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動物源性飼料檢測技術研究進展瘋牛病作為一種神經性、漸進性的動物疾病，其傳染的的頻率快、范圍廣，危害性較大，直接影響動物和人的安全。瘋牛病最早暴發在歐洲地區的英國，為英國以及歐洲養殖業帶來了極大損失。此類疾病發生主要原因是飼料中的牛肉、羊肉、腦、脊髓、內臟，污染了朊病毒，并且牛羊制品也會攜帶朊病毒。使用這些原料制作飼料，會傳播朊病毒，對動物以及人類構成威脅。

1顯微鏡檢測技術

顯微鏡檢測是一種應用較早的檢測技術，美國和加拿大最先使用，距今已有40年之久，也是歐盟唯一承認的動物源性飼料官方檢測方法。顯微鏡檢測主要低倍鏡檢測和生物顯微鏡檢測。低倍鏡主要用于監測飼料的顏色、形狀、粒度、硬度、氣味等各項物理性狀。而生物顯微鏡主要檢測飼料當中的細胞、組織結構。生物顯微鏡檢測時，一般需要將動物單蛋白粉碎、其粒度非常小，細胞結構容易被破壞，所以檢測的難度相對較大。若要使用生物顯微鏡檢測，需要研究者掌握扎實的生理以及解剖知識才能夠開展相關操作，并獲取較為準確的結果。飼料中的動物源性成分一般都是動物骨骼和肌肉，其中動物骨骼在133℃高溫下持續20min依然保持穩定，這可作為顯微鏡檢測技術的關鍵點。而用于顯微鏡檢測的肌纖維片段相對短小，且肌肉纖維的寬度和動物的影響狀況、飼料加工情況息息相關，所以無法將其作為動物源性飼料的判斷依據。所以在進行低倍鏡觀測時，哺乳動物的骨組織呈現出不透明的白色和乳白色石塊，禽類的骨組織在粉碎時更加容易破碎，末端呈現出尖銳的狀態。在高倍鏡下觀察，哺乳動物骨組織表面可以看到橢圓形或近似圓形的縫隙，縫隙之間有著細小的微管相連接，而魚骨組織一般都是呈現出平行排列的狀態，骨裂拉長呈現出紡錘形，裂縫之間有著明顯的微管結構。經驗豐富的高倍鏡檢測技術人員，可以檢測到最低添加量0.1%的動物源性飼料。

2PCR檢測技術

PCR檢測技術一般分為兩種手段，分別是傳統PCR檢測技術和實時熒光定量PCR檢測技術。2.1傳統PCR檢測。PCR是一種用于放大壙增特定DN段的分子生物學技術。動物細胞的細胞核和線粒體都有DNA，可作為PCR檢測技術的靶序列。線粒體DNA是一個比較理想的用于PCR檢測的靶基因，由于不同動物體存在許多拷貝線粒體基因組的模板數量遠遠超過了細胞核染色體基因模板，這就可以有效的增強PCR檢測的靈敏度。此外，由于許多動物線粒體的基因組已經被完全測定，并且很多已知的基因組能夠找到保守核苷酸序列，所以結合特定的引物，可有效提升PCR檢測的特異性。2.2實時熒光定量PCR檢測技術。該法是指在PCR反應體系中加熒光基因，利用熒光信號積累時監測實時熒光定量PCR技術，能在原有的反應體系當中，加入一條熒光標記探針，當探針保持完整時，報告基團的熒光信號就被淬滅基團所淬滅。通過收集熒光信號，可以對整個PCR檢測整體過程進行實施監控和動態分析。可以有效的避免傳統PCR檢測技術的耗時耗力，適合大批量的飼料樣品檢測。

3結束語

要切實有效保障飼料的健康安全、避免動物源性物質在飼料中出現，應該研究多樣化的動物源性飼料檢測技術，最大程度上確保動物及人類的生命安全。

作者:閆超 單位:河北省獸藥監察所