血細胞分析范文
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篇1
關鍵詞 血細胞分析儀 新鮮血 校準比對
doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.15.151
資料與方法
樣本來源:健康人及臨床患者新鮮抗凝全血(EDTA-K2,抗凝真空負壓采血管采集)。
方法:儀器校準:用校準參考儀器MEK7222-K型血細胞分析儀之進口原裝配套校準品對其進行校準,再在該儀器上將健康人新鮮抗凝全血連續測定11次,棄去第1次結果,計算其余10次各指標之均值作為新鮮血參考定值。用此定值新鮮血代替校準品對BC-5500及ABX-60兩臺血細胞分析儀進行校準(樣本采集到校準完成4小時內結束)。
比對試驗:選取臨床患者高、中、低值5份新鮮抗凝全血在上述校準后的各臺儀器上與其他樣本一同測定(測平行樣取均值)。以MEK7222-K型血細胞分析儀所測結果為標準,分別計算BC-5500及ABX-60兩臺血細胞分析儀所測結果之偏差(CV%)。
結 果
用新鮮血校準的BC-5500、ABX-60兩臺血細胞分析儀之檢測結果與校準參考儀器MEK7222-K分析儀之檢測結果配對比較t檢驗,均為P>0.05,表明差別無顯著性意義;RDW最大CV值為3.8%,PLT最大CV值為6.9%,MPV最大CV值為14.6%,其余各項指標CV值均
討 論
血細胞分析是臨床最常用的實驗室檢測指標,其結果的準確與否直接影響到多種疾病的診療。全自動血細胞分析儀由于計數準確,精密度高,操作簡便、快速,因而發展迅速,已逐漸取代傳統手工方法,成為臨床實驗室的主要檢測手段。但由于生產血細胞分析儀的廠家多,各自使用的測定原理和方法不盡相同,導致其測定結果及參考范圍有所差異。國內各醫院使用不同廠家和型號的血細胞分析儀已成為普遍現象,致使分析結果呈現不同程度的差異,給臨床跟蹤觀察與對比帶來困難[1]。
血細胞分析結果只有直接或間接地溯源至參考方法,才能保證檢測結果的正確性和不同儀器間結果的可比性[2]。血細胞分析儀校準品是權威部門認可的標準物質,只能用于與之配套的同一品牌型號的儀器,由于其價格昂貴、有效期短、進口入關手續復雜而不能及時獲得等問題,使其難以在實驗室推廣。
所謂自動血細胞分析儀實際上就是一臺比較器,它將實測數據與校準數據進行比較,繼而得出檢測標本的分析結果。由此可見,校準物在儀器測定結果的準確是否上起到決定性作用[3]。最好的校準品是經ICSH推薦的參考方法定值的新鮮人體血液:①氰化高鐵血紅蛋白法測定血紅蛋白(HGB)。②微量紅細胞壓積法測定紅細胞比容(HCT)。微量計數板手工計數RBC和WBC。③相差顯微鏡計數血小板,該新鮮血適用于各種型號儀器的校準。有報道可購買一臺性能最佳血細胞分析儀之配套校準品校準該儀器,再以該儀器作為校準參考儀器取得新鮮血各項參數用于其他多臺儀器的校準[4]。上述比對結果顯示:用新鮮血校準的BC-5500及ABX-60兩臺血細胞分析儀與校準參考儀器MEK7222-K分析儀各參數間進行配對資料t檢驗,均為P>0.05,表明差別無顯著性意義;五項基礎指標之CV值均小于衛生部臨檢中心允許的可接受范圍:尤以WBC、RBC、HGB、HCT四項指標的符合性最好。因EDTA-K 2抗凝血中,血小板體積不穩定,隨時間延長而增大,可能是導致PLT、MPV偏差較大的主要原因[5]。
實驗結果證明,用配套校準品校準一臺性能最佳血細胞分析儀,再用新鮮血在該儀器上取得參數后去校準其他多臺分析儀可取得滿意結果,該方法既簡便易行又經濟實用。
參考文獻
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2 葉應嫵,王毓三,申子瑜,等.全國臨床檢驗操作規程.南京:東南出版社,2006:47-81.
3 顧可梁,陳軍浩,谷俊俠,等.醫學實驗診斷學進展.南京:東南大學出版社,2000:47-53.
篇2
血小板假性減低的因素
采血不順利:此種情況多發生在老人,兒童及體質較差的的患者身上,因采血不順引起組織損傷,凝血因子混入血標本造成血小板集聚[1],產生微小的目測不到的凝塊。這是引起血小板假性減低最常見的原因。這些標本涂片鏡檢時可見大量的血小板凝聚成團。
標本放置時間:用EDTAK2作為抗凝劑已被國際血液學標本委員會認定并廣泛應用。EDTAK2會使血小板形態發生變化,其外膜形成微小管。游離端向外伸展形成偽足,這些偽足纏繞在一起形成血小板可逆聚集體若在。此時測定血小板會假性減低,直方圖呈鋸齒狀異常。但隨著時間延長可逆性聚集體會破壞[2]。因此采取室溫放置30分鐘可以避免這種情況的血小板假性減少[3]。
血小板EDTA依賴性聚集:一些患者血標本與EDTA抗凝劑混合后其血小板會發生EDTA依賴性聚集,有報道認為血小板EDTA依賴性聚集與血小板表面抗原(IGA、TGG、IGM)的自身抗體以及患者血清中抗心磷脂抗體有關由于全細胞分析儀對凝集體的結構不能識別,一些血小板未被計數導致血小板假性減低[4],這種凝集可見血小板直方圖異常,涂片鏡檢可見大量血小板凝集成團。
巨大血小板導致血小板計數假性降低:病人由于某些疾病血小板體積較大,超出了血細胞分析儀測定血小板的閾值,使血小板計數假性降低。在此種情況可見血小板直方圖底部分布較寬,MPV值較高。血涂片瑞氏染色后可見血小板體積較大。
血小板衛星現象:血小板衛星現象是指EDTA抗凝血中血小板黏附于白細胞周圍,這是由于白細胞表面的IGG或FC片斷與血小板表面的GPⅡB/ⅢA結合所致。由于一些血小板黏附于白細胞上,細胞分析儀計數血小板時未被計入導致血小板假性減少[5]。通過血涂片鏡檢可見大量血小板圍繞在多形核白細胞的周圍,形狀很象衛星。這種情況較少見,有報道稱加入枸櫞酸鹽可消除此現象。
血小板假性增高
溶血:標本溶血后紅細胞和白細胞受到破壞,破碎的紅白細胞碎片體積和血小板相近,都可被細胞分析儀誤計為血小板,使血小板計數假性增高。
小紅細胞:如果紅細胞體積過小,接近血小板體積的測定范圍,由于儀器只識別顆粒大小,不識別顆粒性質,誤將小紅細胞計成血小板,導致血小板假性升高,此種情況可見血小板直方圖尾部異常,涂片鏡檢可見紅細胞體積較小。
總之,造成血小板誤差的原因很多。這要求在實際工作中不僅要嚴格按照操作規程操作,還要仔細審核結果,如果發現血小板數目過高或過低、直方圖分布異常、計數與臨床不符時都應涂片鏡檢并重新計數。
參考文獻
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3 李勝發,程大林.血小板可逆性聚集在全血細胞分析儀中的影響[J].臨床檢驗雜志,2003,21(1):37.
篇3
關鍵詞:血細胞分析;血小板計數;影響因素
血常規是臨床醫學檢驗的常規項目,是最常用、最終的基本檢驗常規之一。血小板是血常規檢測中的常規參數,反應出血傾向和止血能力的指標。在醫學檢驗時必須獲取準確、可靠的數據。但在實際操作中血常規檢測結果容易受到眾多因素的影響。為了提高血常規檢測結果的準確性,現對我院在我院接受健康體檢的40例受試者的血常規檢測的影響因素進行分析,并提出合理的對策,以期避免影響因素,保證檢測結果更加精確。
1資料與方法
1.1一般資料 40例健康體檢者,納入標準為:①均簽署知情同意書;②均為我市直屬機關公務員、事業和企業單位的員工;③無嚴重心、肺、腎等重要器官功能障礙、無內分泌系統及免疫系統疾病;④血液檢查項目:血常規、血糖、血脂、肝腎功能、AFP、癌胚抗原定量等。排除標準:①惡性腫瘤患者;②合并有機體嚴重疾病者;③皮膚出現潰瘍、使用免疫抑制劑的患者;④嚴重感染者;其中男21例,女19例,年齡22~56歲,平均(43.6±12.5)歲。
1.2方法 ①靜脈血采集:取坐位.手臂伸直。暴露穿刺部位,選取合適的肘靜脈,常規消毒,抽取所有受檢者肘靜脈血4.0ml分別裝于2支EDTA-K2真空采血管內,測定前應將靜脈血樣品按照全血質控品顛倒混勻的要求,顛倒混勻10次,避免血液凝固,但不可劇烈振搖,以防溶血。根據標本送檢時間分為2h送檢組和24h后送檢組,根據保存溫度的不同分為室溫保存組和冰箱保存組,其他檢測條件相同。采用深圳邁瑞公司BC-5000血細胞分析儀及邁瑞生產的BC-5000配套試劑,按儀器操作說明進行。標本每次測定前,都要先進行質控品測定,空白計數符合標準。②末梢血采集:采用無名指指尖腹內側取血法,采集前輕輕按摩采集部位待自然充血后,行常規消毒,采集者右手持消毒采血針,將采集部位固定,自指尖腹內側迅速刺入,然后拔出采血針,棄去第一滴血[1],用一次性微量吸管采集約20μL血液。比較三種不同檢測方式下的血小板計數(PLT)。
1.3統計學處理 使用SPSS 15.0 軟件,計量資料、計數資料分別用均數±標準差(x±s)、頻數表示,統計學方法分別采用t、χ2檢驗,P
2結果
室溫保存與冰箱保存下的PLT均無統計學意義(P>0.05)。在靜脈血采集中,2h送檢組的PLT與24h送檢組有統計學意義(P
3討論
血常規主要通過血細胞數量變化及形態分布來判斷人體機能情況,為疾病的針對提供依據,對了解疾病的嚴重程度也有很大的幫助。血小板是血液中最小的細胞,可保護毛細血管的完整性,其檢測方法主要分為顯微鏡計數法和血細胞分析儀法。近年來,隨著血細胞分析儀等檢驗設備和技術的不斷發展,PLT檢驗結果的準確性和可靠性得到了很大程度的提高。血細胞分析儀的重復性好,在保證最高級別的結果準確性的同時,盡可能大地消除手工樣本預分類對檢測過程的影響。但血小板由于體積下,受各種因素的影響,容易發生黏附、聚集和變形破壞。在實際工作中,由于抽血者眾多,血液標本較多,不能及時送檢,送檢后也不能及時檢測。眾所周知放置時間過長會對檢測結果產生影響,這主要是隨著時間的延長,血小板發生黏附及聚集現象[2],內部結果也會發生變化。抗凝管的使用也使血液滲透壓發生變化,導致血小板腫脹。末梢血血液不夠通暢,局部溫度較低,血管直徑狹窄,可導致血液部分沉積,影響監測結果的準確性。此外,取血時的擠壓因素也可破壞血小板[3]。本研究結果顯示,采集血液后的送檢時間和采集部位都對PLT有較大的影響,有統計學意義(P
綜上所述,影響血常規檢驗結果的因素很多,要想保證檢測結果的準確性,除了要按照操作步驟嚴格執行規程以外,由于送檢時間和采集部位對血常規檢測的影響較大,臨床檢驗人員應該做好檢測前的質量控制,抽取靜脈血,盡量保證在2h后送檢進行檢驗。同時檢驗人員還要具備高度的責任心,科學嚴謹的工作作風和積極的工作態度,以確保檢測結果的準確性。
參考文獻:
[1]文家遠.臨床血常規檢測的影響因素及控制對策初探[J].中國現代醫生,2012,50(13):150-152.
篇4
當前,由于三分類、五分類血細胞分析儀的普遍應用,有些醫院的檢驗科就不再進行血涂片鏡檢,這樣很容易漏檢造成誤診。本文著重探討血涂片檢查的重要性。
1 復核血細胞分析儀計數是否正確
由于血細胞分析儀的計數可受很多因素影響,不可能使每項參數都完全正確,所以進行血涂片鏡檢的重要作用不能忽視。使用血細胞分析儀時,應對每例患者都作血涂片鏡檢,從血涂片中細胞分布情況,可大致估計血細胞數,因而可對照血細胞分析儀計數是否正確,以保證計數質量。
1.1 對白細胞計數的復核 筆者曾遇一重癥肝炎患者,血細胞分析儀計數白細胞異常增高,而血涂片中白細胞分布正常;后經手工計數,白細胞在正常范圍,考慮可能是高膽紅素血癥干擾儀器計數所致。采用生理鹽水洗滌,再重新計數,結果正常。由于同時作血涂片的檢查,使錯誤得以及時糾正。血細胞分析儀對白細胞計數的干擾因素可有:巨大血小板、血小板凝塊、有核紅細胞、溶血素、工作溫度等,造成白細胞假性升高或降低,故用血涂片進行復核很有必要。
1.2 對白細胞分類的復核 儀器對細胞分類是基本白細胞在加入溶血素后體積變化來區分,分類比較粗糙,只是一種過篩手段,與傳統分類不同,傳統手工分類是按基本細胞形態來分類的。目前,血細胞分析儀尚不能明確區分幼稚細胞、嗜酸性或嗜堿性粒細胞和單核細胞,也不能識別異型淋巴細胞等[1]。因此,進行鏡檢分類是必不可少的,它是保證細胞分類正確的基礎。目前尚無一種自動化血細胞分析儀可以代替手工涂片。
1.3 血小板計數的復核 用血涂片進行血小板數復核,需要有豐富的經驗,仔細觀察血涂片中血小板的形態及分布,如血小板數量正常而形態不正常,可進一步作血小板功能方面的檢查。如血小板數與儀器計數有出入,可能因素有:血小板凝集、細胞碎片、纖維蛋白、小紅細胞(體積<30 fL)、標本放置時間過長等,均可嚴重干擾血小板計數。
2 通過血涂片,并結合血細胞分析儀的各項參數及報警信號,可為臨床提供有價值的資料
2.1 根據白細胞參數及直方圖,結合血涂片檢查分析,可發現更有價值的資料 當參數的直方圖提示中性粒細胞數異常時,血涂片檢查應特別注意中性粒細胞是否有形態異常,如核左移常伴有中毒顆粒、空泡變性,是否有原始和幼稚細胞等,如中性粒細胞5葉核以上者超過3%則為核右移,為造血功能衰退或缺乏造血物質所致。當參數和直方圖提示中間細胞數異常時,血涂片檢查就應特別注意嗜酸性、嗜堿性粒細胞和單核細胞的形態變化及其所占比例,注意是否有原始或幼稚細胞。在實際工作中也可發現,白細胞總數在正常范圍內的白血病,如果不作血涂片檢查,往往易漏診。當直方圖和參數提示淋巴細胞異常時,血涂片檢查應特別注意有無異型淋巴細胞,有無原始和幼稚淋巴細胞等。
2.2 根據紅細胞參數及直方圖,結合血涂片,可為貧血的鑒別診斷提供有價值的依據,這時平均紅細胞體積(MCV)均小于正常對照值,紅細胞體積分布寬度(RDW)大于正常對照值。紅細胞大小不均,大紅細胞及巨紅細胞易見到,生理性中心淺染區常消失,可見多色性及有核紅細胞為巨幼紅細胞性貧血,MCV和RDW均高于正常對照組。鏡下見許多正色素性和低色素性紅細胞則多見于缺鐵粒幼細胞性貧血。以上各種原因的貧血均為造血原料不足或利用障礙引起。若見靶形紅細胞,RDW為正常范圍,則為地中海貧血。在溶血性貧血和再生障礙性貧血中,紅細胞形態可大致正常,若易見嗜多色性紅細胞,亦可見到有核紅細胞,且RDW大于正常對照時,可推斷為溶血性貧血;否則,可推斷為再生障礙性貧血,并觀察到粒細胞和血小板皆少。此外,鐮形紅細胞可見于血紅蛋白S病,口形紅細胞常見于遺傳性口形紅細胞增多癥;脾切除患者的紅細胞中可見多數棘細胞;在遺傳性橢圓形紅細胞增多癥的血涂片中,橢圓形紅細胞可在25%以上;紅細胞碎片或不完整的紅細胞,在彌漫性血管內凝血、微血管溶血性貧血、重型地中海貧血時出現較多。
3 血涂片鏡檢可檢查寄生蟲
臨床上常遇到不規則發熱的瘧疾患者,往往被誤診或漏診,在臨床醫師并未懷疑的情況下,由檢驗人員在血涂片中查見瘧原蟲而確診,而血細胞分析儀就無此功能。
篇5
為了解我室幾臺血細胞分析儀的性能,并為今后的室內及室間質量控制方案做準備,筆者采用新鮮血對本室幾臺血細胞分析儀做了比對實驗,現報道如下。
1 材料與方法
1.1 儀器與試劑:血細胞分析儀共3臺,其中Pentra-60 1臺
(ABX公司),ACT-diff2 1臺(BECKMAN公司),F-820 1臺(Sysmex公司),所有儀器都使用配套試劑,全血質控物(四川邁克公司批號090515F)。
1.2 標本收集
1.2.1 每天隨機選取臨床病人新鮮靜脈抗凝血小板(EDTA-K2抗凝)。
1.2.2 選取我院體檢正常者新鮮抗凝血標本(EDTA-K2抗凝)。
1.3 方法
1.3.1 儀器穩定性監控:每臺儀器每日以全血質控物做室內質控(批間精密度),并依據室內質控做隨程監控。分別計算參數WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值、SD和CV。
1.3.2 儀器精密度測定:取正常人新鮮抗凝靜脈血1份,分別在每臺儀器重復測定10次,計算WBC、RBC、PLT、HGB、HCT的均值,SD和CV。
1.3.3 比對儀器的確定:根據我室的具體情況,依據室內質控,選定Pentra-60(ABX)為參考比對儀器,其他2臺為測試儀器。
1.3.4 比對實驗:每日用2.1所采集的標本4份,在3臺儀器上分別進行測試,連續26天,比較測試儀器和參考比對儀器的測定結果,包括WBC、RBC、PLT、HGB、HCT。
1.4 統計處理
1.4.1 對各個儀器與參考比儀器結果做回歸和相關分析,求其相關系數r及回歸方程y=bx+a,然后根據回歸方程求x在允許誤差內的取值范圍,即有效檢測范圍,查閱相關文獻后,參考美國CLIA’88能力比對檢驗質量要求和國際血液學標準化委員會及NCCLS制定的標準設定允許誤差為:WBC:±5%,RBC:±2%,PLT:±9%,HGB:2%,HCT:±2%。
1.4.2 以參考范圍為界限(RBC為3.5~5.5×109/L,WBC為4~10×109/L,HGB為110~160 g/L,HCT為0.37~0.55L/L,PLT為100~300×109/L)[2],低于參考值為低值,高于正常參考范圍為高值,在參考范圍內為中間值,以參考比對儀器高中低值區段均值為測定值,計算各測試儀器相對參考比對儀器的變異百分率%=│測定值-正確值│正確值×100。
2 結果
2.1 從各儀器試驗期間室內質控結果可知CV%不大于5%,見表1,顯示各儀器在實驗期間性能穩定。
2.2 各儀器分析項目的批間精密度都在廠家規范范圍內,見表2。
2.3 比對儀器與其他2臺儀器相關分析見表3,回歸方程經方差分析推斷直線關系成立,P>0.05。
2.4 根據回歸方程Y=bx+a和設定的允許誤差范圍計算的有效測試范圍見表4。
2.5 兩臺測試儀器與對比儀器測定值間的變異百分率見表5。
3 討論
3.1 從各比對項目來看,我室ACT和F820兩臺測試儀器中,ACT和比對儀器有較好的符合性,一般在臨床應用上可以相互替換,但是在某些較低值時,見表4,WBC
3.2 F820的實驗結果就不盡人意了,可能是年代久遠的緣故(使用了8年),WBC在高于5.39×109/L時結果就會超過允許誤差,分區段計算的結果,見表5,也顯示在高值時的變異百分率8.87也超過5%,此外HCT和PLT也存在著較大偏差,需檢測一下F820的WBC、PLT、HCT的檢測系統,其中HCT有一定的影響,PLT在
3.3 在做相關分析時,相關系數R均大于0.99,見表3,但是利用回歸方程計算有效檢測范圍和高中低區段計算時仍有超出允許誤差的現象出現,此前有相關報道只利用相關系數來判定兩儀器的測定結果是否可以互換使用,這是不行的。所以在此次實驗中選用了這種方法來比較結果,可能會更準確一些。
篇6
【關鍵詞】全血細胞分析儀;精密度;線性;攜帶污染率;穩定性
【中圖分類號】R446 【文獻標識碼】A 【文章編號】1004-7484(2012)12-0037-02
1.1 材料 日本希森美康公司生產的SYSMEX XS-800i五分類自動血細胞分析儀;EDTA-K2抗凝管(瑞奇公司);四川邁克公司的全血質控品(批號為061214B);靜脈采集的新鮮全血標本。
1.2 方法
1.2.1 精密度試驗 取CBC質控、患者(高值、低值)健康人全血各一份在儀器上連續測定11次。去除第一個結果后,計算WBC的SD、CV值。
1.2.2 線性 取2個WBC絕對數大于25×109/L的標本,依次用稀釋液稀釋混勻成80%、、70%、50%、30%、10%的標本,然后上機檢測WBC2次,取均值。
1.2.3 攜帶污染率 取高值(WBC絕對數大于25×109/L)和低值樣本(WBC絕對數小于10×109/L)各一份,在自動進樣模式下,先測定高值3次(H1、H2、H3),再測定3次低次(L1、L2、L3);再在手動進樣模式下,同樣先測定高值3次(H1、H2、H3),再測定3次低次(L1、L2、L3)。按公式:CV%=[(L1-L3)/(H3-L3)]×100計算攜帶污染率。比較2種模式下WBC%、WBC#的攜帶污染率的差異。
1.2.4 穩定性 取6個標本,包括2個正常標本、2個高值標本(WBC絕對數大于25×109/L)和2個低值樣本(WBC絕對數小于10×109/L),上機檢測,然后在24h后,48h后,72h時后再分別上機檢測WBC兩次,取平均值,計算各組數據的變異系數CV值。
2 結果
2.1 精密度 患者標本重復檢測12次各參數結果的SD值和CV值見表1。
從上表可以看出各組數據的CV值均小于2%,表明XS-800I 儀器儀器在檢測WBC各參數的重復性良好。
2.2 線性 兩個樣本分別檢測兩次的WBC#平均值結果見表2。
經計算兩個樣本的線性回歸系數r=0.99,表明儀器的線性良好。
2.3 攜帶污染率 根據公式CV%=[(L1-L3)/(H3-L3)]×100計算攜帶污染率
全血模式下WBC#CV%=0.68%
全血模式下WBC%CV%=2.7%
從以上數據表明XS-800IWBC攜帶污染率CV值均小于3%,結果良好。
2.4 穩定性
高、低及正常值標本分別在0h,24h,48h,72h所測定的WBC值的CV,見表3
標本在72小時內結果CV%小于2%,結果良好
綜上所述,XS-800i檢驗結果的精密度,線性、攜帶污染、穩定性好,結果穩定可靠。
參考文獻:
[1] 叢玉隆.血液分析儀進展及臨床應用.全軍臨床檢驗專修班實用教材,1989,49.
篇7
[關鍵詞] Sysmex XT-1800i血細胞分析儀;白細胞不分類;異常血細胞;報警信息;形態學
[中圖分類號] R446.112[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-7210(2010)03(c)-070-02
白細胞分類計數是傳統血常規檢查中一項十分重要的內容,臨床醫生常根據儀器的白細胞分類做一個大致的臨床分析,特別是對血液科的患者,如中性分葉>90%考慮為有感染的可能,WBC總數降低、分類淋巴細胞比例>50%考慮為有病毒感染的可能,單核細胞>20%應考慮為有白血病的可能[1]。實際工作中有時會遇到白細胞不分類或分類不完全的情況,儀器僅給出相應的報警提示。如WBC減少、原始細胞增多、異型淋巴細胞增多及紅細胞抗溶等,遇到此類情況,應行血涂片進行血細胞形態學檢查。為探討異常白細胞不分類報警信息的可靠性,為臨床提供準確的診斷依據,筆者對100例儀器不分類標本報警信息和顯微鏡復檢結果進行了對比分析,探討相符性及其臨床診斷意義。
1 材料與方法
1.1 材料
所用材料來源于我院2008年3月~2009年6月Sysmex XT-1800i血細胞分析儀白細胞不進行分類的標本,共100例,其病例均為我院住院及門診患者,男57例,女43例;平均年齡36歲。
1.2 儀器與試劑
Sysmex XT-1800i血液分析儀(希森美康醫用有限公司生產),采用電阻抗原理進行細胞計數和體積測定,流式細胞術半導激活原理進行白細胞分類計數,對異常細胞給予警示信號;Olympus雙目顯微鏡(日本Olympus公司生產)。原廠家配套試劑:全血質控物、Sysmex的稀釋液、溶血劑、鞘液及染液。瑞氏染液(珠海貝索生物技術有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 血液標本上機前檢測篩查出冷凝集標本、脂血標本及溶血標本。
1.3.2 血液標本上機檢測儀器按要求進行日常保養及維護,確保儀器處于穩定狀態。血液標本上機檢測:進入電腦工作程序信息區,觀察FLAG所示的紅色警示信號和白細胞分類DIFF(細胞四分類)通道所示信息。將儀器不進行白細胞分類的標本推血涂片用瑞氏染色,外周血涂片復檢按照標準操作規程進行分析[2]。
1.3.3 鏡檢復查由2名有經驗的檢驗人員進行白細胞分類計數,每片在體尾交界厚薄適中處瀏覽200個有核細胞,取中間值。
2 結果
Sysmex XT-1800i檢測100例WBC未分類標本儀器所提供的報警信息與血涂片鏡檢所提供的細胞信息符合率見表1。
100例WBC未分類標本中,儀器分別在原始細胞、異型淋巴細胞、有核紅細胞、白細胞減少、核左移方面給出了警示,將其與鏡檢結果進行比較,其中白細胞減少、有核紅細胞、核左移鏡檢符合率最高,其中由于白細胞減少所引起的不分類或部分分類符合率達100.0%。
表1 細胞報警信息與顯微鏡復檢結果對比(例)
3 討論
Sysmex XT-1800i血細胞分析儀是Sysmex精心打造的新一代X系列,它在精確分析常規計數和分類項目的同時,還具備幼稚白細胞定量分析功能。其基本原理是采用半導體激光流式細胞原理結合細胞化學熒光染色技術,專用WBC-DIFF、WBC-BASO檢測雙通道進行WBC五分類測定。WBC-DIFF檢測通道:加入溶血素和染色液兩種試劑。溶血素可溶解紅細胞和血小板,并對嗜酸粒細胞顆粒進行特異性染色。染色液中的聚次甲基熒光染色液對白細胞的核酸DNA、RNA進行熒光染色。采用第三代細胞檢測光源――半導體激光(波長633 nm)進行細胞檢測,通過采用流式細胞技術,儀器對每個通過檢測部位的細胞或顆粒進行逐個分析,保證了儀器檢測的敏感性和穩定性[3]。
在正常情況下,Sysmex XT-1800i血細胞分析儀對正常白細胞分類能力比肉眼分析要精確得多,但在異常情況下,儀器分析只是依靠檢測細胞幾種物理特性,很難提供完全準確的分析結果[4],其原因考慮為由于病理(感染等)或藥物的作用,細胞的大小、形態及內容物發生改變,其電阻抗、散射光及熒光信號發生不規則改變,使儀器無法正確識別[5]。例如血液中含有原始幼稚細胞、瘧原蟲、組織胞漿菌以及常見的異型淋巴細胞等,此類細胞對疾病的診斷具有非常大的意義,但是血細胞分析儀都無法提供完全可靠的依據,僅在電腦屏幕上提供相應的報警信息,以供實驗室人員參考。實驗室人員可根據血液分析儀警示信息,縮小目標進行顯微鏡復檢,這樣既保證了結果的準確性,也提高了工作效率[6]。
筆者發現,不分類白細胞報警信息與鏡檢符合較高,例如,18例儀器報警原始細胞,儀器報警信息與鏡檢符合較高,占72.2%,其中9例考慮為白血病;22例儀器報警異型淋巴細胞,儀器報警信息與鏡檢符合較高,占63.6%,其中14例診斷為傳染性單核細胞增多癥。顯微鏡鏡檢9例為有核紅細胞,儀器報警信息與鏡檢符合較高,占94.1%,其中4例為新生兒,4例為溶血性貧血,1例為骨髓增生異常綜合征。7例儀器報警白細胞減少,儀器報警信息與鏡檢符合較高,占100.0%,其中3例考慮為再生障礙性貧血(AA)。但是4例瘧原蟲和1例組織胞漿菌則沒有提供指導意義的信息,儀器僅報警原始細胞及有核紅細胞。因此,儀器計數性能再好,檢測的靈敏度再高,它的檢測還是有局限性的。
作為實驗室的工作人員,參考高端血細胞分析儀的提示和報警信息及聯合顯微鏡目測,這樣得出的結果才能作為一些疾病診斷、治療的依據和觀察指標,為臨床提供更真實、更準確的相關信息,以減少或杜絕誤診、漏診的發生。
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篇8
【摘要】血細胞分析儀具有快速、方便、重復性好、工作效率高等優點,但是由于自身檢測原理的限制以及血小板易于粘附、聚集、破壞等特點,血細胞分析儀測定血小板時常常會出現假性減少現象。為此,現將血細胞分析儀計數血小板出現假性減少的原因進行簡單的探討。
【關鍵詞]】血細胞分析儀 血小板假性減少 原因分析
近年來,隨著科學技術的發展,醫學檢驗技術的不斷完善,血液分析儀器法檢測已逐漸取代了手工計數,血細胞分類的儀器檢測的準確度也大大提高,全自動血細胞分析儀在臨床檢驗中的應用也越來越廣泛,提高了臨床檢驗的工作效率,然而,儀器檢測受多種因素的影響以及血小板易于粘附、聚集、破壞等特點,血細胞分析儀測定血小板時常常會出現假性減少現象,致使檢測結果與實際臨床不符,給醫生的診斷帶來很大困難,也使檢驗醫師不敢冒然報告。為此,現將血細胞分析儀計數血小板出現假性減少的原因進行簡單的探討。
1 標本采集
正確采集血標本是獲得準確、可靠實驗結果的關鍵。在樣本采集前, 應根據實驗要求決定采血方法、所需血量及適用抗凝劑。
1.1 皮膚采血:采血不順利、多發生在老人,兒童及體質較差的的患者,因采血不順引起組織損傷,易于凝血、混入組織液,而且局部皮膚揉擦、針刺深度不一、個體皮膚厚度差異等都會影響檢查結果;凝血因子混入血標本造成血小板集聚。所以,采血部位的皮膚應完整,無燒傷、凍瘡、水腫或炎癥等。皮膚消毒后,應待75%乙醇揮發后采血,避免流出的血液擴散而不成滴。采血時針刺深度2~3mm。因第一滴血混有組織液,應擦去,如血流不暢切勿用力擠壓。
1.2 靜脈采血: 靜脈采血時止血帶結扎時間應小于1分鐘,待消毒液干后再進行穿刺,避免反復穿刺將組織液抽到注射器內,或將氣泡混入。應熟練掌握操作方法,抽血不宜過快,避免抽血過快血小板破壞,影響結果的準確性。
1.3 抗凝劑EDTA的影響:按照國際血液學標準化委員會(ICSH)的建議,1.5~2.2mg的EDTA-2K抗凝1ml的全血可以抑制血小板聚集,從而達到抗凝的目的。但有極少數人的血小板在用EDTA抗凝時,反而會出現血小板聚集,這種EDTA依賴性假性血小板減少可能與血漿中存在的抗血小板抗體和/或抗心磷脂抗體等自身抗體有關。另一種現象是血小板粘附于白細胞上的“血小板衛星現象”,它是由于白細胞表面的IgG或Fc段與血小板表面的GPⅡb/Ⅲa結合所致,與疾病和藥物也無關。對于這類標本,只能換用非EDTA抗凝劑進行重新計數,比如枸櫞酸鹽或在EDTA抗凝血中加入肝磷脂1。
1.4 標本放置時間不足:在實際工作中,采取標本后立即進行檢測,有時會出現血小板計數假性減少現象。用EDTAK2作為抗凝劑已被國際血液學標本委員會認定并廣泛應用。EDTAK2會使血小板形態發生變化,其外膜形成微小管。游離端向外伸展形成偽足聚集一體。此時測定血小板會假性減低,直方圖呈鋸齒狀異常。但隨著時間延長可逆性聚集體會破壞。因此采取室溫放置30分鐘可以避免這種情況的血小板假性減少。
2 標本檢測
2.1 檢測前,對檢測儀器進行檢查、校準,使其處于最佳工作狀態。每天堅持做室內質控,并根據質控結果判斷當日檢測的所有數據是否可靠。
2.2 檢測中,注意環境溫度應在18-25°C,低于15°C或高于30°C時均會對結果產生影響。
2.3 檢測后,對出現明顯異常的標本及時查找原因,重新測試,遇到危急值結果的,及時與臨床醫師聯系。
巨大血小板導致血小板計數假性降低:病人由于某些疾病血小板體積較大,超出了血細胞分析儀測定血小板的閾值,使血小板計數假性降低。此種情況可見血小板直方圖底部分布較寬,MPV值較高。
3 小結
血小板計數對血栓與出血性疾病的診斷和治療有重要的參考價值。在實際工作中,要排除一些干擾因素,保證血小板檢測結果的準確性,作為檢驗人員一定要具有很強的責任心,加強質控管理,不斷提高檢測結果的準確性,為臨床提供可靠的診斷和治療依據 。
參考文獻
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[2] 李駿淺析血細胞分析時血小板假性減少原因
篇9
【關鍵詞】 SysmexXN1000血細胞; 異型淋巴細胞; 報警提示
中圖分類號 R446.11 文獻標識碼 B 文章編號 1674-6805(2016)29-0070-02
doi:10.14033/ki.cfmr.2016.29.037
近年來,隨著醫療科技的高速發展,全自動生化分析儀及醫療設備已經普及到各級醫院中應用,以快捷準確的檢測結果為臨床診治疾病提供了極大的方便,全自動血液分析儀也一樣,在臨床檢驗中廣泛地應用,不僅為檢驗人員減輕了工作量,而且在很大程度上提高了檢驗質量和工作效率[1]。異型淋巴細胞俗稱“返祖現象”,是機體受某種病毒感染后再外周血出現的一種不典型淋巴細胞,為了探討SysmexXN1000血細胞分析對外周血異型淋巴細胞報警提示的可靠性,文中利用統計學比較方法,結合手工推片顯微鏡鏡檢測,就此展開實驗探討,現將具體報道如下。
1 資料與方法
1.1 一般資料
隨機選取2014年4月-2015年4月624例標本(筆者所在醫院住院患者和門診患者)作為研究對象,均行回顧性分析,同時收集同期360例有Q-Flag報警提示的標本作為對照研究,具體利用統計學對SysmexXN1000血細胞分析儀檢測到Atypical Ly報警和Atypical Ly未報警進行手工推片、瑞氏染色鏡檢測與儀器分析對比。
1.2 方法
對所收集的標本進行檢測前,先行確定儀器及試劑,患者的外周血檢測均采用SysmexXN1000血細胞分析儀。分析儀的配套試劑及血質控品分均是原裝配套試劑、全血質控品;檢測微鏡及染液分別為奧林巴斯顯微鏡、瑞士染液。
檢測操作如下:開始標本前檢測前,首先準確校準血細胞分析儀,并用Sysmex全血質控品行室內質控,完成上述操作后,再行靜脈采血化驗操作;抽取2.0~3.0 ml靜脈血,與EDTA-2抗凝劑充分混合后,靜止2 h,靜止2 h后再行標本檢測。同時,操作者行手工推片,在顯微鏡幫助下,鏡檢對經瑞氏染色后標本,按照分類標準分類,計數100~200個白細胞,計算出異型淋巴細胞百分率。在計算出結果后,把手工推片計算的異型淋巴細胞比例,與SysmexXN1000血細胞分析儀對血常規行檢測結果對比分析。
另外,計算儀器Atypical Ly報警提示檢出異性淋巴細胞,如特異性、敏感性,以及陰性、陽性預測值,計算出相關數值。選取Q-Flag報警提示的異型淋巴細胞,根據不間斷原則分析研究,劃分階段為1~100、101~200及201~300。
1.3 檢驗結果判定標準
通常情況下,人體異型淋巴細胞正常值為0~2.0%,當異型淋巴細胞數量升高大于10%時,具有較高的臨床診斷價值。
1.4 統計學處理
本研究中,對于研究所得的數據資料分析與處理均輸入至SPSS 20.0專用軟件中。計量資料以(x±s)表示,采用t檢驗,計數資料以率(%)表示,采用字2檢驗,P
2 結果
Atypical Ly提示檢出異型淋巴細胞的各項指標分別為:特異性39.26%,敏感性85.34%,陰性預測值62.91%,陽性預測值68.92%。
同時在Q-Flag報警提示不同階段都檢出異型淋巴細胞,有1~100、101~200、201~300不同階段比較差異有統計學意義(P
3 討論
本組實驗研究中,所選用的是日本東亞公司最新推出的可以組裝的全自動多功能參數血液分析儀-SysmexXN1000血細胞分析儀,此檢測儀每小時能夠檢測100個血常規標本,為血液檢測人員減輕了工作量,并且在一定程度上提高了檢測質量和效率。該儀器設備行全血細胞檢測,主要是通過一個檢測部,一種染色技術,即半導體激光光學檢測部,流式細胞術聯合細胞化學熒光染色技術[2]。
采用SysmexXN1000血液細胞分析儀對標本進行檢測分析,由于儀器對不典型、較復雜的細胞形態識別范圍有一定的局限性,可能會出現檢測不到位,產生一定的誤判或者是漏判。針對此種情況,臨床實踐研究發現,原始細胞、單核細胞,還有大淋巴細胞在顆粒、染色質及體積等因素,對異型淋巴細胞均極有可能產生嚴重的干擾,最終影響檢測結果的準確性和可靠性[3-5]。結合本次實驗研究結果顯示:采用SysmexXN1000血細胞分析儀上的Atypical Ly報警與鏡檢對95例標本進行對比分析,結果顯示Atypical Ly提示檢出異型淋巴細胞的各項指標分別為:特異性39.26%,敏感性85.34%,陰性預測性為62.91%,陽性預測性為:68.92%。表明SysmexXN1000血細胞分析儀上的Atypical Ly報警提示檢測異型淋巴細胞具有一定的可靠性,其實驗結果若能結合手工推片和顯微鏡分析,便能最大限度提高異型淋巴細胞檢測的可靠性。同樣,采用SysmexXN1000血細胞分析儀上的Q-Flag報警提示的淋巴細胞與鏡檢對標本進行對比分析,結果顯示異型淋巴細胞高發區主要集中在101~200階段,鏡檢異型淋巴細胞高發區主要集中在201~300階段,其陽性率為75.58%,所以提示采用SysmexXN1000血細胞分析儀上的Q-Flag報警提示的201~300階段要仔細鏡檢,確保異型淋巴細胞檢測的可靠性。
目前,在臨床上廣泛應用各種全自動血液分析儀,不僅減輕了檢驗人員的工作量,而且減少了顯微鏡推片檢查工作,本次實驗以SysmexXN1000血細胞分析儀為重點研究對象,儀器檢測為檢驗人員提供多種參數指標和報警提示,以較高的檢測效率和質量,進一步加強了對異型淋巴細胞的認識。但是在檢測過程中,需要檢驗人員要熟悉掌握檢測方法,避免誤判或漏判[6]。另外,由于異型淋巴細胞通常是由病毒或藥物引起的應激反應,在顯微鏡下可以看到其細胞體積變大,細胞漿顏色變深,細胞核體積增大等,說明異型淋巴細胞與病毒感染有密切的關聯性,尤其是與EB病毒感染的關系更大。而現階段,臨床兒科廣泛應用異型淋巴細胞檢測來診斷小兒疾病,所以兒科醫生要對異型淋巴細胞的檢測多加以重視,必要情況下,將全自動血細胞分析儀上的報警提示與異型淋巴細胞形態相結合分析,提高全自動血細胞分析儀對外周血異型淋巴細胞報警提示的可靠性,為臨床疾病尤其是感染疾病的診斷提供較高的應用價值,便于及時為患者制定恰當的治療方案,提高治療效率,改善患者的生存質量[7-8]。
綜上,SysmexXN1000血細胞分析對外周血異型淋巴細胞報警提示的可靠性比較高,而Q-Flag報警提示在201~300階段檢出的異型淋巴細胞為臨床提供了較高的應用價值,非常值得普及和推廣。
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篇10
[關鍵詞] 血細胞分析儀;顯微鏡鏡檢;可行性
[中圖分類號] R446.1[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-7210(2010)04(a)-132-02
血細胞分析儀是臨床檢驗中最基礎也是最常用的儀器,隨著五分類全自動血細胞分析儀的普及,實驗室為臨床疾病的診斷、治療、預后提供了更多有價值的指標。高新儀器的使用一方面促進了醫學檢驗的發展,同時也給檢驗工作帶來新的問題,怎樣才能在確保檢驗質量的基礎上最大限度地發揮高新技術帶來的便捷需進一步探討。在常規工作中,首先遇到的是對血細胞分析儀檢測結果的復檢問題。對儀器的完全依賴極易造成漏診和誤診[1-2],全部鏡檢也不切合實際情況。為此,我科結合本科室的具體情況制訂了復檢標準,并對其臨床應用進行探討。
1 材料與方法
1.1 材料
1.1.1儀器:靜脈血檢測使用美國Beckman-Coulter公司的LH500五分類全自動血細胞分析儀;日本Olympus顯微鏡進行細胞鏡檢。
1.1.2 試劑:LH500使用的稀釋液、溶血劑、白細胞分類試劑均由Beckman-Coulter蘇州有限公司提供。采用美國BD公司提供的EDTA鉀鹽真空抗凝管采集靜脈血標本。
1.1.3 標本:2009年10~11月收集我院各科住院患者的靜脈血標本,共分析4 000例,采血后室溫保存,2 h內檢測完畢。
1.2方法
1.2.1 儀器檢測:LH500用公司配套校準物進行儀器校準,每天測定前做高、中、低三個水平的全血質控物,確認儀器處于正常工作狀態,進行標本檢測。
1.2.2 顯微鏡檢查標本經儀器分析后涂片,瑞-姬染液染色,由經驗豐富的形態室人員進行復片。
1.2.3 儀器結果異常的判斷標準,①結果異常:WBC>15×109/L或80%,淋巴細胞>60%,單核細胞>15%,嗜酸粒細胞>15%,嗜堿粒細胞>10%;③Hb
1.2.4 顯微鏡檢查異常的判斷標準,①白細胞:形態異常(分葉過多、中毒顆粒、空泡變性等)、異型淋巴細胞>5%,桿狀粒細胞>10%,存在幼稚細胞;②紅細胞:存在有核紅細胞,大小不一,染色異常,形態異常,分布異常;③血小板:血小板聚集,嚴重體積異常;④對儀器檢測白細胞、血小板數量的評估。
2結果
筆者對4 000例標本的儀器檢測結果和顯微鏡鏡檢結果進行以下幾個方面的分析:
2.1儀器檢測結果與顯微鏡鏡檢結果比較
儀器檢測結果完全正常2 232例,占55.8%;顯微鏡鏡檢結果異常970例,占24.2%。LH500對異常的血液標本檢出能力的有關預測值分別為,敏感度為99.9%,特異度為73.6%,陽性預測值為54.7%,陰性預測值為99.9%,準確度為79.9%。
2.2儀器檢測分組與顯微鏡鏡檢結果比較
將4 000例臨床標本分為四組:儀器結果正常、無Flags提示組,儀器結果輕度異常、無Flags提示組,儀器結果輕度異常、有Flags提示組,儀器結果明顯異常、有Flags提示組,四組結果與顯微鏡鏡檢結果比較見表1。
表1 儀器檢測分組與顯微鏡鏡檢結果比較
2.3儀器檢測警示分組與顯微鏡鏡檢結果比較
將儀器檢測的不同Flags提示分別與顯微鏡鏡查結果進行比較,結果見表2。
3 討論
美國Beckman-Coulter公司的LH500五分類全自動血細胞分析儀采用Coulter電阻抗原理和智能微數技術對血細胞進行計數,基于流體力學原理,使用鞘流技術使溶血后液體里剩余的白細胞單個通過光路,通過檢測器接受VCS(volume,細胞體積;conductivity,高頻傳導;scatter,激光散射)三種技術同時檢測的信號對白細胞進行分類,并可得到細胞散點圖和直方圖。
隨著這些原理更科學、操作更自動化及血細胞分析儀的推廣和普及,檢驗人員對儀器的檢測結果越來越信賴,從而忽視了顯微鏡檢查。LH500對異常的血液標本檢出能力的有關預測值分別為:敏感度為99.9%,特異度為73.6%,陽性預測值為54.7%,陰性預測值為99.9%,準確度為79.9%。從儀器檢測結果與顯微鏡檢測結果的比較中可以看到,一方面,五分類的血細胞分析儀對異常細胞形態的敏感度較高,漏檢率也符合國際血液學復檢專家組對復檢規則的要求;另一方面,儀器的特異性不高,復片率達到44.2%,大大消弱了高新儀器的便捷。這就需要我們制訂一個切實可行的復檢標準。
筆者通過對4 000例標本的儀器檢測結果、Flags提示與顯微鏡鏡檢結果比較發現,單一地依賴主要數據的異常或單一地依賴Flags提示都不能提高儀器的特異性。把兩者結合起來,根據數據的異常程度進行分組,在儀器結果正常、無Flags提示組中只有1例假陰性結果,顯微鏡檢查示分類原粒細胞為1%,為血液科初診患者,有發熱體征,后確診為AML-M1。在儀器結果輕度異常、無Flags提示組中,也只有1例假陰性,顯微鏡檢查示分類異型淋巴細胞為7%,為兒科患者,IM治療后。這兩組結果與鏡檢基本一致,2例假陰性也具有代表性,可以通過復檢標準的完善篩檢出來,這部分病例可以確定為不需要復片。在儀器結果輕度異常、有Flags提示組中,有350例(44.4%)假陽性結果,主要是白細胞分類異常和儀器報警提示,一方面,暴露了所有全自動血液分析儀在白細胞分類上的缺陷;另一方面,從表2的比較結果看出,這部分Flags警示多為Imm NE1/NE2、Blast、Verify Diff,集中在白細胞的分類上,提示我們復檢標準的不足之處,需要在今后的工作中積累更豐富的實驗數據和臨床經驗,制訂更科學的復檢標準。在實驗中還有很少部分數據為儀器結果正常、有Flags提示組,提示Dimorphic Reds、Platelet Clumps,初步證實與標本采集、環境溫度等因素有關,需要工作人員的臨床經驗,對復檢標準沒有影響,沒有納入實驗數據中。
通過實驗發現,不同檢測原理、不同檔次的儀器所對應的復檢標準是不一樣的,每個實驗室應該自行規定復檢的條件。筆者認為,高檔次的儀器,檢測原理科學,數據分析全面,報警靈敏度很高,復檢的標準可以放寬,更側重于儀器的異常警報提示。對于中、低檔次的儀器,應該嚴格按照制訂的復檢標準執行,對復檢的判斷更應該側重于對白細胞計數、白細胞分類、血紅蛋白、血小板計數等數據的分析。
4 體會
①儀器對細胞形態的識別能力,決定篩選標準的寬嚴程度;②在保證質量基礎上降低復檢率至
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