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1材料和方法

1.1材料雄性SpraqueDawley（SD）大鼠104只，體質(zhì)量250～300g，購自西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心.實(shí)驗(yàn)動物實(shí)驗(yàn)前禁食12h，自由進(jìn)水.海風(fēng)藤酮（共150mg）購自北京大學(xué)藥學(xué)院，牛磺膽酸鈉購自Sigma公司，髓過氧化物酶（MPO）測定試劑盒購自南京建成生物公司，PAF標(biāo)準(zhǔn)品購自Sigma公司，大鼠IL6ELISA試劑盒購自Sigma公司，大鼠TNFαELISA試劑盒購自Sigma公司.

1.2方法采用隨機(jī)數(shù)字把104只大鼠分為3組，分別為假手術(shù)對照組(n=24)，急性胰腺炎（AP）組(n=40)，海風(fēng)藤酮治療組(n=40)，每組又按術(shù)后3，6，12，24h平均分為4個小組.第1組大鼠術(shù)前12h禁飲食，氯胺酮ip麻醉（1.5mL/kg），仰臥固定，剪毛后常規(guī)消毒、鋪巾，腹正中開腹，輕微刺激胰膽管后，關(guān)腹；第2組采用張群華等［3］的方法制備AP模型；第3組制模術(shù)后立即經(jīng)陰莖靜脈注入海風(fēng)藤酮，每6h，10mg/kg，1～2次.由于海風(fēng)藤酮均以DMSO(25g/L)為溶劑，故假手術(shù)組及AP模型組均于術(shù)后經(jīng)陰莖靜脈注射等量的DMSO.3組大鼠分別在術(shù)后3，6，12，24h，氯胺酮ip麻醉（1.5mL/kg），仰臥固定，剪毛常規(guī)消毒、鋪巾，開腹.經(jīng)下腔靜脈抽血4～8mL，不加抗凝劑，凝血后離心（3000r/min，18℃，10min），取血清1.5～3mL(-80℃)保存，留待進(jìn)行生物法檢測血小板活化因子、ELISA檢測TNFα及IL6及全自動生化儀檢測血清淀粉酶.同步取胰腺組織和肺組織，部分制成組織勻漿，測定髓過氧化物酶（MPO）的活性，部分用Bouin液固定，石蠟包埋、切片，HE染色，光鏡下觀察胰腺及肺的炎癥病理變化.

統(tǒng)計學(xué)處理：采用SPSS12.0forWindows軟件包進(jìn)行統(tǒng)計分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x±s表示；組間比較用非參數(shù)秩和檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義.

2結(jié)果

2.1血清淀粉酶活性AP組血清淀粉酶顯著升高，到12h時達(dá)高峰，與假手術(shù)組相比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01）；治療組與AP組各時相段比較可降低血清淀粉酶，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），但仍高于假手術(shù)組各時相段（P＜0.05，表1）.

表1AP大鼠血清淀粉酶濃度的變化（略）

aP<0.05,bP<0.01vsAP.

2.2胰肺組織MPO活性采用單因素方差分析：假手術(shù)組各時相段胰腺及肺組織MPO活性相比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）；注射35g/L牛磺膽酸后，AP組、治療組胰腺及肺組織MPO活性顯著升高，到12h時達(dá)高峰，與假手術(shù)組相比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01）；給藥后3，6，12及24h時，海風(fēng)藤酮治療組與AP組組間比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05或0.01）.說明海風(fēng)藤酮可顯著降低胰腺及肺組織MPO活性（表2）.

表2AP大鼠胰腺及肺組織MPO活性的變化（略）

aP<0.05vsAP.

2.3血清PAF，TNFα，IL6AP組各時段血清PAF，TNFα，IL6升高，其中PAF持續(xù)升高，TNFα在6h時達(dá)高峰，而IL6在12h達(dá)高峰，與假手術(shù)組各個時相段比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01）；用藥后治療組與AP組比較各個時相段可降低血清PAF，TNFα，IL6的水平（P＜0.05，表3）.

表3血清中PAF,TNFα,IL6的變化（略）

aP<0.05vsAP.

2.4胰肺病理組織學(xué)假手術(shù)組大鼠胰腺/肺組織未見明顯病理改變.AP組3h后胰腺水腫加重，于12h達(dá)高峰，腺泡呈孤島樣分布，片狀出血壞死，大量PMN浸潤；6，12h肺以PMN增多為主，肺泡間隔增厚，可見少量紅色蛋白滲出物，并可見肺泡壁破裂，肺間質(zhì)充血、水腫、明顯增寬，肺泡和肺間質(zhì)中有大量的中性粒細(xì)胞浸潤.用藥后，可顯著減輕胰腺/肺組織的病理損害，炎性細(xì)胞浸潤減少，水腫、出血、壞死減輕，表現(xiàn)為點(diǎn)狀壞死.

3討論

AP發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，早期胰腺細(xì)胞損傷導(dǎo)致局部的炎癥反應(yīng)，隨著疾病進(jìn)展，就會引起全身炎癥反應(yīng)綜合征（STRS）嚴(yán)重時可出現(xiàn)多臟器功能不全（MODS）甚至多臟器功能衰竭（MOF），病死率常高達(dá)40%［4-5］.胰腺腺泡損傷后，釋放多種受激活的胰酶及炎癥細(xì)胞因子，有多種細(xì)胞的過度激活和相互作用，產(chǎn)生氧自由基和炎癥介質(zhì)引起胰腺的血管通透性增加，最后導(dǎo)致了胰腺炎的發(fā)生.目前研究表明，重癥急性胰腺炎相關(guān)肺損傷也與胰酶異常激活和釋放、炎性細(xì)胞過度激活、炎癥介質(zhì)的釋放致個身STRS等有關(guān)［6］.我們證實(shí)注射牛磺膽酸后，AP組各時段血清PAF顯著持續(xù)升高，到24h時達(dá)高峰，與假手術(shù)組對應(yīng)時相段比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01），假手術(shù)組各個時相段血清PAF相比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）.提示PAF和其他的炎性細(xì)胞因子（如TNFα,IL6）一起在AP中起著重要作用.治療組與AP組相應(yīng)時相段比較有統(tǒng)計學(xué)差異（P＜0.01），說明海風(fēng)藤酮能夠抑制血清PAF,TNFα及IL6的水平.相關(guān)性也表明血清PAF變化與胰腺組織MPO活性、胰腺組織形態(tài)學(xué)改變呈正相關(guān)；血清PAF變化與肺組織MPO活性、肺組織形態(tài)學(xué)改變呈正相關(guān).PAF拮抗劑海風(fēng)藤酮治療AP的主要作用機(jī)制可能有［7-8］：①與PAF競爭靶位，抑制PAF活性的發(fā)揮；②抑制AP血中PAF含量的升高；③抑制巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生TNFα,IL6,IL8等炎性細(xì)胞因子和炎性遞質(zhì)；④抑制中性粒細(xì)胞活性，降低髓過氧化酶；⑤減低血管通透性，提高微循環(huán)的血流速度；⑥降低胰酶活性，減輕胰腺組織自我消化等作用機(jī)制.

PAF是通過多種效應(yīng)、多個環(huán)節(jié)參與AP的發(fā)生發(fā)展，已日益受到關(guān)注，而且阻斷PAF治療AP的研究也取得了可喜的成績，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用特異性PAF抑制劑海風(fēng)藤酮來治療AP，是第一次系統(tǒng)的在炎癥介質(zhì)水平上了解海風(fēng)藤酮對AP的影響.目前尚未見臨床報道，為闡明AP的發(fā)病機(jī)制和治療AP提供了理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù).

【參考文獻(xiàn)】

［1］KomatsuK,ShimosegawaT,UchiM,etal.Erythropoieticprotoporphyriawithsevereliverdysfunctionandacutepancreatitis［J］.JGastroenterol,2000,35:391-395.

［2］AbuZidanFM,BonhamMJ,WindsorJA.Severityofacutepancreatitis:amultivariateanalysisofoxidativestressmarkersandmodifiedGlasgowcriteria［J］.BrJSurg,2000,87:1019-1023.

［3］張群華,蔡瑞,吳樹強(qiáng),等.急性壞死性胰腺炎大鼠的炎性介質(zhì)變化和生長抑素的作用［J］.中華醫(yī)學(xué)雜志,1997,77:355-358.

［4］BhatiaM.Noveltherapeutictargetsforacutepancrcatitisandassociatedmultipleorgandysfunctionsyndrome［J］.CurrDrugTardctsInflanmAllergy,2002,1(4):343.

［5］RaratyMG,ConnorS,GriddleDN,etal.Acutepancrcatitisandorganfailure:pathophysiology,naturalhistoryandmanagementstrategies［J］.CurrGastroenterolRep,2004,6(2):99-103.

［6］CatherineMP,MichaelAM,JeanLF.Pancreatitisassociatedacutelunginjurynewinsights［J］.Chest，2003,124:2341-2351.

［7］LoucksEB,QayumiAK,GodinDV,etal.Therapeuticpotentialofplateletactivatingfactorantagonisminthemanagementofmyocardialinfarction［J］.CanJCardiol,2000,16:497-504.

［8］SunZ,WangX,DengX,etal.Beneficialeffectsoflexipafant,aPAFantagonistongutbarrierdysfunctioncausedbyintestinalischemiaandreperfusioninrats［J］.DigSurg,2000,17:57-65