中藥復(fù)方是中醫(yī)臨床用藥的基本形式，研究中藥復(fù)方的藥代動力學(xué)規(guī)律可以闡明中藥復(fù)方的組方原理與配伍規(guī)律，同時也為中藥新藥研究奠定基礎(chǔ)。關(guān)于中藥復(fù)方藥代動力學(xué)研究，國內(nèi)外學(xué)者已經(jīng)提出了一些新方法和新思路，如“復(fù)方效應(yīng)成分動力學(xué)”假說和“血清藥理學(xué)”方法［1］。

中藥復(fù)方藥代動力學(xué)研究的關(guān)鍵問題是根據(jù)其指標(biāo)成分(Markers)的體內(nèi)動力學(xué)過程來反映整體的動力學(xué)規(guī)律，在選擇Markers的同時，對其藥效作用規(guī)律探討也是工作的重點(diǎn)所在。杜力軍等［2］利用PK-PD線性模型對清熱復(fù)方中3種Markers與發(fā)熱大鼠體溫變化進(jìn)行相關(guān)分析，確定了其中黃芩苷有較高的相關(guān)性，由此以黃芩苷體內(nèi)動力學(xué)變化表征該清熱復(fù)方的體內(nèi)動力學(xué)過程;同時對活血化瘀復(fù)方中葛根素和人參皂苷Rg1與所測的藥效指標(biāo)間進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)葛根素和人參皂苷Rg1僅在給藥后5～10min體內(nèi)濃度與血小板抑制率呈正相關(guān)(r=0.999和0.996)，且符合線性效應(yīng)模型(對數(shù)濃度-效應(yīng))。但葛根素和人參皂苷Rg1在體內(nèi)的整個濃度變化區(qū)間與所測的藥效指標(biāo)之間無明顯的全程相關(guān)性。分析原因，本文作者認(rèn)為:一方面可能與所選的藥效指標(biāo)的非即時性(存在作用時間的延遲效應(yīng))有關(guān);另一方面，也可能由于中藥復(fù)方中藥效物質(zhì)在體內(nèi)存在多途徑和多靶點(diǎn)的協(xié)同或拮抗作用，以單一的Marker(即使是有效成分)與整體藥效學(xué)指標(biāo)的變化難以直接相關(guān)。為此，本文作者提出“組合血藥濃度”的概念，即將Markers的血藥濃度，以對藥效學(xué)指標(biāo)的貢獻(xiàn)大小作為權(quán)重，進(jìn)行加權(quán)組合，以“組合血藥濃度”(或稱“表觀藥效濃度”)替代單一Marker的血藥濃度，進(jìn)行“組合藥代動力學(xué)”(combinatorialpharmacokinetics，CPK)研究，并進(jìn)行CPK-PD線性模型擬合。以活血化瘀中藥復(fù)方腦得生為例，以腦得生中的Markers與大鼠全血黏度(bloodviscosity，BV)、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(erythrocyteaggregationindex，EAI)和紅細(xì)胞壓積(hematocrit，HCT)等血液流變學(xué)特性的改變進(jìn)行相關(guān)分析，探索中藥復(fù)方藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及其藥代動力學(xué)研究的新方法。

1儀器與材料

LCMS2010EV高效液相色譜質(zhì)譜儀(日本Shimadzu公司)，LCMSsolution3.0色譜工作站(日本Shimadzu公司)，LC-10ATvp高效液相色譜儀(日本Shimadzu公司)，ANASTAR色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)(美國SuntekScience公司)，微量取樣器(上海求精生化試劑儀器有限公司)，XW-80A型旋渦混合器(江蘇海門市麒麟醫(yī)用儀器廠)，TGL-16C臺式離機(jī)(上海安亭科學(xué)儀器廠)，LG-R-80F血液流變儀(北京世帝公司)，TDZ4-WS低速自動平衡離心機(jī)(長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司)。甲醇(色譜純，天津康科德科技有限公司)，磷酸(分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠)，丙酮(分析純，天津市大茂化學(xué)試劑廠)，肝素鈉注射液(上海生物化學(xué)制藥廠)。人參皂苷Rg1對照品(0703-200221)、人參皂苷Rb1對照品(110704-200216)、葛根素對照品(752-200108)、黃芩苷對照品(0715-9708，LC/MS內(nèi)標(biāo)物)(中國藥品生物制品檢定所)，大豆苷元對照品(美國Sigema公司)，人參皂苷Rd、三七皂苷R1(HPLC法檢測純度質(zhì)量分?jǐn)?shù)均＞96%)、葛根異黃酮(總黃酮含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為70%)(沈陽藥科大學(xué)天然藥物化學(xué)教研室)，紅花黃色素A(紅花黃色素含量質(zhì)量分?jǐn)?shù)為90%)、腦得生注射液(含紅花黃色素A0.10μg•L－1、葛根素0.76μg•L－1、人參皂苷Rg10.42μg•L－1)(本實(shí)驗(yàn)室自制)，香蘭素(HPLC-UV內(nèi)標(biāo)物，分析純，沈陽市試劑廠)。健康Wistar大鼠，體質(zhì)量200～220g〔沈陽藥科大學(xué)動物中心，實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(遼)2003-008;實(shí)驗(yàn)動物使用許可證號:SYXK(遼)2003-0012〕;體質(zhì)量180～220g(中國醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物室提供)。實(shí)驗(yàn)期間自由飲水，大鼠靜脈給藥試驗(yàn)前禁食12h。

2方法與結(jié)果

2.1指標(biāo)成分藥代動力學(xué)

摘要：中藥復(fù)方新藥是在我國傳統(tǒng)醫(yī)藥理論指導(dǎo)下，利用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)研究開發(fā)的新藥，是最能體現(xiàn)中醫(yī)藥特色和優(yōu)勢的新藥類別。藥學(xué)研究作為中藥復(fù)方新藥臨床前研究的主要內(nèi)容之一，既是藥品均一、穩(wěn)定的有效保證，又是安全性實(shí)驗(yàn)和有效性實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。通過查閱文獻(xiàn)并結(jié)合筆者在新藥研究中的實(shí)踐和體會，從藥材的基原與產(chǎn)地、工藝研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定性等方面探討了中藥復(fù)方新藥藥學(xué)研究中應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注的問題，并提出一些建議與解決措施，以期為中藥復(fù)方新藥的研發(fā)提供參考與借鑒。

關(guān)鍵詞：中藥復(fù)方新藥；藥學(xué)研究；中醫(yī)藥；藥材基原；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

中醫(yī)藥學(xué)在我國有數(shù)千年的歷史，具有廣泛的臨床應(yīng)用價值并形成了獨(dú)特的理論體系。《中華人民共和國中醫(yī)藥法》指出中醫(yī)藥事業(yè)應(yīng)傳承精華，守正創(chuàng)新，因此，如何在保持中醫(yī)藥傳統(tǒng)特色的同時加快其現(xiàn)代化，成為中醫(yī)藥改革創(chuàng)新的關(guān)鍵。中藥新藥融合了傳統(tǒng)中醫(yī)基礎(chǔ)理論與現(xiàn)代技術(shù)，滿足中藥創(chuàng)新發(fā)展的迫切需求。《藥品注冊管理辦法》2007年版中將中藥、天然藥物的注冊分類分為9類，其中1～6類為中藥新藥，包含單味制劑和復(fù)方制劑。6類新藥即中藥復(fù)方新藥是由多味藥材配伍而成，多來源于臨床經(jīng)驗(yàn)方或醫(yī)院院內(nèi)制劑，是最能體現(xiàn)中醫(yī)藥特色和優(yōu)勢的新藥類別[1]。中藥復(fù)方新藥的藥學(xué)研究包括藥材研究、提取純化工藝研究、制劑處方工藝研究、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性研究等，是藥品質(zhì)量可控的保證，也是安全性和有效性試驗(yàn)的前提。由于中藥材來源廣泛、化學(xué)成分復(fù)雜以及研究者對法規(guī)政策的解讀差異，在藥學(xué)研究中存在藥材基原、產(chǎn)地不固定，工藝路線的選擇不合理，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)不規(guī)范，穩(wěn)定性研究不全面等問題。本文結(jié)合中藥復(fù)方新藥開發(fā)中遇到的具體情況對這些問題進(jìn)行分析探討，以期充分利用中醫(yī)藥的理論及實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，為科學(xué)、規(guī)范、合理地進(jìn)行中藥新藥藥學(xué)研究提供參考和借鑒。

1藥材研究中需關(guān)注的問題

1.1藥材的基原與產(chǎn)地。基原是藥材的屬性來源，而基原準(zhǔn)確是中藥制劑質(zhì)量穩(wěn)定的基礎(chǔ)[2]，不同種屬的藥材所含化學(xué)成分各異，含量不同，會使藥效作用產(chǎn)生差異。產(chǎn)地亦是影響藥材質(zhì)量的另一重要因素，歷來被醫(yī)家所重視，《神農(nóng)本草經(jīng)》曰：“土地所出，真?zhèn)侮愋拢⒏饔蟹ā保赋隽怂幉漠a(chǎn)地的重要性，溫度、濕度、光照、土壤條件等生長環(huán)境會對不同產(chǎn)地藥材的活性成分含量、藥效等產(chǎn)生影響。據(jù)統(tǒng)計，《中國藥典》2015年版一藥多基原植物有115種[3]。多基原、不同產(chǎn)地品種間含量差異較大，但藥典標(biāo)準(zhǔn)卻是同一限度規(guī)定，致使某些基原藥材含量無法達(dá)到藥典要求。筆者曾參與研發(fā)的某一中藥復(fù)方新藥，藥學(xué)研究中確定淫羊藿的基原與產(chǎn)地時出現(xiàn)多批次藥材均不能達(dá)到藥典要求的情況。針對此類問題，艾鐵民[3]建議對多基原植物的中藥貫徹“一名一物，一物一名”的原則，以保證名稱和標(biāo)準(zhǔn)的唯一性。當(dāng)藥材有道地產(chǎn)區(qū)時，首選道地產(chǎn)區(qū)藥材；若藥材分布范圍較廣亦或是野生藥材時，其產(chǎn)地應(yīng)在系統(tǒng)比較研究后進(jìn)行固定。如歷代本草中認(rèn)為薄荷主產(chǎn)區(qū)為江蘇，隨著時代的變遷，安徽已經(jīng)成為薄荷的主產(chǎn)區(qū)。不同產(chǎn)區(qū)薄荷優(yōu)勢成分不同，江蘇和安徽產(chǎn)區(qū)的薄荷酮含量相對較高，安徽產(chǎn)區(qū)的薄荷醇含量相對較高，其他產(chǎn)區(qū)的胡椒酮含量相對較高[4]，其藥效差異還有待進(jìn)一步研究。《中國藥典》2015年版對薄荷藥材僅規(guī)定了含葉量不得少于30%、藥材含油量不得少于0.8%及飲片含油量不得少于0.4%，對揮發(fā)油的具體成分并未做出明確規(guī)定。因此藥學(xué)研究過程中，藥材的產(chǎn)地不僅要符合《中國藥典》的要求，還應(yīng)結(jié)合處方的功能主治和相關(guān)藥效學(xué)結(jié)果綜合評估。《中藥注冊管理補(bǔ)充規(guī)定》2008年版首次提出了應(yīng)明確藥材來源、產(chǎn)地和工藝技術(shù)參數(shù)的要求，并將其納入保證中藥質(zhì)量的控制環(huán)節(jié)[5]。對于多基原的藥材，需對處方的來源作文獻(xiàn)歷史考證之后系統(tǒng)評估藥材基原，通過比對不同基原間藥材質(zhì)量來固定基原。在此基礎(chǔ)上，還需考慮藥材的實(shí)際生長環(huán)境、產(chǎn)量以及市售藥材的質(zhì)量等具體情況，盡可能固定藥材的產(chǎn)地。1.2含有毒性成分的藥材。毒性藥材始見于《神農(nóng)本草經(jīng)》，根據(jù)毒性大小分為“大毒”“有毒”“小毒”3級[6]，歷版《中國藥典》均收載毒性藥材，至2015年版共載有83種。張仲景的《傷寒論》《金匱要略》收載的方劑中，也含有附子、烏頭、大戟、甘遂等毒性藥材，該類藥物在某些沉疴頑疾的治療中發(fā)揮著重要作用，但由此引發(fā)的不良反應(yīng)也屢見不鮮。中藥復(fù)方新藥研究中，當(dāng)含有毒性藥材時，如何保證其安全有效、質(zhì)量可控，是需要重點(diǎn)關(guān)注的問題。審評專家王停等[7]曾在2008年指出：“藥典或者部頒標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)中認(rèn)為其含有毒性成分的藥材，如果標(biāo)準(zhǔn)中未對其毒性成分進(jìn)行研究或限度考察的，應(yīng)該增加其毒性成分控制的方法并提交相應(yīng)申報資料”。2019年6月，國家藥審中心《中藥新藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》征求意見稿，明確提出“處方中飲片若源自毒性藥材……應(yīng)制定其限量檢查項(xiàng)”[8]。可見，毒性藥材的質(zhì)量控制問題已被提上中藥新藥研究的重要議程。目前，無論是藥典或是地方標(biāo)準(zhǔn)，收載的毒性藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)尚存在局限性，《中國藥典》2015年版中收載的1種大毒中藥、14種有毒中藥、18種小毒中藥均沒有含量測定項(xiàng)[9]，地方藥材標(biāo)準(zhǔn)中多數(shù)毒性藥材也未建立毒性成分的質(zhì)控方法。此外，毒性藥材的限量檢查方法也受對照品來源短缺的限制。中國食品藥品檢定研究院提供的法定對照品僅涉及《中國藥典》收載且有含量測定項(xiàng)的品種，對于其他毒性藥材中毒性成分的限量檢查，無論是從其他市售渠道購買對照品或自行分離、鑒定、標(biāo)定，均難度較高，耗時較長。因此，若能設(shè)立統(tǒng)一的毒性中藥分級標(biāo)準(zhǔn)，引入先進(jìn)的檢測技術(shù)手段提高藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并加強(qiáng)毒性成分對照品的供應(yīng)，簡化其標(biāo)定細(xì)則，勢必能更加有效、合理地推進(jìn)含毒性藥材的中藥新藥研究。1.3其他問題。藥材研究是新藥研發(fā)的源頭，并貫穿整個新藥研發(fā)全過程。只有將藥材源頭控制、生產(chǎn)過程控制與最終產(chǎn)品的質(zhì)量控制相結(jié)合才能保證藥品的均一穩(wěn)定。目前許多藥材的采收、炮制等過程研究不充分、不全面使得藥材質(zhì)量不穩(wěn)定，成為高品質(zhì)中藥新藥研究的一大阻礙。不同采收時間的同種藥材在某些成分的含量上可能會有差異，如馮帥等[10]發(fā)現(xiàn)連翹中有效成分的含量與采收期有一定相關(guān)性：連翹苷、連翹酯苷A的含量于7月上旬時采收最高，之后呈下降趨勢；張淑蓉等[11]通過氣相色譜法對8批不同采收期的連翹藥材中揮發(fā)油出油率及α-蒎烯和β-蒎烯的含量進(jìn)行測定，也發(fā)現(xiàn)7月中下旬最高。因此，在復(fù)方新藥的藥材研究中，當(dāng)采收時間對藥材質(zhì)量有影響時，可增加對采收時間的考察，明確采收期，以保證藥材品質(zhì)。另外，對同一飲片的炮制普遍存在“一藥多法”“各地各法”現(xiàn)象，炮制工藝判定的標(biāo)準(zhǔn)也存在差異。如玄參的飲片炮制，浙江、天津等省市中藥飲片炮制規(guī)范為切片，江蘇、山東等省中藥飲片炮制規(guī)范中規(guī)定切薄片，湖南省和江西省要求為斜切薄片，北京市和浙江省則要求為切厚片。全國市場流通的玄參飲片規(guī)格較為混亂，不同的加工方式導(dǎo)致性狀差異較大，不同的炮制方法也使飲片中有效成分的含量不同，如浙江省和天津市的含量測定指標(biāo)成分與《中國藥典》2015年版一致，規(guī)定以哈巴苷和哈巴俄苷總量計不得少于0.45%，湖北、廣東省則以哈巴俄苷計不得少于0.05%，上海市規(guī)定哈巴俄苷不得少于0.04%[12]。針對以上問題，國家中醫(yī)藥管理局正組織修訂《全國中藥飲片炮制規(guī)范》，完善藥材的炮制工藝、輔料用法用量，并制定統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，保證中藥飲片的質(zhì)量。此外，藥材研究還應(yīng)根據(jù)《中藥注冊管理補(bǔ)充規(guī)定》[5]中“保障中藥材來源的穩(wěn)定和資源的可持續(xù)利用……涉及瀕危野生動植物的應(yīng)當(dāng)符合國家有關(guān)規(guī)定”的要求，關(guān)注藥材資源的可持續(xù)利用以及使用野生藥材的合法性和必要性問題。

2工藝研究中需關(guān)注的問題

1抑制胃癌細(xì)胞增殖

腫瘤的惡性增長是腫瘤無限增殖的結(jié)果，大量研究證明中藥可通過干擾DNA合成、影響細(xì)胞周期調(diào)控因子的表達(dá)等多種方式抑制胃癌細(xì)胞的增殖。郭曉冬等［2］發(fā)現(xiàn)，消痰散結(jié)方可通過抑制胃癌細(xì)胞核中PCNA表達(dá)，干擾DNA合成并影響細(xì)胞表面生長因子受體表達(dá)，降低細(xì)胞增殖活性，抑制移植瘤生長。細(xì)胞周期調(diào)控因子CyclinE，CDK2，CDK4的過度表達(dá)和(或)其抑制因子p27的表達(dá)降低或缺如，均能縮短細(xì)胞周期的G1期時間或者加速G1/S轉(zhuǎn)換，帶有惡性表達(dá)型的DNA不能檢查和修復(fù)，使細(xì)胞分化出現(xiàn)異常，這是腫瘤細(xì)胞，包括胃癌細(xì)胞分裂增殖的重要機(jī)制［3］。李相勇等［4］發(fā)現(xiàn)消痰散結(jié)方抑制細(xì)胞過度增殖的重要機(jī)制之一就是通過降低胃癌組織中細(xì)胞周期調(diào)控因子CDK4的表達(dá)而實(shí)現(xiàn)的；闞方巨等［5］的研究表明，中藥胃康寧可抑制胃癌細(xì)胞的增殖，其機(jī)制之一可能是減少細(xì)胞周期因子CyclinE，CDK2及其mRNA的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞周期抑制因子p27及其mRNA的表達(dá)。尹麗慧等［6］的研究顯示，黃芪、人參、溫莪術(shù)、藤梨根、露蜂房、蘇鐵葉、八月扎、白毛根、徐長卿等藥物組成的中藥方劑1號生藥能抑制人胃癌SGC7901細(xì)胞的增殖，且呈時間劑量依賴效應(yīng)。40mg/ml中藥方劑1號作用48h后，G+M期細(xì)胞比率高達(dá)41.92％，增加了29.22％，G0/G1期的細(xì)胞比率降至43.25％(兩者與對照組相比，P<0.01)，提示中藥方劑l號能夠抑制人胃癌細(xì)胞SGC7901的體外增殖，且其作用機(jī)制可能與干擾細(xì)胞周期有關(guān)。

2誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡

細(xì)胞凋亡（apoptosis)又稱程序性細(xì)胞死亡(Programmedcelldeath，PCD)，是一種受基因控制的主動的細(xì)胞死亡過程。在腫瘤的發(fā)病和增殖過程中，由于促凋亡基因的失活和抑制凋亡基因的過度表達(dá)，使腫瘤細(xì)胞凋亡減少，是腫瘤發(fā)生、發(fā)展的重要原因。研究證明，中藥復(fù)方可通過調(diào)控凋亡相關(guān)基因的表達(dá)、阻滯細(xì)胞周期等多種方式誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞的凋亡，從而抑制腫瘤的生長。趙愛光等［7］發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方胃腸安（WCA）能通過活化caspase9和caspase3而誘導(dǎo)人胃癌SGC7901細(xì)胞裸小鼠皮下移植瘤細(xì)胞的凋亡，其機(jī)制可能與下調(diào)stat3和bcl2的mRNA表達(dá)，抑制Pstat3和bcl2蛋白在細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)有關(guān)。余志紅等［8］用裸鼠建立原位移植人胃癌MKN45細(xì)胞模型，隨機(jī)分為模型組，金龍蛇顆粒高、中、低劑量組和5FU干預(yù)組，分別灌服不同劑量的中藥金龍蛇顆粒和5FU，結(jié)果金龍蛇高、中、低劑量組的的抑瘤率分別為68.13%，55.94%和50.31%，呈劑量依賴效應(yīng)，與5FU干預(yù)組抑瘤率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義；金龍蛇顆粒各劑量組腫瘤細(xì)胞凋亡率為22.81%~38.54%，亦呈劑量依賴效應(yīng)，說明促進(jìn)裸鼠原位移植人胃癌MKN45細(xì)胞凋亡是金龍蛇顆粒抗腫瘤的作用機(jī)制之一。蘇勉誠等［9］研究表明，癌寧可誘導(dǎo)人胃癌SGC7901細(xì)胞的凋亡，其機(jī)制與下調(diào)癌基因及細(xì)胞因子TGFβ1，F(xiàn)as，F(xiàn)asL的表達(dá)有關(guān)。

3誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞分化

誘導(dǎo)分化(inductionofdiferentiation)是指惡性腫瘤細(xì)胞向正常或接近正常細(xì)胞方向分化逆轉(zhuǎn)的現(xiàn)象［10］。誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化是腫瘤治療的新途徑，其特點(diǎn)是不殺傷腫瘤細(xì)胞，而是誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化成為正常或接近正常的細(xì)胞。研究證明，中藥復(fù)方也具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化的作用。李寶園［11］等采用高壓氧化亞氮(笑氣)加胸腺嘧啶脫氧核苷(TdR)雙阻斷法將MGc803細(xì)胞分別同步化于G1，S，G2，M4個時相，用中藥紫龍金和環(huán)六亞甲基二己酰胺(hexamethylenbisacelamide，HMBA)分別處理各時相細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)紫龍金與HMBA對不同周期細(xì)胞都具有顯著的增殖抑制作用，對各周期細(xì)胞集落生長都有抑制作用，反應(yīng)了生長抑制功能得到了不同程度的恢復(fù)；且除M期以外，各時相細(xì)胞無論中藥組還是HMBA組都顯著地促進(jìn)微絲的組裝，且排列有序，形成顯著的應(yīng)力纖維(stressfiber)結(jié)構(gòu)，說明惡性細(xì)胞不同程度的向良性細(xì)胞分化。朱國福等［12］用錢氏消瘤口服液藥物血清溫育人胃癌SGC7901細(xì)胞4d后，能使該細(xì)胞形態(tài)上呈現(xiàn)再分化趨向，平板集落形成數(shù)顯著低于對照組，進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，其誘導(dǎo)分化的機(jī)制與該方能升高SGC-7901細(xì)胞內(nèi)的cAMP水平，降低cGMP水平，從而升高cAMP/cGMP比值有關(guān)。細(xì)胞與細(xì)胞之間形成的間隙連接細(xì)胞間通訊(GJIC)功能異常可促進(jìn)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化和癌細(xì)胞生長，在腫瘤細(xì)胞中，多數(shù)缺乏縫隙連接結(jié)構(gòu)和細(xì)胞間通訊功能，陳華等［13］發(fā)現(xiàn)，中藥癌平口服液能通過增加人胃癌BGC823細(xì)胞間的連接通訊，使其再分化。

1體外抗真菌活性

臨床報道，較多的中藥方劑對真菌感染性疾病顯示出良好的治療作用［7-11］。通過實(shí)驗(yàn)研究亦發(fā)現(xiàn)中藥復(fù)方制劑具有良好的體外抗真菌活性。目前體外抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)方法主要為瓊脂稀釋法、瓊脂擴(kuò)散法及美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）的M27-A、M38-A方案。瓊脂稀釋法是目前較為廣泛應(yīng)用的初篩方法，其方法是在瓊脂平板內(nèi)摻入不同濃度的抗真菌藥物，以多點(diǎn)接種法將相同量的待測真菌接種于瓊脂表面，以菌不生長的最低濃度定為該藥對真菌的最小抑菌濃度(MIC)。多數(shù)研究者在試管內(nèi)或在平皿內(nèi)進(jìn)行,此方法適合于大量菌株測定實(shí)驗(yàn)。胡圣愛等［12］應(yīng)用固體培養(yǎng)基試管內(nèi)藥基法測定了膚癬消搽劑（連翹、苦參、大風(fēng)子、鴉膽子、黃柏、蛇床子等）對石膏樣小孢子菌有抑制作用,其MIC為1:100倍。楊志波等［13］采用沙氏培養(yǎng)基試管內(nèi)藥基法觀察到復(fù)方二礬浸液（枯礬、皂礬、兒茶、側(cè)柏葉、地骨皮、土槿皮、黃精、公丁香、血竭、食醋）對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、石膏樣小孢子菌的最小抑菌濃度分別是0.25%、0.5%、0.5%。謝淑霞等［14］采用沙氏培養(yǎng)基試管內(nèi)藥基法觀察到祛癬洗劑（白蘚皮、苦參、地膚子、土槿皮、羌活、紫地榆、黃柏、椒目、百部、蛇床子等）對我國南方常見的9種致病真菌均有抑制作用，其最小抑菌濃度6.25％～50％，對癬菌的抑制作用優(yōu)于白念珠菌。盧全德等［15］報道采用試管內(nèi)藥基法測得膚疾安噴霧劑（金銀花、野菊花、苦參、血竭、薄荷腦等）對絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌的MIC為0.39mg/ml，對須癬毛癬菌、羊毛狀小孢子菌的MIC為0.78mg/ml，對白念珠菌、青霉菌為1.56mg/ml。陳超等［16］以瓊脂稀釋法觀察到復(fù)方黃連皮康酊（黃連100g、苦楝皮50g、海桐皮50、藁本30g、檳榔50g、大風(fēng)子15g、郁金30g、白礬30g、蘆薈30g、地膚子50g、蕪荑30g組方制成酊劑）對皮膚癬菌（紅色毛癬菌、須癬毛癬菌和絮狀表皮癬菌）及深部真菌（白念珠菌）均有明顯的抗菌作用，使菌落縮小，與克霉唑癬藥水差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)，并且得出復(fù)方黃連皮康酊對表皮真菌的抗菌作用大于對深部真菌（白念珠菌）的結(jié)論。魏蓉［17］用試管瓊脂稀釋法觀察到祛癬止癢洗劑（丁香、黃精、龍膽草、明礬、百部、藿香、黃連、土槿皮、薄荷腦、冰片水煎液）對9種真菌均有抑制作用，抑菌濃度分別為0.39%(紅色毛癬菌)、0.195%(須癬毛癬菌、斷發(fā)毛癬菌、紫色毛癬菌、許蘭毛癬菌、羊毛狀小孢子癬菌、絮狀表皮癬菌)、0.75%(石膏樣小孢子菌)、1.56%(白念珠菌)。張玲等［18］采用試管稀釋法，進(jìn)行蟹黃膚寧軟膏對犬小孢子菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌的體外藥效學(xué)研究，結(jié)果蟹黃膚寧軟膏對8株淺部毛癬菌屬的MIC均在0.03125～0.25mg/mL之間，顯示了蟹黃膚寧軟膏較好的體外抗真菌活性。瓊脂擴(kuò)散法是通過測量真菌生長被抑制的范圍大小來確定抗真菌活性，也是一種簡單、易行的初篩方法。楊國晶等［19］用瓊脂擴(kuò)散法觀察了復(fù)方苦槿霜（苦參150g、土槿皮150g、黃柏150g、白蘚皮150g、地膚子150g、川芎150g、兒茶100g）及其原料藥對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、犬小孢子癬菌、白念珠菌的抑菌作用，結(jié)果10%、20%復(fù)方苦槿霜及10%、20%原料藥抑菌效果相同，與達(dá)克寧相當(dāng)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，明顯優(yōu)于5%復(fù)方苦槿霜及5%原料藥的抑菌效果，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。何定淑等［20］采用紙片濃度梯度法研究硝礬散（枯礬、芒硝）對紅色毛癬菌和須癬毛癬菌株的體外抑菌作用，結(jié)果2%硝礬散對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌的MIC范圍分別為0.0625～0.125mg/ml、0.03125～0.125mg/ml。林靜瑜等［21］采用打孔藥物瓊脂擴(kuò)散法觀察到癬藥膏(由丁香、蜂房等8味中藥組成)5%濃度以上對須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、紅色毛癬菌均有明顯的抗菌作用，1%濃度僅對須癬毛癬菌有抗菌作用，但各濃度均對白念珠菌感染無效。曾嶸等［22］采用管蝶法對玉陰潔沖洗劑進(jìn)行了藥效學(xué)研究，結(jié)果表明，1g生藥/ml玉陰潔洗劑體外對白念珠菌有一定的抑制作用，抑菌圈為(20.0±0.8)mm，MIC為12.5%(1:8稀釋度)。徐文躍等［23］采用改良的平皿挖洞灌藥法觀察到白蓮洗劑(由白頭翁、半邊蓮、蛇床子、黃連、黃柏、百部、地膚子等組成)對白念珠菌有明顯抑制作用，其作用強(qiáng)度與潔爾陰相當(dāng)。瓊脂稀釋法和瓊脂擴(kuò)散法的試驗(yàn)結(jié)果受許多因素的影響，包括菌接種液的濃度及準(zhǔn)備、培養(yǎng)基成分及pH值，孵育時間和溫度及不同的終點(diǎn)判定方法等，重復(fù)性差，不利于各實(shí)驗(yàn)室之間的比較，美國臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會（CLSI）在1997年、1998年和2003年先后提出了酵母菌的液基稀釋法抗真菌藥物敏感性試驗(yàn)方案（M27-A）、產(chǎn)孢絲狀真菌的抗真菌藥敏試驗(yàn)倡導(dǎo)方案（M38-P）和M38-A方案，這些方案準(zhǔn)確性好、重復(fù)性高，實(shí)驗(yàn)室間結(jié)果的一致性可與抗細(xì)菌的藥物敏感試驗(yàn)相媲美。鄭瑋清等［24］參照CLSIM38-A液基試管法進(jìn)行改良，觀察甲癬中藥洗劑（龍膽草40g、黃連30g、射干20g、半枝蓮30g、地膚子50g、紫草10g和花椒10g）蒸餾水提取液和乙醇提取液對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、羊毛狀小孢子菌、絮狀表皮癬菌和白念珠菌的抗真菌作用。結(jié)果甲癬中藥洗劑對皮膚癬菌的敏感性較好，而對白念珠菌的敏感性較差，同時可明顯看出，醇提液的MIC值低于水提液的MIC值，說明中藥的抗真菌藥物成分不僅包括水溶性物質(zhì)，而且包括脂溶性物質(zhì)。尤力都孜·買買提等［25］采用CLSIM-38P方案測定維藥雅麗蔓制劑對臨床常見皮膚癬菌的抗菌作用，結(jié)果，對須癬毛癬菌的MIC90為190.46μg/ml(平均MIC128μg/ml)，對紅色毛癬菌的MIC90為148.57μg/ml(平均MIC93.42μg/ml)，對絮狀表皮癬菌的MIC90為311.27μg/ml(平均MIC128μg/ml)，對石膏樣小孢子菌的MIC90為429.54μg/ml(平均MIC194.01μg/ml)。雅麗蔓制劑對真菌中不同菌種的MIC90值范圍為148～429μg/ml，表明雅麗蔓制劑對臨床常見皮膚癬菌具有顯著的抗真菌作用。鄭瑋清等［26］以美國CLSIM27-A液基法并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行改良，檢測硝礬洗劑（硼砂、芒硝、明礬1:1水溶液）及其單味藥物對紅色毛癬菌15株、須癬毛癬菌9株的MFC和MIC，結(jié)果硝礬洗劑的MFC為1.25～20mg/ml(平均為5.26mg/ml)，低于芒硝的MIC和明礬的MFC值。

2動物實(shí)驗(yàn)

部分學(xué)者利用動物真菌病模型進(jìn)行了抗真菌中藥的研究，相比僅在試管內(nèi)進(jìn)行抗真菌試驗(yàn)得到的結(jié)果應(yīng)更有意義。徐洪波等［27］用紅色毛癬菌制作豚鼠皮膚真菌感染模型，將25％藿黃散洗劑（藿香、黃精、苦參、茵陳、枯礬等）水煎液涂布感染皮膚，給藥2次/d，連續(xù)給藥21d。豚鼠在用藥6d后鱗屑減少，12d后鱗屑逐漸消失，呈淺紅色斑，真菌檢查均為陰性，18～21d皮膚外觀恢復(fù)正常。何定淑等［20］用2%和4%硝礬散溫水浸泡治療豚鼠須癬毛癬菌感染的足癬、體癬，1次/d，30min/次，共7d，顯示具有較好療效，與1%足光粉比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與蒸餾水組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義。曾勇等［28］研究消炎抗癬霜(由升藥底、蛇床子、冰片、樟腦等中藥組成)對石膏樣小孢子菌、須癬毛癬菌導(dǎo)致的豚鼠體癬模型的治療作用，結(jié)果，2周后觀察到消炎抗癬霜能夠減輕真菌所致豚鼠皮膚病變程度，提高真菌鏡檢和真菌培養(yǎng)的轉(zhuǎn)陰率。楊小潔等［29］觀察了中藥真菌安膠囊對白念珠菌深部感染小鼠的治療作用，結(jié)果治療組、預(yù)防組深部真菌感染的小鼠病死率和血液內(nèi)的真菌數(shù)，與非治療組相比明顯降低，實(shí)驗(yàn)表明中藥真菌安膠囊有治療白念珠菌深部感染的作用。譚元生等［30］對復(fù)方苦參液的藥效學(xué)進(jìn)行動物實(shí)驗(yàn)研究表明，復(fù)方苦參洗液具有較好的抗家兔陰道黏膜人工白念珠菌感染作用，其治療后陰道涂片、真菌學(xué)培養(yǎng)、病理切片檢查結(jié)果與潔爾陰組相比無差異。梁君兒等［31］制成大白兔白色念珠菌陰道炎模型，并使用香荷藥條(由黃連、黃柏、丁香、薄荷等7味藥組成)治療，實(shí)驗(yàn)表明香荷藥條能有效抑制白色念珠菌的生長，使大白兔陰道白色念珠菌的轉(zhuǎn)陰率與對照組達(dá)克寧栓無顯著性差異。

3中藥復(fù)方制劑與單味藥物的體外抗真菌活性比較

邱瑩等［32］觀察大風(fēng)子、皂角、川椒、百部、蛇床子、大黃、地骨皮、黃柏、苦參、白蘚皮、地膚子、紅花、桃仁、姜黃、藿香、芒硝、明礬、硼砂、荊芥、防風(fēng)20種中藥水煎液及根據(jù)單味中藥抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果選取的6種（大風(fēng)子、皂角、川椒、明礬、藿香、地骨皮）抑菌效果最好的中藥組成的復(fù)方水煎液對皮膚癬菌和白念珠菌的抑菌作用，結(jié)果復(fù)方抑皮膚癬菌MIC:0.625%,對白念珠菌MIC:2.5%，抑菌強(qiáng)度好于單味藥，說明這些藥物之間有協(xié)同作用。鄭瑋清等［26］檢測硝礬洗劑（硼砂、芒硝、明礬1:1水溶液）及其單味藥物對紅色毛癬菌和須癬毛癬菌MIC，結(jié)果硝礬洗劑、硼砂、芒硝、明礬的平均MIC（或MFC）分別為5.26mg/ml、2.313mg/ml、20.19mg/ml、12.13mg/ml，硝礬洗劑的抗真菌活性強(qiáng)于芒硝組和明礬組，弱于硼砂組。黃寧等［33］觀察方劑1（白蘚皮、生姜、大蒜、川椒、斑蟊、丁香即復(fù)方白蘚皮）、方劑2為復(fù)方白蘚皮的拆方（丁香、白蘚皮、斑蝥、川椒）和復(fù)方白蘚皮的各單味中藥的醇提液對紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、絮狀表皮癬菌、白念珠菌、短帚菌5種甲真菌病常見致病菌的MIC，結(jié)果方劑2的抑菌效果明顯優(yōu)于方劑1及各單味中藥(P<0.05)。作者認(rèn)為這可能復(fù)方白蘚皮酊中各組分藥物間還存在一定相互拮抗的作用，因此拆方后表現(xiàn)出更優(yōu)的抗真菌作用，但因部分中藥抗真菌機(jī)制多樣性，有的可能通過增強(qiáng)機(jī)體免疫力而抗真菌，故復(fù)方白蘚皮酊的臨床效果也很顯著，這有待在臨床中做進(jìn)一步的研究。中藥復(fù)方制劑藥物之間具有相互協(xié)同、提高單味中藥的抗真菌活性，或是相互拮抗、降低抗菌作用，或是中藥在體內(nèi)通過其他途徑發(fā)揮抗真菌作用，如提高機(jī)體免疫力，這也需今后進(jìn)一步的研究。

【關(guān)鍵詞】中藥復(fù)方動物模型物質(zhì)基礎(chǔ)藥理學(xué)研究

中藥復(fù)方是中藥防治疾病的主要形式，是在中醫(yī)辨證施治的理論指導(dǎo)下，根據(jù)病機(jī)和藥性理論等，按照君臣佐使等原則配伍組成的具有特定主治功效的藥方。中醫(yī)關(guān)于方劑的配伍有高度的科學(xué)性，中藥復(fù)方蘊(yùn)涵了中醫(yī)理論豐富、深刻而復(fù)雜的科學(xué)內(nèi)涵，中藥復(fù)方藥理學(xué)研究是當(dāng)今生命科學(xué)研究領(lǐng)域最為復(fù)雜、難度最大和最具有挑戰(zhàn)性的研究之一。

20世紀(jì)70年代以后，由于人類疾病譜的變化、化學(xué)藥物不良反應(yīng)大及其開發(fā)難度越來越大，植物藥重新受到世界各國人們的關(guān)注。雖然中國在世界“復(fù)方類”天然藥領(lǐng)域具有綜合優(yōu)勢，但是中國在世界植物藥領(lǐng)域并不處于優(yōu)勢地位，而是亞洲的日本、歐洲的德國為代表處于領(lǐng)先地位。我國作為傳統(tǒng)醫(yī)藥大國，中藥出口國際市場份額一直在5％左右，和我國的地位極不相稱。日、德等國之所以擁有較大的市場份額，就是在現(xiàn)代化方面走到了我國的前面。加強(qiáng)中藥復(fù)方藥理學(xué)研究對中藥現(xiàn)代化及中藥新藥開發(fā)具有十分重要的意義。

一、把握研究方向，走中西醫(yī)結(jié)合道路

中藥的藥理作用與西藥相比具有明顯不同的特點(diǎn)。一是整體觀思想。現(xiàn)代西藥均是結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)清楚的單體化合物，劑型先進(jìn)，藥效及其作用機(jī)制清楚；中藥尤其是中藥復(fù)方藥效的發(fā)揮是其所含多種活性成分通過多種作用途徑、環(huán)節(jié)和靶點(diǎn)所表現(xiàn)的綜合作用。辨證施治、君臣佐使等原則是中醫(yī)用藥的精髓。中藥不等于一般的植物，它必須具備中藥應(yīng)有的真正的內(nèi)涵，離開了中醫(yī)藥整體觀，單純追求西藥化，將使中藥藥理學(xué)研究路子越走越窄。二是現(xiàn)代科學(xué)化。從藥物的角度來看，中藥與西藥的作用對象是相同的，都是通過化學(xué)物質(zhì)作用于機(jī)體生物大分子，影響機(jī)體的病理生理而發(fā)揮藥理作用，其作用和作用機(jī)制是客觀存在的規(guī)律。因此，客觀地講應(yīng)用現(xiàn)代的科學(xué)手段是能夠揭示中藥復(fù)方的作用機(jī)制的，關(guān)鍵是怎樣才能全面準(zhǔn)確地揭示。我國著名藥理學(xué)家周金黃教授曾多次指出，中藥復(fù)方藥理學(xué)的研究應(yīng)在中西醫(yī)理論的指導(dǎo)下進(jìn)行，主張在中藥復(fù)方藥理學(xué)的研究中走中西醫(yī)結(jié)合的道路。整體觀著重于宏觀，現(xiàn)代科學(xué)著重于微觀，二者有機(jī)結(jié)合便能形成宏觀與微觀辨證統(tǒng)一的中藥復(fù)方藥理學(xué)。

20世紀(jì)90年代，Sheehan發(fā)表了中藥復(fù)方湯劑治療皮膚病過敏性皮炎的臨床研究論文，運(yùn)用隨機(jī)、雙盲、對照實(shí)驗(yàn)，觀察了服用中藥復(fù)方湯劑對過敏性皮炎的療效，結(jié)果顯示，復(fù)方湯劑療效顯著。PC-SPES在美國的興起，是中藥復(fù)方按國際通行標(biāo)準(zhǔn)研制成功的又一例證。專家認(rèn)為PC-SPES在美國成功的主要因素是劑型質(zhì)量控制較好和療效令人信服。由此可見，中藥復(fù)方的臨床療效完全可以按照國際通行標(biāo)準(zhǔn)來確證，可以進(jìn)入歐美主流藥物市場，關(guān)鍵是研究工作的質(zhì)和量。

摘要:綜述了中藥復(fù)方化學(xué)成分的研究成果與進(jìn)展，包括有效化學(xué)成分的定性與定量、全方化學(xué)成分的提取分離與鑒定、復(fù)方活性部位與有效成分的藥理追蹤等。

中藥復(fù)方是中醫(yī)治病的主要臨床應(yīng)用形式，復(fù)方中的化學(xué)成分是中藥發(fā)揮藥效作用的物質(zhì)基礎(chǔ)。進(jìn)行復(fù)方化學(xué)成分的研究，在闡明中醫(yī)的方藥理論，揭示中藥的配伍規(guī)律和作用機(jī)制，優(yōu)化制劑工藝，制定質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化并走向國際市場等方面均具重要意義。筆者就中藥復(fù)方化學(xué)成分的研究進(jìn)行綜述，以供參考。

1研究方法與途徑

迄今，中藥復(fù)方化學(xué)成分的研究，無論在思路還是在技術(shù)與方法等諸方面仍處探索階段，不少作者提出了一些有意義的觀點(diǎn)和構(gòu)思，如余亞綱的中藥復(fù)方化學(xué)成分系統(tǒng)分離與鑒定的三元設(shè)計方案〔1〕，薛燕等提出的中藥復(fù)方多成分經(jīng)多途徑協(xié)同作用的霰彈理論〔2〕以及周俊的中藥復(fù)方天然組合化學(xué)庫與多靶作用機(jī)制〔3〕等，這些對于如何開展中藥復(fù)方化學(xué)成分的研究工作具有一定的啟發(fā)和參考價值。關(guān)于中藥復(fù)方化學(xué)成分的研究方法與途徑，目前可歸納成如下3個方面：1)以單味藥有效成分為指標(biāo)，對全方制劑進(jìn)行定性與定量。2)采用植化方法對全方化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)提取、分離和鑒定。3)以藥效為標(biāo)準(zhǔn)追蹤復(fù)方活性部位與有效成分。

2以單味藥有效成分為指標(biāo)定性與定量

確定單味藥主要有效化學(xué)成分作為指標(biāo)性物質(zhì)(markersubstances)，采用各種分離與分析技術(shù)，對復(fù)方全方、各藥配伍及各單味藥制劑中指標(biāo)性物質(zhì)(成分)進(jìn)行定性與定量，并探討制備條件(藥材粒度、煎煮器具、加水量、浸泡時間、煎煮時間、煎煮次數(shù)、加熱溫度、包煎與另煎以及先煎與后下等)、制備方式(單煎、分煎和合煎)、配伍和劑型等對指標(biāo)性物質(zhì)(成分)質(zhì)和量的影響。此類研究工作開展較多，也取得了一些有意義的結(jié)果。

摘要：目的基于數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)分析治療卵巢早衰中藥用藥規(guī)律。方法檢索近10年中國科技期刊數(shù)據(jù)庫（維普）、萬方數(shù)字化期刊全文數(shù)據(jù)庫、中國期刊全文數(shù)據(jù)庫（CNKI）等有關(guān)卵巢早衰的中醫(yī)文獻(xiàn)，篩選運(yùn)用EndnoteX8軟件、SPSS22.0建立數(shù)據(jù)庫并進(jìn)行統(tǒng)計分析及挖掘用藥規(guī)律。結(jié)果根據(jù)納入標(biāo)準(zhǔn)，共納入181篇文獻(xiàn)，其中使用藥物2628次，包括不同中藥148味。對使用頻次超過平均頻率以上的藥物進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)使用頻次前3位的單味藥物分別是熟地黃、當(dāng)歸、菟絲子；中藥治療卵巢早衰多選用補(bǔ)虛藥，其次是活血化瘀藥。中藥多歸肝經(jīng)、腎經(jīng)、心經(jīng)；聚類分析得到藥物組合42個。結(jié)論治療卵巢早衰多從肝、腎論治，用藥多以溫補(bǔ)為主，多從補(bǔ)虛及活血化瘀等方法進(jìn)行組方治療。卵巢早衰主要指女子于月經(jīng)初潮至40歲前，閉經(jīng)持續(xù)時間至少4個月或以上，而在激素檢查上出現(xiàn)2次或2次以上的血清促卵泡激素（FSH）＞40U/L，促黃體生成激素（LH）＞30U/L，同時雌二醇（E2）＜20pg/mL[1]。臨床上多表現(xiàn)為閉經(jīng)、不孕、絕經(jīng)期癥狀（潮熱、多汗、情緒改變、失眠、記憶力減退、感覺異常、性交困難等）、第二性征及生殖器官的萎縮[2]。隨著社會的發(fā)展，女性的壓力不斷增加，有研究表明患有卵巢早衰的女性有逐年上升趨勢，年齡也逐漸年輕化[3]。因此，卵巢早衰的早期診斷具有十分重要的臨床意義。現(xiàn)代中醫(yī)治療卵巢早衰多以中藥人工周期、中西醫(yī)結(jié)合治療、心理疏導(dǎo)等方法，治療效果顯著。因此筆者通過閱讀探究近10年來關(guān)于中醫(yī)藥治療卵巢早衰的文獻(xiàn)，對治療本病的中醫(yī)用藥規(guī)律進(jìn)行了整理，以期為臨床中醫(yī)治療卵巢早衰提供參考依據(jù)。

1資料與方法

1.1數(shù)據(jù)來源

選用收錄中國期刊全文數(shù)據(jù)庫（CNKI）、萬方數(shù)據(jù)知識平臺（WanFang）、維普期刊全文數(shù)據(jù)庫（VIP）中2010年1月—2020年5月以中藥治療卵巢早衰的臨床研究文獻(xiàn)，檢索關(guān)鍵詞為“卵巢早衰”“卵巢功能早衰”，檢索日期為2010年1月—2020年5月。

1.2入選標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）明確診斷為卵巢早衰，有相應(yīng)的診斷標(biāo)準(zhǔn)和療效評價標(biāo)準(zhǔn)；（2）治療組以中藥復(fù)方為主且病例數(shù)≥20例，有效率≥70%，均設(shè)有對照組。可合并其他西醫(yī)藥物、手術(shù)及中醫(yī)針灸等輔助治療手段。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）單純動物組織形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究文獻(xiàn)。（2）診療評價、具體方劑或診斷標(biāo)準(zhǔn)不清晰者。（3）會議論文、學(xué)位論文及綜述研究。從中篩選出與治療卵巢早衰有關(guān)的文獻(xiàn)180篇、復(fù)方222首。

摘要：目的通過對中藥復(fù)方制劑中川芎的入藥方式、制劑劑型和質(zhì)量控制等方面進(jìn)行統(tǒng)計，分析川芎在中成藥中的應(yīng)用和研究狀況。方法分別以《中國藥典》2005年版、部頒標(biāo)準(zhǔn)、文獻(xiàn)資料以及部分新藥標(biāo)準(zhǔn)為基礎(chǔ)，進(jìn)行含川芎制劑的劑型、入藥方式、薄層色譜和含量測定方法及條件的統(tǒng)計。結(jié)果含川芎的中藥成方制劑多為丸劑，其中川芎多以生藥粉入藥；有部分藥品標(biāo)準(zhǔn)建立了專屬性較強(qiáng)的川芎質(zhì)量控制方法，但還有很多未建立川芎薄層鑒別和質(zhì)量控制方法，在建立了控制方法的標(biāo)準(zhǔn)中，有的還不能反應(yīng)工藝與質(zhì)量的關(guān)系，甚至還有入藥方式與檢驗(yàn)結(jié)果不相匹配的情況。結(jié)論應(yīng)加強(qiáng)川芎在中藥復(fù)方制劑中質(zhì)量控制的研究。

關(guān)鍵詞：川芎；制劑；質(zhì)量控制

川芎為傘形科植物川芎LigusticumchuanxiongHort.的干燥根莖，為常用中藥，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為中品。具有活血行氣、祛風(fēng)止痛的功效，被譽(yù)為“血中氣藥”。用于月經(jīng)不調(diào)、經(jīng)閉痛經(jīng)、癥瘕腹痛、胸脅刺痛、跌打腫痛、頭痛、風(fēng)濕痹痛等癥。在臨床上應(yīng)用廣泛，如川芎茶調(diào)散、速效救心丸、九味羌活丸、越鞠丸、千金止帶丸等。近年來報道川芎及川芎為主的復(fù)方對冠心病心絞痛有良效，經(jīng)過配伍可治療三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛、末梢神經(jīng)炎、缺血性腦病等。此外川芎可用于美容、代茶飲、制作耳枕輔助治療高血壓病等。據(jù)統(tǒng)計，在《中國藥典》(2005年版)［1］收載的529個成方制劑中，有87個含有川芎，占《中國藥典》所載中成藥總數(shù)的16.4%。川芎主要含揮發(fā)油、生物堿、有機(jī)酸等成分,相應(yīng)成分中主要組成部分依次為藁本內(nèi)酯（ligustilide）、川芎嗪（chuanxiongzine）、阿魏酸（ferulicacid）,此外還含有蛇床內(nèi)酯、新蛇床內(nèi)酯、咖啡酸、原兒茶酸、亞油酸、大黃酚、匙葉桉油烯醇等成分。

本文對《中國藥典》2005年版Ⅰ部（以下簡稱藥典），衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑(以下簡稱部頒標(biāo)準(zhǔn))第1冊至第20冊、2002～2007年的文獻(xiàn)資料（以下簡稱文獻(xiàn)）以及部分新藥標(biāo)準(zhǔn)中收載的678個含川芎中成藥的劑型和川芎入藥方式進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計，結(jié)合其所含成分的化學(xué)性質(zhì)和質(zhì)量控制，討論川芎的應(yīng)用及在中藥復(fù)方制劑中的質(zhì)量控制情況［2～17］。

1含川芎的制劑劑型統(tǒng)計

將部頒標(biāo)準(zhǔn)按4個時間段進(jìn)行統(tǒng)計，藥典、文獻(xiàn)、新藥單獨(dú)統(tǒng)計，其中有重復(fù)收載的，因其入藥方式或質(zhì)量控制方法不同，分別各自歸入藥典、部頒標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)(如川芎茶調(diào)散在藥典、部頒標(biāo)準(zhǔn)和文獻(xiàn)中均有收載)。結(jié)果見表1。

摘要：按照國家農(nóng)業(yè)農(nóng)村部公告第194號要求，在無抗養(yǎng)殖的環(huán)境下，新的養(yǎng)殖技術(shù)不斷涌現(xiàn)，作者通過認(rèn)真研究分析多個方面，現(xiàn)就中藥復(fù)方在生豬養(yǎng)殖應(yīng)用的可行性進(jìn)行研究探討。使用中藥復(fù)方制作的飼料添加劑，從而緩解了畜牧業(yè)在無抗飼養(yǎng)過程中出現(xiàn)的健康問題；通過增強(qiáng)對生豬機(jī)體非特異性抵抗力，間接影響特異性免疫抗體水平的產(chǎn)生，從而增加產(chǎn)品性能指標(biāo)，并減少因抗菌素被大量不合理地利用而造成的藥品殘留、對菌株耐藥等各種問題，以此保證動物源性食品安全和公民衛(wèi)生安全，從而增加了生豬養(yǎng)殖的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效益。

關(guān)鍵詞：中藥；無抗；生豬養(yǎng)殖；可行性

1研究背景

1.1國內(nèi)外研究背景

Moore等（1946）首先報告，在飼養(yǎng)中加入抗生素，可明顯增加肉雞的日增加。從此，人類對抗生素的研制與使用日益普遍。1950年底，美國FDA開始同意在動物飼養(yǎng)中應(yīng)用抗生素，并逐步為世界各國所使用。近70余年來，抗生素在動物疾病的防治、增加飼養(yǎng)效率、促進(jìn)家畜繁殖等方面都起到了很大效果，先后有六十多種抗生素廣泛應(yīng)用于家畜養(yǎng)殖業(yè)。據(jù)統(tǒng)計，世界上生產(chǎn)的抗生素中50%以上用作養(yǎng)殖業(yè)。美國國家健康憂思科學(xué)聯(lián)盟（UCS）曾預(yù)測:大約有70%的抗菌素和相關(guān)藥品被用于肉雞、生豬、肉牛等的飼料添加劑抗生素。2005年統(tǒng)計資料表明，全世界的年均抗菌素原料生產(chǎn)量大約為21萬t，而其中只有9.7萬t（近50%）用于家畜養(yǎng)殖業(yè)上。在第十屆中國全軍檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議上，我國動物細(xì)菌耐藥監(jiān)測中心副負(fù)責(zé)人馬越研究員曾表示：濫用抗菌素的現(xiàn)狀遠(yuǎn)比人們所想像的還要嚴(yán)重，全世界每年耗費(fèi)的抗菌素總量中90%都被用在食用動物上面，而其中90%以上都是用來增加動物飼養(yǎng)轉(zhuǎn)化率，而當(dāng)做飼料添加劑來應(yīng)用。數(shù)十年來，由于抗生素在中國家畜養(yǎng)殖業(yè)的長期使用歷史，為行業(yè)發(fā)展帶來經(jīng)濟(jì)效益的同時也產(chǎn)生了不少弊端。抗生素雖然有預(yù)防疫病、促進(jìn)繁殖和改善動物產(chǎn)品性能等功效，但它在畜牧、水產(chǎn)等養(yǎng)殖業(yè)中卻被大量地不合理應(yīng)用，造成了藥品殘留、對病菌耐藥等問題，嚴(yán)重危害著畜牧業(yè)、水產(chǎn)品的質(zhì)量。另外，抗生素還可經(jīng)由生物富集或水體等渠道進(jìn)入人類體內(nèi)，進(jìn)而危害人體的身體健康。近年來，全球各國都意識到了抗生素問題所產(chǎn)生的健康問題，在發(fā)達(dá)國家中已經(jīng)開始逐步普及不采用抗生素的動物飼養(yǎng)方式，即所謂無抗飼養(yǎng)方式，代表著動物健康飼養(yǎng)的新發(fā)展走向。也因此，瑞典最早于1986年踏出了一步，宣稱將全面禁止抗生素用作動物飼料添加劑。丹麥也先后限制了許多抗生素用作生長硫化促進(jìn)劑應(yīng)用，截至2008年，丹麥國內(nèi)養(yǎng)豬產(chǎn)品中抗生素的使用率比較歷史高峰時期已下降近50%。至2006年，所有歐盟國家已全部停用了所有抗生素成長硫化促進(jìn)劑。我國的無抗飼養(yǎng)技術(shù)自2000年起就有人研發(fā)，借助乳酸菌工程技術(shù)、中獸醫(yī)學(xué)技術(shù)等生物科學(xué)技術(shù)的運(yùn)用，在小區(qū)域內(nèi)進(jìn)行了無抗飼養(yǎng)，近年來，利用復(fù)合微生態(tài)制劑的無抗飼養(yǎng)見諸報告中，并有相當(dāng)?shù)膽?yīng)用效益，但因?yàn)榧夹g(shù)成熟度、養(yǎng)殖效果差等因素，目前尚未大面積普及。但通過環(huán)境管理的無抗養(yǎng)殖開始進(jìn)行規(guī)模化飼養(yǎng)并獲得了良好的業(yè)績。

1.2國家對無抗養(yǎng)殖的政策調(diào)整

摘要：血管內(nèi)環(huán)境的健康主要依賴于內(nèi)皮細(xì)胞的良好功能，而一氧化氮（NO）在維護(hù)血管內(nèi)皮功能、構(gòu)筑健康血管內(nèi)環(huán)境過程中起到了重要作用。中藥復(fù)方是中醫(yī)藥學(xué)發(fā)揮其治療作用的巨大優(yōu)勢，且因其化學(xué)組分的復(fù)雜性而具有多靶點(diǎn)的治療作用。研究表明，多種對心血管疾病具有確切療效的中藥復(fù)方能夠調(diào)節(jié)NO生物利用度、保護(hù)血管內(nèi)皮功能，這可能是它們發(fā)揮治療效應(yīng)的重要機(jī)制之一。文章將就近年報道的這些中藥復(fù)方作一綜述。

關(guān)鍵詞：一氧化氮中藥復(fù)方血管內(nèi)皮心血管疾病

隨著1998年諾貝爾醫(yī)學(xué)和生理學(xué)獎的頒發(fā)，血管內(nèi)皮細(xì)胞不再被認(rèn)為只是一道血液與血管壁之間的屏障，它在維護(hù)血管自身內(nèi)環(huán)境中的重要作用越來越為人注目。一氧化氮是內(nèi)皮細(xì)胞行使其正常生理功能的重要信息分子，NO生物利用度的降低與多種心血管疾病的發(fā)生密切相關(guān)。

1NO生物利用度與心血管疾病

目前已知血管內(nèi)皮細(xì)胞具有重要的內(nèi)分泌功能，由內(nèi)皮細(xì)胞所分泌的活性分子物質(zhì)主要用于維持血管擴(kuò)張和收縮功能的平衡、血凝和抗血凝的平衡、促炎癥與抗炎癥的平衡、過氧化與抗氧化狀態(tài)的平衡，這些平衡狀態(tài)的打破被稱之為內(nèi)皮功能的損傷［1，2］。由內(nèi)皮細(xì)胞所生成的NO具有多種生物學(xué)效應(yīng)，這主要包括［3］：通過cGMP（環(huán)鳥苷酸）途徑擴(kuò)張血管，維持血管的基礎(chǔ)張力；抑制血小板聚集與黏附；通過干擾白細(xì)胞黏附分子CD11／CD18與內(nèi)皮細(xì)胞表面形成的黏附鍵和抑制白細(xì)胞CD11／CD18表達(dá)，從而阻止白細(xì)胞與血管壁黏附；NO還能抑制平滑肌細(xì)胞DNA合成、有絲分裂以及增生。

可見NO幾乎參與了以上各個平衡狀態(tài)的維持，因此NO生物利用度的降低將直接導(dǎo)致內(nèi)皮功能的損傷，這可以表現(xiàn)為［4～6］血管內(nèi)皮依賴性舒張功能的減弱、血小板聚集的增加、白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的黏附、血管平滑肌增生等；長期內(nèi)皮功能不全［7］將導(dǎo)致高血壓、高膽固醇血癥、動脈粥樣硬化、冠心病、糖尿病血管病變等多種疾病。因此，如何提高NO生物利用度，保護(hù)血管內(nèi)皮功能，已經(jīng)成為我們研究中心和其他國際科研團(tuán)體在防治心血管疾病方面的研究重點(diǎn)。