陽性污染現(xiàn)象分析論文
時(shí)間:2022-06-16 02:50:00
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【關(guān)鍵詞】全自動(dòng)
全自動(dòng)樣品處理儀已經(jīng)在各大血站廣泛應(yīng)用,筆者在應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)梅毒實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)強(qiáng)陽性標(biāo)本污染后排孔現(xiàn)象,而手工復(fù)查后排孔標(biāo)本的試管和小辮均為陰性,現(xiàn)報(bào)告如下。
1材料與方法
1.1標(biāo)本來源
均為無償獻(xiàn)血者的血清標(biāo)本。
1.2試劑
梅毒試劑為上海科華生物工程有限公司和北京華大吉比愛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。
1.3儀器TECANRSP加樣器。
1.4方法
嚴(yán)格按照試劑說明書要求編輯加樣程序,RSP加樣儀自動(dòng)形成各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的前后加樣順序,不可人工改動(dòng),每板檢測88份標(biāo)本。初檢加樣順序?yàn)镠BsAg、抗-HCV、ALT、抗-HIV、TP(上海科華ELISA),復(fù)檢加樣順序?yàn)榭?HIV、抗-HCV、HBsAg、TP(北京吉比愛ELISA)、ALT,八根加樣針先吸入第一排足量標(biāo)本血清,依次加入五項(xiàng)實(shí)驗(yàn)酶標(biāo)板中,加樣針內(nèi)外沖洗兩遍后,再加第二排標(biāo)本,依次類推。加完樣品后,酶標(biāo)板放入FAME全自動(dòng)分析系統(tǒng)進(jìn)行檢測。出現(xiàn)陽性后,對陽性標(biāo)本再用手工復(fù)查小辮和試管。
收集出院污染23份標(biāo)本,共10組,把這些標(biāo)本按組混入正常標(biāo)本中組成一板88份,每組內(nèi)各標(biāo)本在酶標(biāo)板中的前后順序不變,用TECANRSP加樣器每次只加一項(xiàng)梅毒實(shí)驗(yàn),分別做科華TP和吉比愛TP實(shí)驗(yàn)。
2結(jié)果
2.110組出現(xiàn)陽性污染現(xiàn)象標(biāo)本的位置號(hào)及OD值
見表1。從表1中可看出,每組標(biāo)本都是兩個(gè)或三個(gè)陽性前后相鄰,而且大部分是前排陽性標(biāo)本OD值要強(qiáng)于后面的,手工復(fù)查試管和小辮,位置在前的陽性標(biāo)本均為陽性,位置在后的標(biāo)本試管和小辮均為陰性。表110組出現(xiàn)陽性污染現(xiàn)象標(biāo)本的位置號(hào)及OD值(略)
2.210組污染標(biāo)本的試管結(jié)果
把10組出現(xiàn)污染的標(biāo)本按每組原來各標(biāo)本的先后順序排列,放在一塊酶標(biāo)板中做梅毒實(shí)驗(yàn),用RSP加樣儀單獨(dú)只加一項(xiàng)梅毒實(shí)驗(yàn)酶標(biāo)板,其位置號(hào)及結(jié)果見表2。從表中可看出,每組中第一個(gè)標(biāo)本仍為陽性,第二個(gè)標(biāo)本為陰性。表210組污染標(biāo)本的試管結(jié)果(略)
3討論
在四項(xiàng)常規(guī)實(shí)驗(yàn)中僅有梅毒實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)前排孔陽性污染后排孔現(xiàn)象,而敏感度較高的HBsAg實(shí)驗(yàn)很少出現(xiàn)這種情況,而且新儀器出現(xiàn)污染現(xiàn)象的次數(shù)少,當(dāng)儀器使用時(shí)間長后出現(xiàn)的次數(shù)逐漸增多。由于加樣儀設(shè)有系統(tǒng)氣隙[1],可排除通過蒸餾水污染的情況。我們分析原因發(fā)現(xiàn)這與加樣針保護(hù)膜被腐蝕有關(guān)。RSP全自動(dòng)加樣儀采用的是永久性金屬加樣器,儀器自動(dòng)沖洗,針可長期使用,但儀器保養(yǎng)要求定期酸洗,使用時(shí)間久了會(huì)對加樣針表面的保護(hù)膜造成腐蝕,導(dǎo)致加樣針內(nèi)壁不光滑。當(dāng)遇到標(biāo)本抗凝不好時(shí),血漿中的纖維蛋白就會(huì)黏附在加樣針內(nèi)壁,不易沖洗干凈,當(dāng)加樣針吸完陽性標(biāo)本后再吸第二個(gè)標(biāo)本,由于梅毒實(shí)驗(yàn)在加樣順序中被排在最后一個(gè)或倒數(shù)第二個(gè),血清在加樣針中停留的時(shí)間和在下降過程中經(jīng)過的加樣針長度相對其他三項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)都要長,因此被污染的機(jī)會(huì)就要大。當(dāng)單獨(dú)只加一塊梅毒實(shí)驗(yàn)板時(shí),沒有出現(xiàn)污染情況,證明了這一點(diǎn)。由此可見污染現(xiàn)象與實(shí)驗(yàn)在加樣程序中的先后順序有關(guān)。在剛發(fā)現(xiàn)污染現(xiàn)象時(shí),我們加大了酸洗的次數(shù)和浸泡時(shí)間,發(fā)現(xiàn)污染的次數(shù)反而有所增加,分析原因,可能為酸對已被破壞的保護(hù)膜腐蝕加重,從而導(dǎo)致污染現(xiàn)象的加重。通過長期的工作,我們認(rèn)為各單位應(yīng)根據(jù)自己的工作量定期更換RSP加樣儀的加樣針,酸洗時(shí)酸的濃度不能太大,每周酸洗一次即可。
【參考文獻(xiàn)】
1劉玉振,方建華,溫濤,等.用RSP全自動(dòng)加樣器加高粘稠度稀釋液參數(shù)的優(yōu)選.中國輸血雜志,2004,17(1):24.
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