng)蛋白（CRP）水平測(cè)定采用透射免疫比濁法。統(tǒng)一檢測(cè)10例健康體檢者的血清免疫球蛋白與CRP水平，動(dòng)態(tài)觀察嚴(yán)重創(chuàng)傷患者入院時(shí)及術(shù)后2、4、6、8、14 d的血清免疫球蛋白與CRP水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析和處理，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，采用方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與健康組比較，非MODS組入院時(shí)免疫球蛋白水平明顯降低，CRP水平明顯升高，術(shù)后14 d免疫球蛋白水平明顯升高（P < 0.01）；與健康組比較，MODS組入院時(shí)及術(shù)后2、4、6、8 d免疫球蛋白水平降低，CRP水平升高，術(shù)后14 d免疫球蛋白及CRP水平升高（P < 0.05或P < 0.01）。非MODS組與MODS組術(shù)后8、14 d的免疫球蛋白及CRP水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。見(jiàn)表1。非MODS組和MODS組血清IgG、IgA、IgM在入院時(shí)及術(shù)后2、4、6、8、14 d逐漸升高，CRP則逐漸下降至正常值。見(jiàn)圖1～4。

表1 各組血清免疫球蛋白與CRP水平比較（x±s）

注：與健康組比較，*P < 0.05，**P < 0.01；與非MODS組同時(shí)間點(diǎn)比較，P < 0.05，P < 0.01；MODS：多器官功能障礙綜合征；CRP：C反應(yīng)蛋白

3 討論

嚴(yán)重創(chuàng)傷可引起復(fù)雜的宿主反應(yīng)，破壞免疫系統(tǒng)的平衡，患者易患機(jī)會(huì)性感染和炎癥等并發(fā)癥[6]。嚴(yán)重創(chuàng)傷手術(shù)后人體內(nèi)環(huán)境出現(xiàn)紊亂，機(jī)體的自我修復(fù)過(guò)程是系統(tǒng)的、復(fù)雜的。通過(guò)生命體征監(jiān)測(cè)來(lái)評(píng)估損傷的嚴(yán)重程度，盡早使機(jī)體恢復(fù)內(nèi)環(huán)境平衡。但是，部分早期搶救復(fù)蘇成功的患者在后期還是死于感染、MOF等并發(fā)癥。早在20世紀(jì)60年代就有人提出了嚴(yán)重創(chuàng)傷可引發(fā)重要器官衰竭的理論，認(rèn)為嚴(yán)重的創(chuàng)傷及其并發(fā)癥可引發(fā)機(jī)體劇烈的免疫應(yīng)答，其中部分免疫反應(yīng)是有益的，另外一些免疫應(yīng)答卻是過(guò)度的或有害的，甚至可能加重或引發(fā)感染、MOF等。

目前，多項(xiàng)研究證實(shí)，MODS主要是由炎癥介質(zhì)及細(xì)胞因子參與下的級(jí)聯(lián)的病理生理變化所致[7-8]，其中免疫球蛋白與CRP扮演著重要角色。免疫球蛋白是指一類(lèi)具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)上與抗體相似的球蛋白。免疫球蛋白廣泛分布于血液、組織液及外分泌液中，在體液免疫中起重要作用。有研究認(rèn)為，創(chuàng)傷后皮質(zhì)醇及細(xì)胞因子的大量釋放，與存在于許多細(xì)胞膜的相應(yīng)受體結(jié)合而干預(yù)前B細(xì)胞的增殖和分化，影響了成熟B細(xì)胞的功能，從而導(dǎo)致免疫球蛋白的改變[9]。本研究顯示，創(chuàng)傷患者術(shù)后2 d的IgG、IgA、IgM明顯下降，說(shuō)明在創(chuàng)傷及手術(shù)打擊后機(jī)體立即出現(xiàn)免疫抑制。術(shù)后8 d，血清中免疫球蛋白逐漸恢復(fù)正常，術(shù)后14 d免疫球蛋白反而較健康組升高，這可能是創(chuàng)傷后早期的免疫球蛋白下降反饋刺激致后期免疫功能增強(qiáng)。但是，MODS組患者術(shù)后第8天免疫球蛋白仍明顯低于健康組；術(shù)后14 d，隨著病情趨于好轉(zhuǎn)，感染完全控制，IgG、IgA較健康組稍高。結(jié)果提示，嚴(yán)重創(chuàng)傷感染及創(chuàng)傷后的休克狀態(tài)等可使免疫抑制加重、時(shí)間延長(zhǎng)。

CRP是由肝臟合成的一種血漿蛋白，是機(jī)體急性時(shí)相反應(yīng)物質(zhì)。本研究顯示，非MODS組術(shù)后血清CRP水平升高，可在第8天后恢復(fù)正常，但MODS組的CRP在術(shù)后第8天升高更為明顯，這也反映病情的反復(fù)、加重及感染均可使CRP升高，當(dāng)然隨著病情的好轉(zhuǎn)、并發(fā)癥的治愈，CRP可下降并逐漸走向正常。

在多發(fā)傷患者中，嚴(yán)重的創(chuàng)傷應(yīng)激、高炎性反應(yīng)、高分解代謝、空腹在傷后早期、手術(shù)和其他干預(yù)治療往往導(dǎo)致蛋白質(zhì)能量營(yíng)養(yǎng)不良，脂肪沉積和肌肉組織進(jìn)一步消耗。這可以引起機(jī)體免疫功能下降，腸黏膜屏障的結(jié)構(gòu)和功能損傷，細(xì)菌和內(nèi)毒素易位。因此，所產(chǎn)生的全身性炎性反應(yīng)和感染等并發(fā)癥，影響患者的預(yù)后[10]。免疫功能低下在多發(fā)傷兒童中較為多見(jiàn)，與創(chuàng)傷嚴(yán)重程度存在密切關(guān)系，還可能與機(jī)體過(guò)度全身炎性反應(yīng)有關(guān)。減輕炎性反應(yīng)，改善免疫功能是治療的一個(gè)重要方面[11]。

嚴(yán)重創(chuàng)傷的特點(diǎn)是明顯的免疫反應(yīng)與炎癥和抗炎特性[12]。有研究表明，隨著海拔升高，血清免疫球蛋白含量增加，其中以IgG及IgM為著[13]。這可能是由于高原低氧環(huán)境下抑制T細(xì)胞功能降低，導(dǎo)致B細(xì)胞功能相對(duì)活躍，免疫球蛋白合成增加，提示可將創(chuàng)傷后IgG、IgA、IgM的動(dòng)態(tài)變化作為患者病情變化的參考指標(biāo)[14]。若減少糖皮質(zhì)激素的應(yīng)用，補(bǔ)充外源性IgG、IgA、IgM，可能會(huì)減少創(chuàng)傷后體液免疫抑制，從而有效預(yù)防創(chuàng)傷后患者合并感染。嚴(yán)重創(chuàng)傷感染及創(chuàng)傷后休克狀態(tài)可使免疫抑制加重、時(shí)間延長(zhǎng)，創(chuàng)傷手術(shù)后患者免疫功能狀態(tài)與病情轉(zhuǎn)歸有密切關(guān)系，對(duì)IgG、IgA、IgM及CRP的動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)可作為創(chuàng)傷患者手術(shù)后病情評(píng)估的客觀指標(biāo)，并且在免疫球蛋白制劑用于嚴(yán)重創(chuàng)傷后免疫調(diào)節(jié)的治療方面有一定的指導(dǎo)意義[15]。特異性免疫球蛋白制品在救治創(chuàng)傷感染、新發(fā)傳染病防治、應(yīng)對(duì)生物戰(zhàn)劑與生物恐怖潛在威脅等方面已成為某些發(fā)達(dá)國(guó)家的常規(guī)貯備[16]。羅敏生等[17]研究指出，CRP及免疫球蛋白水平對(duì)創(chuàng)傷后機(jī)體免疫功能并發(fā)癥發(fā)生及預(yù)后評(píng)估有一定的價(jià)值。

崔建華等[13]研究顯示，高原低氧環(huán)境中，機(jī)體的免疫功能有失調(diào)現(xiàn)象，可誘發(fā)免疫防御和免疫自穩(wěn)功能降低，同時(shí)，接觸外源和內(nèi)源抗原的機(jī)會(huì)也增加。在高原環(huán)境中，免疫功能本身自穩(wěn)功能下降的基礎(chǔ)上，急性創(chuàng)傷，尤其是嚴(yán)重創(chuàng)傷免疫功能受損難免進(jìn)一步加重，給嚴(yán)重創(chuàng)傷患者的救治帶來(lái)了巨大挑戰(zhàn)。因此，加強(qiáng)高海拔缺氧環(huán)境下嚴(yán)重創(chuàng)傷后人的免疫功能研究，對(duì)高原疾病防治和提高人群的整體健康水平有重要意義。

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