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1材料與儀器

1.1試藥腸胃康顆粒劑（海口市制藥廠生產，批號060709，規格：每袋袋裝8g）；牛耳楓與辣蓼提取物(NLWE)（黑色粉末，自制，每克樣品相當于原生藥10.0g）；阿司匹林腸溶片（昆明云健制藥有限公司生產，批號20060320，規格25mg）；硫酸阿托品注射液（天津藥業集團新鄭股份有限公司生產，批號0601181，規格：2ml∶1mg）；伊文思藍（中國醫藥集團上海試劑公司生產，批號20030714，規格1.0g）；乙酰膽堿（Ach）（上海三愛思試劑有限公司生產，批號20030620，規格：1）；氯化鋇（BaCl2）（廣州化學試劑廠生產，批號040503-2，規格500g）。

1.2動物昆明種小鼠，體重18~22g，合格證號2006A070；Wistar大鼠，體重180~220g，合格證號2006A07；豚鼠，體重250~300g，合格證號2006A067。以上動物均由中山大學實驗動物中心提供。適應環境一周，自由飲水進食。

1.3儀器YLS-6B智能熱板儀（山東省醫學科學院設備站）；BL-420E生物機能實驗系統（成都泰盟科技有限公司）；ZH-Z型離體器官測量系統（安徽省淮北正華生物儀器設備有限公司）；UV22401PC紫外分光光度計(日本島津)；分析電子天平（北京瑞利，精度0.1mg）。

1.4統計學方法本實驗數據結果均以±s表示,劑量資料比較，采用t檢驗，統計軟件為SPSS13.0。

2方法及結果［1，2］

2.1對醋酸致小鼠毛細血管通透性增加的影響實驗方法：取50只昆明種小鼠，體重18~20g，雌雄各半，隨機分為5組(n=10)，正常對照組：灌胃(ig)給予等容生理鹽水；腸胃康顆粒陽性對照組10.0g·kg-1ig；阿司匹林陽性對照組0.2g·kg-1ig；牛耳楓與辣蓼提取物劑量為生藥20.0和10.0g·kg-1ig高、低劑量組（以下簡稱提取物高、低劑量組）。各組動物按0.5ml/20g體重給藥，每天分別給藥1次,連續給藥3d，末次給藥后0.5h，各鼠尾靜脈注射0.5%伊文思蘭鹽水溶液0.1ml/10g隨即腹腔注射醋酸溶液0.2ml/只，20min后處死動物，輕揉腹部1min吸取4ml沖洗液，于3000r/min離心10min，取上清液于610nm處比色測定吸光度，記錄A值，計算抑制率，進行組間比較。結果見表1。

抑制率(%)=(對照組A-給藥組A)/對照組A×100%

結果表明：牛耳楓與辣蓼提取物高劑量、提取物低劑量組、阿司匹林組均對醋酸誘導的小鼠腹腔毛細血管通透性增高有顯著抑制作用（P<0.01），腸胃康顆粒組對醋酸誘導的小鼠腹腔毛細血管通透性增高無抑制作用。

表1腸胃康顆粒及提取物對小鼠腹腔毛細血管通透性的影響（略）

與正常對照組比較,△P<0.01,△△P>0.05；n=10

2.2對熱板所致小鼠疼痛的影響［3］實驗方法：篩選痛閾值為5~30s之間的雌性昆明小鼠75只，體重18~20g，隨機分成5組（n=15），正常對照組，腸胃康顆粒陽性對照組，阿司匹林陽性對照組，牛耳楓與辣蓼提取物劑量高、低劑量組。各組動物給藥方法，給藥途徑及劑量均同“2.1”項，每天分別給藥1次，連續給藥3d后，末次給藥后15，30，60，90，120min用熱板法測量痛閾值。結果見表2。

表2腸胃康顆粒及提取物對熱板法所致小鼠疼痛的影響（略）

與自身藥前痛閾比較,**P<0.01,*P>0.05

結果表明，正常對照組實驗過程中無變化，阿司匹林組90minP<0.05，均值大于自身給藥前痛閾值；而其他組，P>0.05或P<0.05但其平均痛閾值均小于自身給藥前痛閾值。結果顯示，除阿司匹林外，其他組受試藥均無鎮痛作用。

2.3對離體豚鼠回腸平滑肌的影響［4，5］取豚鼠，按常規法制備離體回腸標本，標本置于18ml盛有臺氏液的浴槽中，通氧，(38.0±0.5)℃恒溫，張力負荷1g，用記錄儀描記運動曲線，平衡30min，穩定后加入0.1ml0.1%Ach，記錄收縮高度；隨后用臺氏液清洗回腸及浴槽兩次，5min后注入0.5ml10%牛耳楓與辣蓼提取物高劑量溶液，30s后，再注入0.1%0.1mlAch，記錄反應高度，用臺氏液清洗浴槽兩次，更換回腸，按照以上方法進行多次實驗，記錄數據作為一組數據值。隨后將牛耳楓與辣蓼提取物低劑量溶液0.5ml組、26%腸胃康顆粒溶液0.5ml組及0.05%阿托品0.05ml組，按以上實驗同法操作。對0.6ml1%BaCl2組所致豚鼠回腸收縮的影響，亦按上述方法進行實驗操作，記錄實驗結果，進行組間比較，計算抑制率。結果見表3~4。

抑制率（%）=（給藥前收縮幅度-給藥后收縮幅度）/給藥前收縮幅度×100%

表3腸胃康顆粒及提取物對豚鼠回腸平滑肌的作用（略）

與BaCl2比較,*P<0.001;與提取物高劑量組比較,#P>0.05；n=10

表4腸胃康顆粒及提取物對豚鼠回腸平滑肌的作用（略）

與Ach比較,#P>0.05,*P<0.001；n=10

結果表明：腸胃康顆粒、提取物高劑量、提取物低劑量皆對BaCl2引起的腸痙攣有明顯的解痙作用（P<0.001），提取物高劑量組、提取物低劑量組作用結果無明顯差別（P>0.05），顆粒組亦無明顯差別，對乙酰膽堿引起的腸痙攣均無解痙作用。

2.4對乙醇致胃粘膜損傷的作用［6，7］取40只Wistar大鼠隨機分為4組(n=10)，雌雄各半,正常對照組，灌胃(ig)給予等容生理鹽水；腸胃康顆粒陽性對照組10.0g·kg-1ig；牛耳楓與辣蓼提取物劑量為生藥5.0g和10.0g·kg-1ig劑量組。各組動物按2ml/200g體重給藥，每天分別給藥1次，連續給藥3d，禁食48h，最后1次給藥后1h灌胃95%乙醇1ml，正常飲水，1h后處死大鼠，結扎賁門和幽門，取出注入5ml生理鹽水，于10%甲醛溶液中固定10min，沿胃大彎剪開沖洗觀察結果。計算腺胃部出現潰瘍點的數目及測量潰瘍長度，依據GUTH法計算胃黏膜損傷指數，(每個出血點計1分，糜爛計2分，潰瘍長度小于1mm計3分，大于1mm小于2mm計4分，長度在2mm以上計5分)將計分相加即為該只動物的潰瘍指數，比較組間差異并計算出潰瘍抑制率。結果見表5。

抑制率（%）=（空白對照組潰瘍指數-藥物治療組潰瘍指數）空白對照組潰瘍指數×100%

表5腸胃康顆粒及提取物抗乙醇引起胃粘膜損傷的作用（略）

與正常對照組比較，*P<0.05；與提取物高劑量組比較，#P>0.05；與腸胃康顆粒組比較，△P<0.05；n=10

結果表明，各組與空白組比較均有效（P<0.05），但腸胃康顆粒組效果最好。而且提取物高低劑量組作用結果無明顯差別（P>0.05），與腸胃康顆粒比較差別較大（P<0.05）。

3討論

本實驗結果表明，牛耳楓與辣蓼提取物具有降低毛細血管通透性、解痙及抗乙醇引起的胃粘膜損傷作用，但無鎮痛作用，可用于急性胃腸炎的治療。

Ach是膽堿受體激動劑，激動胃腸道平滑肌上的M膽堿受體，可引起平滑肌收縮。阿托品是膽堿受體阻斷藥，通過阻斷M受體而拮抗Ach對平滑肌的收縮作用。離體豚鼠回腸實驗結果顯示，NLWE對Ach引起的腸痙攣則無解痙作用，提示其無阻斷M受體的作用。Ca2+在介導平滑肌收縮反應中起核心作用，平滑肌收縮通過興奮-收縮偶聯過程而實現［8］。BaCl2是通過釋放細胞內的Ca2+而引起腸管平滑肌痙攣［9］。NLWE對BaCl2引起的腸痙攣有明顯的解痙作用，提示其具有鈣拮抗作用。因此，可以推測NLWE是通過拮抗Ca2+而不是通過阻斷M膽堿受體來起到解痙作用的。

【參考文獻】

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【摘要】目的研究牛耳楓與辣蓼提取物的抗急性胃腸炎的作用。方法采用冰醋酸致小鼠毛細血管通透性法、熱板法、豚鼠回腸平滑肌運動法和95%乙醇致大鼠胃潰瘍法來觀察提取物的抗炎、鎮痛、解痙和抗胃潰瘍作用。結果牛耳楓與辣蓼提取物對醋酸誘導的小鼠腹腔毛細血管通透性增高有顯著抑制作用（P<0.01），而無鎮痛作用，對BaCl2引起的腸痙攣有明顯的解痙作用（P<0.001），對乙酰膽堿引起的腸痙攣無解痙作用，同時具有減小95%乙醇對大鼠胃粘膜損傷的作用。結論牛耳楓與辣蓼提取物具有很好的抗炎、解痙及抗乙醇引起的胃粘膜損傷作用，對胃腸道有很好的保護作用。

【關鍵詞】牛耳楓辣蓼提取物抗炎鎮痛解痙