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【摘要】目的研究天參益智膠囊對D-半乳糖所致衰老小鼠學習記憶的影響，探討其抗衰老的作用及機理。方法采用Morris水迷宮進行行為學測試，以GSH-Px，SOD，AChE，ChAT，MDA為指標，觀察其對衰老小鼠學習記憶的影響。結果不同劑量的天參益智膠囊均能提高小鼠學習記憶成績，使小鼠血清中GSH-Px，SOD及ChAT活性升高，AChE活性及MDA含量降低。結論天參益智膠囊對D-半乳糖所致衰老小鼠的學習記憶能力下降有明顯保護作用，其作用機制可能與其抗氧化和抑制乙酰膽堿酯酶作用密切相關。

【關鍵詞】天參益智膠囊D-半乳糖學習記憶衰老

天參益智膠囊是在中醫抗衰老經驗方的基礎上研制而成，該復方由天麻、人參等藥材組成，具有補氣健腦、扶正固本、開竅益智等功能。

本論文旨在探討該復方對抗衰老、改善記憶的作用機制，選用了D-半乳糖衰老動物模型，采用Morris水迷宮實驗進行行為學測試，檢測體內相關指標以驗證其療效并闡明其可能的作用機制。

一、材料與儀器

1.1動物昆明種小鼠，雌、雄各半，體重（22±2）g，由貴陽醫學院實驗動物中心提供，合格證號：SCXK（黔）2004-0001。普通飼料飼養，清潔級，光照時間12/12，室溫22～23℃。

1.2儀器Morris水迷宮；BI2000圖像分析系統(成都泰盟公司產品)。

1.3藥品與試劑天參益智膠囊（由貴陽醫學院藥學院分析化學教研室提供）；D-半乳糖（美國Amresco公司）；健腦膠囊（青島國風藥業股份有限公司）。

二、方法

2.1動物分組、造模方法及給藥方案昆明種小鼠（雌、雄各半）進行Morris水迷宮實驗，直到定向航行實驗成績穩定為止（連續兩天成績差異無顯著性）。將經Morris水迷宮篩選合格的84只小鼠隨機分為6組(n=14)，分別為正常對照組（NS14ml?kg-1）、模型組（NS14ml?kg-1）、復方高、中、低（天參益智膠囊1.52，0.61，0.30g?kg-1）劑量組及陽性對照組（健腦膠囊，0.03g?kg-1）。除正常對照組外，其余各組均采用皮下注射5％D-半乳糖溶液0.5ml?kg-1造模，然后連續灌胃給藥45d。

2.2Morris水迷宮行為測試水迷宮由圓形水池、安全島和記錄系統3部分組成。水池直徑130cm，高60cm，水池內壁涂成乳白色。池中水深30cm，水溫保持在(24±2)℃，用奶粉使池水渾濁。池壁標記4個入水點，將水池分為四個均等的象限，池壁上固定位置貼有一幅畫作為參照物。安全島置于第1象限中點，直徑10cm，高28cm，距水面2cm。記錄系統為成都泰盟公司提供的BI2000系統的行為學檢測模塊。從第39天開始進行定位航行實驗，連續測試5d。將小鼠從安全島之外的3個象限任一入水點面向池壁放入置有安全島的水池中，經BI2000圖像處理系統自動記錄小鼠在120s內找到安全島的時間（逃避潛伏期）和游泳路徑（搜索距離），并讓小鼠在島上停留10s。超過120s找不到安全島的記為120s，并引導小鼠上安全島。定位航行實驗結束后，間隔1天，拆除安全島，將小鼠從同一入水點放入池中，記錄小鼠在120s內尋找安全島過程中在原安全島所在象限內的搜索時間（空間探索時間）及探索距離。

2.3生化指標測定行為學測試結束后，小鼠眼眶采血，分離血清，測定小鼠血清中GSH-Px，SOD，AChE，ChAT活性及MDA含量。

2.4統計學處理數據處理采用±s表示，組間均數比較采用方差分析和t檢驗。

三、結果

3.1對D-半乳糖所致衰老小鼠學習記憶能力的影響對比模型組和給藥組小鼠空間探索實驗成績，顯示小鼠給藥后學習記憶水平提高，探索時間縮短、探索距離減小，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05或P<0.01），提示天參益智膠囊對衰老小鼠的學習記憶能力有明顯的改善作用。結果見表1。表1小鼠空間探索實驗結果（略）與正常對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01；n=14

3.2對D-半乳糖所致衰老小鼠血清中GSH-Px和SOD活性及MDA含量的影響模型組小鼠血清中GSH-Px和SOD活性降低，MDA含量升高，與正常對照組有顯著性差異（P<0.05或P<0.01）。灌胃給藥后小鼠血清中GSH-Px和SOD活性升高，MDA含量降低，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05或P<0.01），提示天參益智膠囊具有較明顯的抗氧化和減弱自由基損傷的作用。結果見表2。表2對D-半乳糖所致衰老小鼠血清中GSH-PX和SO（略）與正常對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01；n=14

3.3對D-半乳糖所致衰老小鼠血清中AChE和ChAT活性的影響模型組小鼠血清中ChAT活性降低，AChE活性升高，與正常對照組有顯著性差異（P<0.05或P<0.01）。灌胃給藥后小鼠血清中ChAT活性升高，AChE活性降低，與模型組比較有顯著性差異（P<0.05或P<0.01），提示天參益智膠囊具有一定的抑制乙酰膽堿脂酶活性。結果見表3。表3對D-半乳糖所致衰老小鼠血清中AChE和ChAT活性的影響（略）與正常對照組比較，*P<0.05，**P<0.01；與模型組比較，△P<0.05，△△P<0.01；n=14

四、討論

本實驗用Morris水迷宮觀察了天參益智膠囊對D-半乳糖所致衰老小鼠學習記憶的影響。結果表明，天參益智膠囊明顯改善了該模型小鼠的學習記憶能力，表現為明顯縮短了空間探索實驗中小鼠的探索時間和探索距離。

GSH-Px和SOD是體內重要的抗氧化酶類，在機體抗氧化損傷中起著重要作用。MDA是體內自由基對不飽和脂肪酸引發的脂質過氧化反應的最終分解產物，其含量的多少可以反映體內自由基的多少及其反應強度。MDA含量的增加可能是體內自由基生成異常或機體抗氧化保護系統的抗氧化能力減弱。天參益智膠囊明顯提升了D-半乳糖所致衰老小鼠血中這兩種酶的活性，同時降低了該模型小鼠血中MDA的含量，說明其具有較明顯的抗氧化活性。wWw.gWyoO

中樞膽堿能系統與學習記憶功能密切相關。本研究顯示天參益智膠囊能顯著提高D-半乳糖所致衰老小鼠血中ChAT活性，抑制AChE活性，提示天參益智膠囊改善中樞膽堿能系統功能是其增強模型小鼠學習記憶能力的基礎。

以上實驗結果提示天參益智膠囊抗衰老的作用機制與其抗氧化作用和乙酰膽堿酯酶抑制活性有關。

【參考文獻】

［1］陳奇.中藥藥理研究方法學［M］.北京:人民衛生出版社,2004:33.

［2］MorrisRG,GarrudP,RawlinstJN,etal.Placenavigationimpairedinratswithhippocampallesions［J］.Nature,1982,297(5868):681.