摘要：目的了解靈芝代謝產(chǎn)物對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用。方法①體質(zhì)量為18～22g昆明140只小鼠隨機(jī)分為7組，其中6組左前腋皮下注射S180，然后分別給予生理鹽水、腹腔注射含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基、環(huán)磷酰胺、腹腔注射含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基加抗血清組、口服含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基組和單純腹腔注射抗血清組處理，未注射S180的20只給予生理鹽水，一周后處死各組動(dòng)物觀察各組腫瘤質(zhì)量大小、血清TNF-α水平、血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶變化。結(jié)果腹腔注射含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基加抗血清組能有效減輕荷瘤小鼠的腫瘤質(zhì)量，其質(zhì)量減輕程度與環(huán)磷酰胺無(wú)差異。結(jié)論靈芝代謝產(chǎn)物中的羥基可能參與了抗腫瘤作用。

關(guān)鍵詞：靈芝代謝產(chǎn)物；TNF-α；腫瘤；羥基

靈芝是我國(guó)醫(yī)學(xué)寶庫(kù)中的靈芝屬藥、食兩用真菌。其在自然界生長(zhǎng)過(guò)程中必然要與細(xì)菌等自然界其他微生物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，而靈芝作為一種真菌，生長(zhǎng)速度要遠(yuǎn)慢于細(xì)菌，所以作為靈芝能獲勝的法寶之一可能就是其代謝產(chǎn)物，而真菌代謝產(chǎn)物的開(kāi)發(fā)早已被證明是非常有價(jià)值的，比如歷史上青霉素的發(fā)現(xiàn)就是例證，在這方面我國(guó)的發(fā)展步伐卻比較慢，靈芝代謝產(chǎn)物藥理作用的開(kāi)發(fā)也將豐富我國(guó)中藥的用途。對(duì)于靈芝代謝產(chǎn)物的研究目前并不多而且主要集中在其中靈芝多糖的測(cè)定上［1］。但靈芝的代謝產(chǎn)物是否能夠?qū)δ[瘤細(xì)胞有所作用？為解決這個(gè)問(wèn)題，我們進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。

1材料與儀器

1.1試劑環(huán)磷酰胺（CTX）注射液由上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)（生產(chǎn)批號(hào)為071002）。TNF-αELISA試劑盒購(gòu)于渤海生物公司。肝功能檢測(cè)試劑盒購(gòu)于上海榮盛公司。

1.2含靈芝的代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基取生長(zhǎng)于斜面固體培養(yǎng)基上的靈芝菌泥（約1cm2）接種于100ml液體培養(yǎng)基（含2%黃豆粉，2%蔗糖，0.075%的磷酸二氫鉀，0.03%的硫酸鎂），25℃100r/min條件下培養(yǎng)5d，用濾紙過(guò)濾后得到含靈芝的代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基。將這些培養(yǎng)基在-20℃條件下保存待用。

摘要：目的了解靈芝代謝產(chǎn)物對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用。方法①體質(zhì)量為18～22g昆明140只小鼠隨機(jī)分為7組，其中6組左前腋皮下注射S180，然后分別給予生理鹽水、腹腔注射含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基、環(huán)磷酰胺、腹腔注射含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基加抗血清組、口服含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基組和單純腹腔注射抗血清組處理，未注射S180的20只給予生理鹽水，一周后處死各組動(dòng)物觀察各組腫瘤質(zhì)量大小、血清TNF-α水平、血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶變化。結(jié)果腹腔注射含靈芝代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基加抗血清組能有效減輕荷瘤小鼠的腫瘤質(zhì)量，其質(zhì)量減輕程度與環(huán)磷酰胺無(wú)差異。結(jié)論靈芝代謝產(chǎn)物中的羥基可能參與了抗腫瘤作用。

關(guān)鍵詞：靈芝代謝產(chǎn)物;TNF-α;腫瘤;羥基

靈芝是我國(guó)醫(yī)學(xué)寶庫(kù)中的靈芝屬藥、食兩用真菌。其在自然界生長(zhǎng)過(guò)程中必然要與細(xì)菌等自然界其他微生物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)，而靈芝作為一種真菌，生長(zhǎng)速度要遠(yuǎn)慢于細(xì)菌，所以作為靈芝能獲勝的法寶之一可能就是其代謝產(chǎn)物，而真菌代謝產(chǎn)物的開(kāi)發(fā)早已被證明是非常有價(jià)值的，比如歷史上青霉素的發(fā)現(xiàn)就是例證，在這方面我國(guó)的發(fā)展步伐卻比較慢，靈芝代謝產(chǎn)物藥理作用的開(kāi)發(fā)也將豐富我國(guó)中藥的用途。對(duì)于靈芝代謝產(chǎn)物的研究目前并不多而且主要集中在其中靈芝多糖的測(cè)定上［1］。但靈芝的代謝產(chǎn)物是否能夠?qū)δ[瘤細(xì)胞有所作用？為解決這個(gè)問(wèn)題，我們進(jìn)行了如下實(shí)驗(yàn)。

1材料與儀器

1.1試劑環(huán)磷酰胺（CTX）注射液由上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)（生產(chǎn)批號(hào)為071002）。TNF-αELISA試劑盒購(gòu)于渤海生物公司。肝功能檢測(cè)試劑盒購(gòu)于上海榮盛公司。

1.2含靈芝的代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基取生長(zhǎng)于斜面固體培養(yǎng)基上的靈芝菌泥（約1cm2）接種于100ml液體培養(yǎng)基（含2%黃豆粉，2%蔗糖，0.075%的磷酸二氫鉀，0.03%的硫酸鎂），25℃100r/min條件下培養(yǎng)5d，用濾紙過(guò)濾后得到含靈芝的代謝產(chǎn)物培養(yǎng)基。將這些培養(yǎng)基在-20℃條件下保存待用。

摘要：從技術(shù)步驟、分析方法以及實(shí)際應(yīng)用三個(gè)方面對(duì)當(dāng)前藥用植物代謝組學(xué)研究領(lǐng)域的一些理論問(wèn)題和實(shí)踐中面臨的挑戰(zhàn)進(jìn)行綜述。

關(guān)鍵詞：藥用植物；代謝組學(xué)；功能基因組學(xué)

代謝組學(xué)是對(duì)生物體內(nèi)代謝物進(jìn)行大規(guī)模分析的一項(xiàng)技術(shù)［1］，它是系統(tǒng)生物學(xué)的重要組成部分（如圖1所示），藥用植物代謝組學(xué)主要研究外界因素變化對(duì)植物所造成的影響，如氣候變化、營(yíng)養(yǎng)脅迫、生物脅迫，以及基因的突變和重組等引起的微小變化，是物種表型分析最強(qiáng)有力的工具之一。在現(xiàn)代中藥研究中，代謝組學(xué)在藥物有效性和安全性、中藥資源和質(zhì)量控制研究等方面具有重要理論意義和應(yīng)用價(jià)值。另外，在對(duì)模式植物突變體文庫(kù)或轉(zhuǎn)基因文庫(kù)進(jìn)行分析之前，代謝組學(xué)往往是首先考慮采用的研究方法之一。目前，國(guó)外已有成功利用代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)擬南芥突變株進(jìn)行大規(guī)模基因篩選的例子，這為與重要性狀相關(guān)基因功能的闡明和選育可供商業(yè)化利用的轉(zhuǎn)基因作物奠定了基礎(chǔ)。

圖1系統(tǒng)生物學(xué)研究的四個(gè)層次略

目前，還有許多經(jīng)濟(jì)作物的全基因組測(cè)序計(jì)劃尚未完成，由于代謝組學(xué)研究并不要求對(duì)基因組信息的了解，所以在與這些作物有關(guān)的研究領(lǐng)域具有更大的利用價(jià)值，這也是其與轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白組學(xué)研究相比的優(yōu)勢(shì)之一。代謝組學(xué)研究涉及與生物技術(shù)、分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、化學(xué)計(jì)量學(xué)和信息學(xué)相關(guān)的大量知識(shí)，F(xiàn)iehn［2］對(duì)代謝組學(xué)有關(guān)的研究方向進(jìn)行了分類（見(jiàn)表1）。

1代謝組學(xué)研究的技術(shù)步驟

寵物犬營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病的調(diào)查

隨著人民生活水平的提高，犬已不再是單一作為看護(hù)、狩獵、偵察、畜牧等工作之用，越來(lái)越多的犬類，特別是小型犬，因其體型輕巧、性格溫順、聰明靈活，被城市以及近郊居民當(dāng)作寵物飼養(yǎng)；但由于人們養(yǎng)犬往往缺乏一定的專業(yè)知識(shí)，在寵物犬的飼養(yǎng)和管理上經(jīng)驗(yàn)不足，容易使它們患上各種疾病，給飼養(yǎng)者的精神和經(jīng)濟(jì)上帶來(lái)不小的損失，營(yíng)養(yǎng)代謝病是其中的一大類疾病。

營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病是營(yíng)養(yǎng)紊亂和代謝紊亂疾病的總稱，營(yíng)養(yǎng)紊亂是因?yàn)閯?dòng)物所需的某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的量供給不足或缺乏，或因某些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的過(guò)量而干擾了另一些營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用引起的疾病；而代謝紊亂是因體內(nèi)一個(gè)或多個(gè)代謝過(guò)程異常改變導(dǎo)致內(nèi)環(huán)境紊亂引起的疾病。原創(chuàng)：據(jù)南京市康樂(lè)寵物醫(yī)院門診部2006年2月、3月兩個(gè)月的資料記載，曾接觸到寵物犬產(chǎn)后癱瘓、睪丸萎縮、四肢無(wú)力站立、白內(nèi)障、幼犬生長(zhǎng)緩慢、急性胰腺炎等病例，經(jīng)過(guò)詢問(wèn)主人發(fā)病犬的癥狀與臨床檢查，初步判定其為缺乏（或過(guò)量）某一種營(yíng)養(yǎng)成分或微量元素而致，及時(shí)采取措施對(duì)癥治療，起到了明顯的效果。

1寵物犬營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病發(fā)生的比例與種類

經(jīng)過(guò)調(diào)查，發(fā)現(xiàn)動(dòng)物醫(yī)院寵物門診平均每天有20條狗（包括復(fù)診）前來(lái)就診，除了常見(jiàn)的傳染性疾病和內(nèi)科病外，患營(yíng)養(yǎng)代謝病的占15%。寵物犬的營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病主要有以下幾種：1、碳水化合物、脂肪和蛋白質(zhì)代謝性疾病；2、維生素代謝性疾病；3、礦物質(zhì)代謝性疾病。營(yíng)養(yǎng)代謝性疾病一般有病程時(shí)間長(zhǎng)、發(fā)病率高（特別是處于發(fā)育、妊娠、泌乳階段）、臨床癥狀多樣化、具有某一特征性器官的病理變化等特點(diǎn)。下頁(yè)表是南京市康樂(lè)寵物醫(yī)院2006年2月、3月份寵物犬營(yíng)養(yǎng)代謝病統(tǒng)計(jì)表。

寵物犬營(yíng)養(yǎng)代謝病分類統(tǒng)計(jì)表單位:只

摘要：從技術(shù)步驟、分析方法以及實(shí)際應(yīng)用三個(gè)方面對(duì)當(dāng)前藥用植物代謝組學(xué)研究領(lǐng)域的一些理論問(wèn)題和實(shí)踐中面臨的挑戰(zhàn)進(jìn)行綜述。

關(guān)鍵詞：藥用植物；代謝組學(xué)；功能基因組學(xué)

代謝組學(xué)是對(duì)生物體內(nèi)代謝物進(jìn)行大規(guī)模分析的一項(xiàng)技術(shù)［1］，它是系統(tǒng)生物學(xué)的重要組成部分（如圖1所示），藥用植物代謝組學(xué)主要研究外界因素變化對(duì)植物所造成的影響，如氣候變化、營(yíng)養(yǎng)脅迫、生物脅迫，以及基因的突變和重組等引起的微小變化，是物種表型分析最強(qiáng)有力的工具之一。在現(xiàn)代中藥研究中，代謝組學(xué)在藥物有效性和安全性、中藥資源和質(zhì)量控制研究等方面具有重要理論意義和應(yīng)用價(jià)值。另外，在對(duì)模式植物突變體文庫(kù)或轉(zhuǎn)基因文庫(kù)進(jìn)行分析之前，代謝組學(xué)往往是首先考慮采用的研究方法之一。目前，國(guó)外已有成功利用代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)擬南芥突變株進(jìn)行大規(guī)模基因篩選的例子，這為與重要性狀相關(guān)基因功能的闡明和選育可供商業(yè)化利用的轉(zhuǎn)基因作物奠定了基礎(chǔ)。

圖1系統(tǒng)生物學(xué)研究的四個(gè)層次略

目前，還有許多經(jīng)濟(jì)作物的全基因組測(cè)序計(jì)劃尚未完成，由于代謝組學(xué)研究并不要求對(duì)基因組信息的了解，所以在與這些作物有關(guān)的研究領(lǐng)域具有更大的利用價(jià)值，這也是其與轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白組學(xué)研究相比的優(yōu)勢(shì)之一。代謝組學(xué)研究涉及與生物技術(shù)、分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、化學(xué)計(jì)量學(xué)和信息學(xué)相關(guān)的大量知識(shí)，F(xiàn)iehn［2］對(duì)代謝組學(xué)有關(guān)的研究方向進(jìn)行了分類（見(jiàn)表1）。

1代謝組學(xué)研究的技術(shù)步驟

【摘要】結(jié)合文獻(xiàn)，分析代謝綜合征的中西醫(yī)發(fā)病特點(diǎn)，闡述了脾、肝、腎在脾虛濕盛、肝郁化熱、痰瘀互阻、虛損變癥等不同階段的相互關(guān)系和發(fā)病機(jī)理，分析了代謝綜合征的動(dòng)態(tài)演變和內(nèi)在的整體關(guān)聯(lián)性，提出及時(shí)處理脂肪代謝紊亂是防治代謝綜合征的關(guān)鍵，并為中西醫(yī)結(jié)合臨床處理代謝綜合征提供理論基礎(chǔ)。

【關(guān)鍵詞】代謝綜合征；病機(jī)；中醫(yī)

Abstract：Reviewtheliterature,weanalysisthemetabolicsyndrome(MS)pathogenesisofChineseandWesternMedicinefeatures,andexplorerelationshipsandpathogenesisofthespleen,liverandRenalatthedifferentstagesofMS:spleendeficiencyinthekidneydampness,heatofLiverdepression,phlegmhindrancewastingdisease,toAnalysisthemetabolicsyndrome''''sdynamicevolutionoftheoverallrelevanceinherent.Wecandrawtheresultthatitisthekeytopreventtimelyprocessingoffatmetabolismdisorderofmetabolicsyndrome.AnditprovidesabasistheoreticalguidingforclinicaltreatmentofmetabolicsyndromewiththeChineseandWesternmedicine

Keywords：metabolicsyndrome;Pathogenesis;TCM

代謝綜合征（MetabolicSyndrome，MS）是多種代謝異常成分聚集于同一體，并主要以心血管疾病為臨床終點(diǎn)的病理狀態(tài)。其病理非常復(fù)雜，病程較長(zhǎng)；胰島素抵抗是其核心特征。腹型肥胖是公認(rèn)的高危因素，脂肪代謝障礙在發(fā)病中起到關(guān)鍵作用，其中游離脂肪酸（freefattyacid，F(xiàn)FA）的異位（胰島β細(xì)胞、肝細(xì)胞、肌肉等）沉淀對(duì)非脂肪細(xì)胞產(chǎn)生毒性作用，是導(dǎo)致相關(guān)細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取和利用障礙、降低清除胰島素及胰島素抵抗的病理現(xiàn)象的根本原因［1］。因此，調(diào)節(jié)脂肪代謝紊亂是防治MS的首選有效措施之一。目前認(rèn)為MS是個(gè)漸進(jìn)的過(guò)程，初期多以血脂紊亂為主，漸見(jiàn)糖耐量低減，其后出現(xiàn)糖尿病。具體可涉及血脂紊亂、脂肪肝、糖尿病、高血壓病以及糖尿病后期的各種并發(fā)癥如心肌梗塞、腦梗塞、糖尿病性腎病、周圍神經(jīng)炎、骨質(zhì)疏松等。現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合研究表明MS病機(jī)可歷經(jīng)脾虛濕盛、肝郁化熱、痰瘀互阻、虛損變癥,而痰濕可貫穿于MS的整個(gè)病理過(guò)程。現(xiàn)僅從中醫(yī)理論探討其病機(jī)，對(duì)該病癥的防治提供參考。

1代謝綜合征的病因病機(jī)概述

我國(guó)是發(fā)展較快而資源相對(duì)匱乏的國(guó)家，人口已達(dá)到13億，經(jīng)濟(jì)建設(shè)發(fā)展的同時(shí)，人民健康和素質(zhì)有較大的提高，才能保障社會(huì)和諧與持久發(fā)展。在新的世紀(jì)，醫(yī)學(xué)衛(wèi)生戰(zhàn)線不僅要面臨新的傳染性疾病，社會(huì)變革、經(jīng)濟(jì)文化生活的變化勢(shì)必導(dǎo)致一些非傳染性疾病患病率逐漸乃至快速增加。代謝綜合征又稱代謝異常心血管綜合征，在我國(guó)已經(jīng)流行，它是一組心血管疾病危害因素的聚集與組合，諸如肥胖、高血壓、高血脂(血脂異常)、吸煙、糖尿病(血糖調(diào)節(jié)受損、異常)、炎癥、血凝增強(qiáng)、纖溶降低等因素的參與，導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化和心腦血管疾病增加以及2型糖尿病患病率持續(xù)增長(zhǎng)。沒(méi)有心肌梗死的糖尿病患者其8年生存率與患有心肌梗死的非糖尿病患者相當(dāng)。代謝綜合征正在威脅著人民的健康，也將增加社會(huì)經(jīng)濟(jì)、個(gè)人經(jīng)濟(jì)及心理負(fù)擔(dān)。

一、關(guān)于代謝綜合征的定義和診斷標(biāo)準(zhǔn)

Reaven在提出代謝綜合征(X綜合征)之前，即有死亡四重奏的名稱，即肥胖、高血壓、高血糖與高血脂構(gòu)成對(duì)心血管的威脅，以后DeFronzo提出胰島素抵抗綜合征，之后將代謝綜合征與胰島素抵抗綜合征兩者等同起來(lái)。近年，Reaven認(rèn)為代謝綜合征的基礎(chǔ)是胰島素抵抗與高胰島素血癥，胰島素抵抗綜合征所包含的內(nèi)容更廣泛，它還包括脂肪肝、睡眠呼吸暫停、多囊卵巢綜合征及某些惡性腫瘤的發(fā)生等，故認(rèn)為兩種綜合征不完全相同，代謝綜合征的提出比較切合實(shí)際。

國(guó)際上對(duì)代謝綜合征的定義和診斷標(biāo)準(zhǔn)尚未統(tǒng)一，WHO的診斷標(biāo)準(zhǔn)強(qiáng)調(diào)將胰島素抵抗作為基本要求并列入微量白蛋白尿測(cè)定，這顯然不適用于群體篩查和流行病學(xué)調(diào)查工作。美國(guó)膽固醇教育計(jì)劃(ATPⅢ)則規(guī)定，腹型肥胖、高血壓、血甘油三酯升高、高密度脂蛋白膽固醇降低和空腹血糖受損5項(xiàng)指標(biāo)中只要≥3項(xiàng)即可診斷為代謝綜合征，不必測(cè)定胰島素水平和微量白蛋白尿，更適合于群體篩查和臨床應(yīng)用。代謝綜合征發(fā)病率隨年齡增長(zhǎng)、體重增加、運(yùn)動(dòng)過(guò)少、食用碳水化合物過(guò)多及吸煙而增加。美國(guó)人肥胖超重率高，腹圍普遍較大，代謝綜合征患病率可高達(dá)24％。中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病學(xué)分會(huì)(CDS)采用WHO的標(biāo)準(zhǔn)，并根據(jù)中國(guó)當(dāng)前實(shí)際情況合理吸收兩者的長(zhǎng)處，做了兩點(diǎn)修改：一是肥胖定為體重指數(shù)≥28kg／m和(或)腰圍男性≥85cm，女性≥80cm；二是胰島素抵抗(HOMA胰島素抵抗指數(shù))以上1／4位點(diǎn)為切割點(diǎn)，但不作為代謝綜合征的基本判定指標(biāo)，例如在經(jīng)濟(jì)條件差的地區(qū)，已明確為糖尿病者可省略胰島素測(cè)定。由于所采用的診斷指標(biāo)不一，包括數(shù)值上的差異，各地區(qū)代謝綜合征患病率相差較大。

二、代謝綜合征與2型糖尿病和心血管疾病

代謝綜合征代表著一系列心血管疾病危險(xiǎn)因子的集聚狀態(tài)，它還包括糖尿病前期的糖調(diào)節(jié)受損和糖耐量減退。超重、肥胖、血脂異常相當(dāng)常見(jiàn)，高血壓又常見(jiàn)于肥胖，因而血管病變相當(dāng)多見(jiàn)。尤其大血管病變以動(dòng)脈粥樣硬化為突出的病理變化，導(dǎo)致心腦血管疾病和事件。動(dòng)脈粥樣硬化早在糖尿病前期、有胰島素抵抗和高胰島素血癥時(shí)已發(fā)生并有所發(fā)展，在多種心血管危險(xiǎn)因素的作用下，首先有血管內(nèi)皮細(xì)胞損害和功能異常，內(nèi)皮細(xì)胞可產(chǎn)生一些生物活性物質(zhì)，如NO、活性氧簇物質(zhì)(超氧陰離子)、前列腺素，內(nèi)皮素和血管緊張素Ⅱ以及趨化因子、黏附因子，使單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等白細(xì)胞黏附并游走到內(nèi)皮下間隙，富含膽固醇的脂蛋白進(jìn)入內(nèi)膜，而這些脂蛋白經(jīng)氧化和糖化后可為單核．巨噬細(xì)胞所攝取并轉(zhuǎn)變?yōu)榕菽?xì)胞。血管平滑肌細(xì)胞在炎癥因子和生長(zhǎng)因子作用下，可刺激血管平滑肌細(xì)胞遷移到內(nèi)膜并增生和分化，使平滑肌細(xì)胞從收縮表型轉(zhuǎn)變?yōu)榉置诒硇停纬芍緱l紋、脂肪纖維斑和粥樣斑塊。動(dòng)脈粥樣斑塊不穩(wěn)定(斑塊破裂)，最終可導(dǎo)致血栓形成而阻塞血管腔或血栓脫落致血管遠(yuǎn)端堵塞而發(fā)生相應(yīng)部位的梗死。代謝綜合征可有胰島素抵抗、游離脂肪酸、TNF、IL-6、C反應(yīng)蛋白、瘦素、抵抗素增加而脂聯(lián)素減少等多因素和多種細(xì)胞的相互作用，導(dǎo)致心腦血管和頸動(dòng)脈、下肢動(dòng)脈的復(fù)雜病變。

【摘要】目的探討腹腔感染致膿毒癥時(shí)重要器官生物喋呤、鐵代謝的病理生理意義。方法腹腔感染致膿毒癥模型采用盲腸結(jié)扎穿孔法(CLP),用反相高效液相分析法測(cè)定24只大鼠肝、肺、腎等組織生物喋呤含量，用分光光度法測(cè)定其鐵含量。結(jié)果膿毒癥大鼠2h時(shí)肝、肺、腎組織生物喋呤含量顯著增多，而鐵含量變化不顯著。結(jié)論生物喋呤參與了腹腔感染所致膿毒癥的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程，而與鐵代謝有待于進(jìn)一步研究。

【關(guān)鍵詞】膿毒癥生物喋呤鐵代謝

膿毒癥及常常并發(fā)的多器官功能不全綜合征(MODS)是內(nèi)、外科危重病人死亡的重要原因之一［1］，而生物喋呤（BH4）是膿毒癥主要的指標(biāo)。本研究利用膿毒癥大鼠模型，在不同時(shí)相觀察不同組織中生物喋呤與鐵代謝的指標(biāo)，籍以為MODS的防治尋求可能的途徑。

1材料和方法

1.1動(dòng)物分組雄性Wister大鼠24只,體重220～300g,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物動(dòng)物飼養(yǎng)1周以上,實(shí)驗(yàn)前夜禁食,自由飲水。采用盲腸結(jié)扎穿孔(CLP)致膿毒癥模型:2%戊巴比妥鈉(80mg/kg體重)腹腔麻醉后固定、鋪無(wú)菌洞巾,沿腹正中線作2cm切口,暴露盲腸,絲線結(jié)扎盲腸根部,避免腸梗阻,用18號(hào)針穿通盲腸3次,并留置1條寬2mm、兩頭貫通盲腸的橡皮片以防止針孔閉合。其后,將盲腸放回腹腔,逐層縫合腹部切口。動(dòng)物皮下注射林格氏液抗休克。動(dòng)物隨機(jī)分為以下兩組:(1)正常對(duì)照(n=6):麻醉后活殺,留取肝、肺、腎組織標(biāo)本待測(cè);(2)膿毒癥組(n=18):行CLP后,分別于2、8、16h活殺,留取肝、肺、腎組織標(biāo)本待測(cè)。

1.2觀察指標(biāo)和方法

【摘要】從技術(shù)步驟、分析方法以及實(shí)際應(yīng)用三個(gè)方面對(duì)當(dāng)前藥用植物代謝組學(xué)研究領(lǐng)域的一些理論問(wèn)題和實(shí)踐中面臨的挑戰(zhàn)進(jìn)行綜述。

【關(guān)鍵詞】藥用植物;代謝組學(xué);功能基因組學(xué)

代謝組學(xué)是對(duì)生物體內(nèi)代謝物進(jìn)行大規(guī)模分析的一項(xiàng)技術(shù)[1],它是系統(tǒng)生物學(xué)的重要組成部分(如圖1所示),藥用植物代謝組學(xué)主要研究外界因素變化對(duì)植物所造成的影響,如氣候變化、營(yíng)養(yǎng)脅迫、生物脅迫,以及基因的突變和重組等引起的微小變化,是物種表型分析最強(qiáng)有力的工具之一。在現(xiàn)代中藥研究中,代謝組學(xué)在藥物有效性和安全性、中藥資源和質(zhì)量控制研究等方面具有重要理論意義和應(yīng)用價(jià)值。另外,在對(duì)模式植物突變體文庫(kù)或轉(zhuǎn)基因文庫(kù)進(jìn)行分析之前,代謝組學(xué)往往是首先考慮采用的研究方法之一。目前,國(guó)外已有成功利用代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)擬南芥突變株進(jìn)行大規(guī)模基因篩選的例子,這為與重要性狀相關(guān)基因功能的闡明和選育可供商業(yè)化利用的轉(zhuǎn)基因作物奠定了基礎(chǔ)。

圖1系統(tǒng)生物學(xué)研究的四個(gè)層次略

目前,還有許多經(jīng)濟(jì)作物的全基因組測(cè)序計(jì)劃尚未完成,由于代謝組學(xué)研究并不要求對(duì)基因組信息的了解,所以在與這些作物有關(guān)的研究領(lǐng)域具有更大的利用價(jià)值,這也是其與轉(zhuǎn)錄組學(xué)和蛋白組學(xué)研究相比的優(yōu)勢(shì)之一。代謝組學(xué)研究涉及與生物技術(shù)、分析化學(xué)、有機(jī)化學(xué)、化學(xué)計(jì)量學(xué)和信息學(xué)相關(guān)的大量知識(shí),Fiehn[2]對(duì)代謝組學(xué)有關(guān)的研究方向進(jìn)行了分類(見(jiàn)表1)。

1代謝組學(xué)研究的技術(shù)步驟

摘要：肝藥酶在藥物代謝中具有十分重要的作用。對(duì)肝藥酶的研究方法中，以動(dòng)物肝臟或肝細(xì)胞為基礎(chǔ)，構(gòu)建體外肝代謝系統(tǒng)是體外代謝研究中最重要的環(huán)節(jié)之一。對(duì)體外肝代謝的研究，主要是利用肝微粒體、基因重組CYP450酶系、肝細(xì)胞培養(yǎng)、肝組織切片及離體肝灌流系統(tǒng)等方法。本文綜述近年國(guó)內(nèi)外所應(yīng)用的不同體外肝代謝系統(tǒng)，并對(duì)各體外代謝研究方法進(jìn)行比較，指出根據(jù)各系統(tǒng)的特性、不同的實(shí)驗(yàn)要求和目的，選擇適當(dāng)?shù)难芯糠椒ǖ闹匾浴?/p>

關(guān)鍵詞：細(xì)胞色素P450酶；肝微粒體；肝細(xì)胞培養(yǎng)；肝組織切片；離體肝灌流

藥物代謝（drugmetabolism）一般是指藥物的生物轉(zhuǎn)化（drugbiotransformation）。藥物經(jīng)生物轉(zhuǎn)化后，可引起藥物的藥理活性或∕和毒理活性的改變。因此，研究藥物的生物轉(zhuǎn)化，明確其代謝過(guò)程，對(duì)新藥開(kāi)發(fā)、新劑型設(shè)計(jì)及制定合理的臨床用藥方案等方面都具有重要的指導(dǎo)意義。肝臟是藥物生物轉(zhuǎn)化的重要器官，含有參與藥物代謝重要的酶系（細(xì)胞色素P450酶，cytochromeP450，CYP450)，該酶系參與藥物及各種內(nèi)源性和外源性化合物在體內(nèi)的代謝過(guò)程。CYP450酶系由三十多種同工酶（亞型）組成，主要有CYP1、CYP2、CYP3三大家族［1］。本文所介紹的各種體外代謝系統(tǒng)均含有一種或多種CYP450酶的同工酶，為研究藥物體外代謝提供了研究的對(duì)象和基礎(chǔ)。動(dòng)物肝體外代謝研究可以較好地排除體內(nèi)因素干擾，直接觀察酶對(duì)底物代謝的選擇性，為整體試驗(yàn)提供可靠的科學(xué)依據(jù)。以肝臟為基礎(chǔ)的體外代謝系統(tǒng)主要包括肝微粒體、基因重組CYP450酶系、肝細(xì)胞、肝組織切片及離體肝灌流。

1肝微粒體

1.1肝微粒體的制備

多數(shù)采用差速離心法［2］，通過(guò)高速離心使微粒體與其他成分分離，操作簡(jiǎn)單，無(wú)需其他試劑輔助。但較耗時(shí)，設(shè)備要求高，使該法的普及和深入研究受到一定的限制。針對(duì)這些情況，可采用試劑輔助分離的方法［3］，在離心前額外加入一定比例的PEG6000或CaCl2，促進(jìn)微粒體沉降。此法對(duì)設(shè)備要求降低，并縮短了實(shí)驗(yàn)周期。肝微粒體的制備過(guò)程均應(yīng)在4℃下進(jìn)行。正確、合理地選擇緩沖液，能起到良好介質(zhì)的作用，按比例加入后進(jìn)行肝組織的破碎和勻漿，才可有效分離肝微粒體和避免細(xì)胞器受損。