導語：香附總黃酮超聲波提取探究論文一文來源于網友上傳，不代表本站觀點，若需要原創文章可咨詢客服老師，歡迎參考。

1儀器與試劑

1.1儀器KQ5200DB型數控超聲波清洗器（超聲工作頻率40kHz,江蘇省昆山市超聲儀器有限公司）；UV-755B紫外可見分光光度計（上海分析儀器總廠）；ZF-I型三用紫外分析儀(上海顧村光電儀器廠)；SHB-III循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）。

1.2試劑95%乙醇；亞硝酸鈉AR；硝酸鋁AR；氫氧化鈉AR；三氯化鋁AR；鹽酸AR；氨水AR；冰醋酸AR；醋酸乙酯AR；乙酸鎂AR；鎂粉AR；正丁醇AR；蘆丁標準品（中國藥品生物制品檢定所）；新鮮香附（采于廣西百色市）。

2方法與結果

2.1總黃酮成分提取取新鮮香附，烘干，粉碎。稱取香附粉末約6g，加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾。濾渣再加80ml95%乙醇，超聲波提取2.5h，抽濾，合并兩次濾液，減壓回收乙醇至濾液僅剩25ml左右為止，放置250ml容量瓶中，用60%乙醇稀釋至刻度，得樣品液。

2.2測定方法依據以蘆丁為對照品測定香附中總黃酮的含量，加入鋁離子試劑，同時控制適宜pH值，使黃酮化合物與鋁鹽形成絡合物，在可見光區能獲得穩定的特征吸收峰。

2.3定量實驗-總黃酮的含量測定

2.3.1波長的選擇取樣品液適量，在0.30ml5%亞硝酸鈉溶液存在的堿性條件下，經硝酸鋁顯色后，以試劑為空白參比液在420～700nm波長范圍測定絡合物的吸光度，絡合物于510nm波長處有最大吸收，故測定時選用此波長。

2.3.2標準曲線的繪制分別精密吸取蘆丁對照液（0.10mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00ml于10.00ml容量瓶中，分別加入5%亞硝酸鈉溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加10%硝酸鋁溶液0.30ml，搖勻，靜置6min；再加4%氫氧化鈉溶液4.00ml，用60%乙醇稀釋至刻度，搖勻，靜置12min，以試劑作空白參比液，于510nm處測吸光度。結果見表1。

表1分光光度法測定蘆丁對照液吸光度結果（略）

根據上表得回歸方程：A=-0.0311+13.5184C，r=0.9999。

2.3.3提取物含量的測定精密吸取樣品液0.50ml，置10ml容量瓶，按標準曲線的制備方法測定吸光度A=0.0949，根據回歸方程：A=-0.0311+13.5184C，計算樣品中總黃酮的含量C=0.1864mg/ml。

2.3.4回收率實驗精密量取樣品液2.00ml，加入標準蘆丁對照品2.00ml（0.10mg/ml），同前樣品測定方法操作測定吸光度，求出回收率為102.7%。

2.4定性實驗-總黃酮的鑒別

2.4.1顏色反應

紫外光下呈色反應：取該樣品溶液點在濾紙上，在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈灰褐色并有熒光斑點。

濃氨水反應：取該樣品溶液點在濾紙上，將濾紙在氨水上方熏0.5min，立即在紫外光下觀察，呈極明顯的黃褐色熒光斑點。

三氯化鋁反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加1％三氯化鋁乙醇溶液，吹干。在可見光下呈灰黃色，在紫外光下呈黃色熒光斑點。

乙酸鎂反應：取樣品溶液點在濾紙上，滴加1%乙酸鎂甲醇溶液，吹干，紫外光下呈黃色斑點。

鹽酸-鎂粉反應：取乙醇提取液1ml于試管中加鎂粉，再加入濃鹽酸數滴（1次加入），在泡沫處呈紫紅色。

2.4.2紙層析取樣品溶液10μl點在濾紙上。用正丁醇∶醋酸∶水=4∶1∶5體積比為展開劑，上行展開5h，取出晾干。噴1%氯化鋁乙醇溶液。吹干后于紫外光下，可見熒光斑點。

3討論

實驗結果表明，本實驗方法工藝簡單，回收率為102.7%。利用本文所提供的超聲波提取、純化方法而得到的黃酮類物質其純度較高。超聲波可以強化乙醇浸提法，達到省時、高效、節能的目的。此方法采用全物理過程，無任何污染，是一條理想的提取黃酮類物質的途徑，具有廣闊的應用前景。

黃酮類化合物是一大類天然產物，廣泛存在于植物界，是許多中草藥的有效成分，具有很高的藥用價值。在自然界中最常見的是黃酮和黃酮醇，其它包括雙氫黃（醇）、異黃酮、雙黃酮、黃烷醇、查爾酮、橙酮、花色苷及新黃酮類等［5］。天然來源的生物黃酮分子量小，能被人體迅速吸收，能通過血腦屏障，能進入脂肪組織，進而體現出如下功能：消除疲勞、保護血管、防動脈硬化、擴張毛細血管、疏通微循環、抗脂肪氧化、抗衰老、活化大腦及其他臟器細胞的功能。

黃酮類化合物具有抗癌、抗腫瘤、抗心腦血管疾病、抗炎鎮痛、免疫調節、降血糖、治療骨質疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗輻射等作用［8，9］。近年來，世界上掀起了植物藥開發的熱潮，植物藥以其天然低毒的特點倍受青睞，而黃酮類化合物以其廣譜的藥理作用引人矚目，香附分布廣泛。本實驗結果表明，香附中含有較為豐富的黃酮。因此，香附具有廣泛的開發和利用價值，值得綜合利用，加強資源開發。

【參考文獻】

［1］黃險峰，彭國平.香附的化學成分及藥理研究進展［J］.中藥材，2003，26(1):65.

［2］謝英俊，魯振坤．庫存薄弱需求強勁香附價將上升［J］.全國藥材商情，2005，(10):5.

［3］徐才華，符仙宇．行氣止痛話香附［J］.浙江中醫雜志，2002，37(6):258.

［4］趙峻．常用中藥識別與應用手冊，第2版［M］.青島：青島出版社，2004，10:114.

［5］夏杏洲，張輝，魏傳晚.榕樹葉中黃酮類化合物的提取條件研究［J］.食品研究與開發，2002，23(5):35.

【摘要】目的探討香附總黃酮的提取及鑒別方法，以充分利用香附植物資源，避免資源的浪費。方法采用超聲波乙醇浸提法從香附中提取黃酮類物質，對所提取的黃酮類物質進行驗證，并用分光光度法測定含量。結果測得樣品中總黃酮的含量C=0.1864mg/ml，回收率為102.7%，其純度和產率均較高。結論該方法采用全物理過程，無任何污染，是提取香附黃酮類物質的有效途徑。

【關鍵詞】超聲波提取香附總黃酮鑒別