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1儀器與藥品

1.1儀器756紫外可見光分光光度計（上海分析儀器總廠）；真空干燥箱（天津市泰斯特儀器有限公司）；MP1100B型電子天平（上海精科天平廠）；分析天平（日本）。

1.2藥品無水葡萄糖（中國藥品生物制品檢定所）；硫酸（天津化學試劑有限公司）；苯酚（分析純）；無水乙醇（天津化學試劑有限公司）；三蒸水（實驗室自制）；防風藥材購自張家口、昌平、安國和圍場，經本院中醫系馬淑蘭教授鑒定；防風對照藥材購自中國藥品生物制品檢定所。

2方法

2.1防風多糖的提取精密稱取不同產地已粉碎、真空干燥的防風藥材450.0g，加入1000ml無水乙醇回流提取2h，以除去單糖及其它醇溶性成分，過濾，濾渣干燥，加入1000ml三蒸水回流提取2h，趁熱過濾，濾渣再加入1000ml三蒸水回流提取2h，合并兩次濾液，減壓濃縮，12000r/min離心20min，上清四倍體積無水乙醇沉淀靜置過夜，抽濾，沉淀物依次用無水乙醇、丙酮、石油醚洗滌，真空干燥即得防風多糖。

2.25.0%苯酚標準液的制備取苯酚100g，加鋁片0.1g和碳酸氫鈉0.05g，常壓蒸餾，收集180～182℃餾分稱取該餾分5g，置100ml容量瓶中，加三蒸水稀釋至刻度，搖勻后濾過至棕色試劑瓶中，得5%苯酚溶液，置4℃冰箱備用。

2.3葡萄糖標準液的制備精密稱取105℃真空干燥的葡萄糖標準品50mg，置50ml容量瓶中，加三蒸水定容至刻度，即得1.00mg/ml的葡萄糖標準液。

2.4樣品溶液的制備精密稱取不同產地已粉碎、真空干燥的防風藥材0.50g，加入100ml無水乙醇回流提取2h，過濾，濾渣干燥，加入100ml三蒸水回流提取2h，趁熱過濾，濾渣再加入100ml三蒸水回流提取2h，合并兩次濾液，減壓濃縮，12000r/min離心20min，上清四倍體積無水乙醇沉淀靜置過夜，抽濾，沉淀物依次用無水乙醇、丙酮、石油醚洗滌，真空干燥后在100ml量瓶中以蒸餾水定容，作為樣品溶液。

2.5標準曲線的繪制精確移取葡萄糖標準液10，15，20，25，30，35μl，分別加入990，985，980，975，970，965μl三蒸水，加入5%苯酚溶液500μl，迅速加入濃硫酸2.5ml，靜置20min，以試劑空白為參比，在490nm波長下測D值，得回歸方程：A=0.061C-0.000，r=0.997。

2.6換算因素測定精密稱取真空干燥至恒重的防風多糖10mg，置于250ml容量瓶，用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻，作貯備液。精密吸取貯備液0.3ml按“2.5”項下的方法測定吸光度。另精取葡萄糖標準液0.3ml同法操作，求出防風多糖中的葡萄糖含量。按下式計算換算因素f結果。f=2.47（f=多糖含量/多糖溶液中的葡萄糖含量×稀釋倍數）。

2.7精密度實驗取同一樣品溶液，重復測定吸光度6次，RSD為1.06%。結果表明精密度良好。

2.8重現性實驗取同一批樣品溶液6份，平行測定吸光度，RSD為1.43%，表明重現性良好。

2.9穩定性實驗取樣品溶液，照樣品測定方法操作，每隔1h測定吸光度值，連續8h，結果吸光度基本無變化，表明樣品在8h內穩定性良好。

2.10加樣回收率實驗分別精密吸取對照品溶液10，15，20，25，30μl，各加入樣品溶液10μl，按照樣品測定方法測定吸光度，代入回歸方程計算，結果平均回收率為98.65%。RSD=1.47%。

2.11樣品含量測定精取防風多糖樣品液1.5ml按“2.5”項下操作，測定吸光度，按下列公式計算樣品中的多糖含量，重復5次，取平均值。

多糖含量（%）=C×D×f×V/W×100%

C：供試品中葡萄糖濃度(μg/ml)；D：供試品的稀釋因素；f：換算因素；V：供試品體積（ml）；W：供試品的重量（μg）。

3結果

不同產地的防風藥材按“2.4”項下制備樣品溶液，按“2.11”項下測定含量。結果見表1。表1不同產地防風中多糖的含量

4討論

不同產地防風藥材中均含有多糖，對照藥材防風多糖含量為2.61%，安國的防風多糖含量最高為2.53%，圍場的防風多糖含量最少為1.57%，可能與藥材的產地、采摘時間有關。

研究表明中藥多糖具有免疫調節、抗腫瘤、抗炎、抗病毒、抗氧化、抗輻射、降血糖、降血脂、保肝等多種功能［6～9］，其中中藥多糖的免疫調節活性及抗腫瘤作用備受關注，是中藥多糖研究的中心課題。本實驗用苯酚-硫酸法測定了防風中的多糖含量，為防風的進一步開發利用奠定了基礎。

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【摘要】目的比較不同產地防風多糖的含量。方法利用苯酚-硫酸法測定防風多糖的含量。結果安國的防風多糖含量最高為2.53%，圍場的防風多糖含量最低為1.57%。結論不同產地防風藥材中多糖的含量不同，可能與產地、采摘時間有關，此可供防風的進一步開發利用參考。

【關鍵詞】防風；多糖；苯酚-硫酸顯色法