導(dǎo)語：如何才能寫好一篇微生物培養(yǎng)方法，這就需要搜集整理更多的資料和文獻(xiàn)，歡迎閱讀由公務(wù)員之家整理的十篇范文，供你借鑒。

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微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基質(zhì)量的好壞、配制使用和保存是否正確等直接影響到檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。現(xiàn)就微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)量控制方法淺談如下：

1　培養(yǎng)基的儲(chǔ)存

干粉培養(yǎng)基應(yīng)保存在陰涼干燥處，避免陽光直射。開瓶后的干粉培養(yǎng)基易吸濕，應(yīng)注意防潮并在6個(gè)月內(nèi)用完。應(yīng)定期對(duì)儲(chǔ)存中的培養(yǎng)基進(jìn)行常規(guī)檢查，如容器密閉性復(fù)查、首次開封日期、內(nèi)容物的感官檢查，如果培養(yǎng)基發(fā)生結(jié)塊、顏色異常和其他變質(zhì)跡象就不能再使用。

2　培養(yǎng)基的制備

稱量時(shí)要用專用的角匙，避免交叉污染。復(fù)水時(shí)不得用銅鍋或鐵鍋，以防有離子混入培養(yǎng)基中，影響微生物的生長(zhǎng)。含有瓊脂粉的培養(yǎng)基，在加熱溶解之前可以浸泡數(shù)分鐘：加熱培養(yǎng)基時(shí)一定要進(jìn)行攪拌。為避免燒焦和沸騰溢出，對(duì)于少量的培養(yǎng)基最好使用沸水浴進(jìn)行加熱。一般培養(yǎng)基采用濕熱滅菌，即高壓蒸汽滅菌，通常是121℃ 15min；含糖或特殊培養(yǎng)基，按照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或生產(chǎn)商提供的說明滅菌。培養(yǎng)基配方要求的pH為滅菌或消毒后的pH值，應(yīng)在25℃溫度下采用精密酸度計(jì)進(jìn)行測(cè)量，固體瓊脂培養(yǎng)基應(yīng)以特殊的膠體表面測(cè)量電極進(jìn)行測(cè)量。使用過程中，如果需要調(diào)整培養(yǎng)基的pH，應(yīng)用1mol/L NaOH或1mol/L HCL調(diào)整，注意不可反復(fù)調(diào)pH，否則會(huì)影響培養(yǎng)基的滲透壓。滅菌以后的培養(yǎng)基應(yīng)該迅速冷卻至所需溫度并妥善保存。

3　培養(yǎng)基的性能測(cè)試

3.1　外觀控制：制備好的培養(yǎng)基應(yīng)有相應(yīng)的顏色，一般的培養(yǎng)基應(yīng)澄清、無渾濁、無沉淀。使用前應(yīng)檢查培養(yǎng)基的顏色是否發(fā)生變化，是否蒸發(fā)/脫水。

3.2　污染控制：從每批制備好的培養(yǎng)基中選取部分進(jìn)行污染測(cè)試(無菌試驗(yàn))，確定無微生物生長(zhǎng)方可使用。

3.3　性能測(cè)試

3.3.1　測(cè)試菌株：選擇測(cè)試菌株是具有其代表種的穩(wěn)定特性并能有效證明實(shí)驗(yàn)室特定培養(yǎng)基最佳性能的一套菌株，應(yīng)來自國(guó)際/國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)菌種保藏中心ATCC標(biāo)準(zhǔn)菌株，菌株的選擇參考衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T232-2002《商業(yè)性微生物培養(yǎng)基質(zhì)量檢驗(yàn)規(guī)程》。

3.3.2　定量測(cè)試方法：常用改良Miles-Misra法。測(cè)試菌株、過夜培養(yǎng)物10倍遞增稀釋；測(cè)試平板和參照平板劃分為4個(gè)區(qū)域并標(biāo)記；從最高稀釋度開始，分別滴一滴稀釋液于試驗(yàn)平板和對(duì)照平板標(biāo)記好的區(qū)域；將稀釋液涂滿整個(gè)1/4區(qū)域，37℃培養(yǎng)18h；對(duì)易計(jì)數(shù)的區(qū)域計(jì)數(shù)，按公式計(jì)算生長(zhǎng)率(生長(zhǎng)率=待測(cè)培養(yǎng)基平板上得到的菌落總數(shù)/參考培養(yǎng)基平板上獲得的菌落總數(shù))。非選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.7，選擇性培養(yǎng)基上目標(biāo)菌的生長(zhǎng)率應(yīng)不低于0.1。

3.3.3　半定量測(cè)試方法：常用改進(jìn)的劃線法接種法。平板分AB-CD四區(qū)，共劃16條線，平行線大概相隔0.5cm，每條有菌落生長(zhǎng)的劃線記作1分，每個(gè)僅一半的線有菌落生長(zhǎng)記作0.5分，沒有菌落生長(zhǎng)或生長(zhǎng)量少于劃線的一半記作0分，分?jǐn)?shù)加起來得到生長(zhǎng)指數(shù)G。目標(biāo)菌在培養(yǎng)基上應(yīng)呈現(xiàn)典型的生長(zhǎng)，而非目標(biāo)菌的生長(zhǎng)應(yīng)部分或完全被抑制，目標(biāo)菌的生長(zhǎng)指數(shù)G大于6時(shí)，培養(yǎng)基可接受。

3.3.4　定性測(cè)試方法：常用平板接種觀察法。用接種環(huán)取測(cè)試菌培養(yǎng)物，在測(cè)試培養(yǎng)基表面劃平行直線。按標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的培養(yǎng)時(shí)間和溫度對(duì)接種后的平板進(jìn)行培養(yǎng)，目標(biāo)菌應(yīng)呈現(xiàn)良好生長(zhǎng)，并有典型的菌落外觀、大小和形態(tài)，非目標(biāo)菌應(yīng)是微弱生長(zhǎng)或無生長(zhǎng)。

總之，做好微生物檢驗(yàn)培養(yǎng)基的質(zhì)量控制是保證結(jié)果準(zhǔn)確的基礎(chǔ)和關(guān)鍵。

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關(guān)鍵詞：生物教學(xué)；創(chuàng)造性思維能力；培養(yǎng)

一、課堂教學(xué)中教師主導(dǎo)、學(xué)生主體是發(fā)展學(xué)生創(chuàng)造性思維的主陣地

新課程教學(xué)理念要求以教師為主導(dǎo)，學(xué)生為主體的教學(xué)模式進(jìn)行教學(xué)。也就是課堂上充分突顯學(xué)生發(fā)現(xiàn)問題、提出問題、分析問題、解決問題的過程，教師在學(xué)生的學(xué)習(xí)遇到困難時(shí)，需要給予學(xué)生適當(dāng)?shù)膯⑹?，以達(dá)到幫助學(xué)生克服困難的目的。

例如，在指導(dǎo)學(xué)生做還原糖、蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)時(shí)，有學(xué)生提出問題：為什么斐林試劑必須現(xiàn)配現(xiàn)用？斐林試劑使用時(shí)要混合后才能用，而雙縮脲試劑如果混合使用又會(huì)怎么樣？如果雙縮脲先入B液，后加入A液會(huì)怎樣？對(duì)于學(xué)生提出的問題，首先給予肯定，那么如何解答學(xué)生提出的問題，培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造性思維，這就需要教師的啟示，啟發(fā)學(xué)生從斐林試劑的實(shí)際成分和化學(xué)性質(zhì)入手，最終學(xué)生理解斐林試劑實(shí)際上用的就是新制Cu（OH）2，此時(shí)的氫氧化銅處于膠體狀態(tài)。如果放置過久的話，氫氧化銅完全沉淀，反應(yīng)無法發(fā)生，所以現(xiàn)配現(xiàn)用。先加氫氧化鈉是為銅離子和蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個(gè)堿性環(huán)境，如果混裝會(huì)生成氫氧化銅沉淀而使實(shí)驗(yàn)失敗，如果先加硫酸銅，會(huì)使溶液呈藍(lán)色而觀察不到現(xiàn)象。通過教師的啟發(fā)不僅使學(xué)生學(xué)到了生物知識(shí)，更重要的是培養(yǎng)了學(xué)生的創(chuàng)造性思維能力。

二、生物小組合作學(xué)習(xí)是學(xué)生培養(yǎng)創(chuàng)造性思維的有效形式之一

生物問題往往可以用不同的方式方法加以解決，通過小組合作學(xué)習(xí)的形式，每個(gè)學(xué)生都有機(jī)會(huì)提出自己的解題方法，同時(shí)，又能分享別人的解題方法，共同討論不同方法的優(yōu)缺點(diǎn)。

例如，在復(fù)習(xí)減數(shù)分裂同源染色體時(shí)，我在黑板上寫出“同源染色體”，要求學(xué)生4～5個(gè)人為一個(gè)小組，以小組形式圍繞“同源染色體”展開討論，我們所學(xué)過的高中生物知識(shí)哪些與“同源染色體”有關(guān)，有什么關(guān)系？通過討論分析，歸納總結(jié)，學(xué)生較好地完成了對(duì)相關(guān)知識(shí)的復(fù)習(xí)，通過小組合作實(shí)驗(yàn)有利于提高學(xué)生生物創(chuàng)造性思維能力的培養(yǎng)。

三、生物教學(xué)中設(shè)計(jì)合理猜想，也可以發(fā)展學(xué)生的創(chuàng)造性思維

在我們的教學(xué)中，創(chuàng)設(shè)一些情境，讓學(xué)生體會(huì)真實(shí)的問題，得出合理的猜想，并通過學(xué)生自主探索、動(dòng)手操作、合作交流等方法，檢驗(yàn)猜想的正確性，使生物的教學(xué)活動(dòng)成為具有無限樂趣的活動(dòng)，讓學(xué)生在活動(dòng)中不斷體會(huì)成功的喜悅，久而久之，他們的好奇心、求知欲及對(duì)生物的興趣就會(huì)充分體現(xiàn)在學(xué)習(xí)中。

例如，在學(xué)“免疫調(diào)節(jié)”一節(jié)時(shí)，教師播放“泡泡男的視頻”（免疫學(xué)歷史上的重要人物）。讓學(xué)生思考問題：內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的調(diào)節(jié)機(jī)制是什么？“泡泡男孩”能用意念感知病原體的存在嗎？“泡泡男孩”的內(nèi)分泌系統(tǒng)正常嗎？他能否借助甲狀腺激素直接殺滅病原體？哪種調(diào)節(jié)機(jī)制可以殺滅病原體？渴望媽媽擁抱的“泡泡男孩”為什么生活在封閉的環(huán)境中？由于情境的背景材料來源于生活，來源于社會(huì)實(shí)際，學(xué)生感到既熟悉，又奧妙無窮。

四、以學(xué)生動(dòng)手操作為基礎(chǔ)，積極訓(xùn)練思維，發(fā)展創(chuàng)新能力

思維往往是從動(dòng)作開始的，切斷活動(dòng)與思維的聯(lián)系，思維往往就不能得到較好發(fā)展，即動(dòng)手操作是最易于激發(fā)學(xué)生思維和想象的一種活動(dòng)。在此過程中，學(xué)生的求知欲和探索精神一旦被激發(fā)，學(xué)生的思維就會(huì)有創(chuàng)新火花閃現(xiàn)。教師恰當(dāng)?shù)乩眠@種狀態(tài)，可以誘導(dǎo)學(xué)生創(chuàng)新思維的發(fā)展。同時(shí)，在教學(xué)中，還要以有意識(shí)地訓(xùn)練學(xué)生的思維為重點(diǎn)發(fā)展創(chuàng)新能力，訓(xùn)練思維主要有兩個(gè)方面：一是發(fā)散思維訓(xùn)練。在教學(xué)中要采用靈活多樣的發(fā)散思維訓(xùn)練，循循善誘，啟發(fā)引導(dǎo)學(xué)生從多角度進(jìn)行大膽嘗試，提出合理、新穎的解決方法。由此達(dá)到開闊學(xué)生視野、培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)新能力之目的。二是創(chuàng)造性想象訓(xùn)練。沒有想象就沒有創(chuàng)新，創(chuàng)造性思維離不開想象。由此，教師應(yīng)提供材料，使學(xué)生把頭腦中原有的表象加以糅合和變幻，創(chuàng)造出新奇的與眾不同的巧妙解法。

五、要養(yǎng)成學(xué)生良好的性格，良好的個(gè)性是培養(yǎng)學(xué)生創(chuàng)造性思維的基本條件

人的創(chuàng)造性不僅受認(rèn)知因素的影響，而且還受個(gè)性的影響。如果沒有正確的學(xué)習(xí)目標(biāo)、遠(yuǎn)大的理想以及努力進(jìn)取、持之以恒的精神狀態(tài)，就不可能經(jīng)常自覺地進(jìn)行創(chuàng)造性的思考。因此，教師首先在教學(xué)中要引導(dǎo)學(xué)生樹立遠(yuǎn)大的目標(biāo)，經(jīng)常讓學(xué)生閱讀教材中的“細(xì)胞學(xué)說建立的過程”“科學(xué)家的故事”“科學(xué)前沿”等了解科學(xué)家的光輝思想，幫助學(xué)生樹立尊重科學(xué)、一切從實(shí)際出發(fā)、實(shí)事求是的態(tài)度，激勵(lì)學(xué)生努力學(xué)習(xí)，敢于創(chuàng)新，使學(xué)生明確學(xué)習(xí)的目的，樹立明確的目標(biāo)，從而產(chǎn)生持久的創(chuàng)造性思維的動(dòng)力。

其次，提倡學(xué)生勤思與多問。要想有創(chuàng)造，就必須勤于思考，在教學(xué)中老師應(yīng)鼓勵(lì)學(xué)生敢于質(zhì)疑問難。即使學(xué)生提出的問題非常幼稚，也是他頭腦思考的結(jié)果，教師也要耐心予以解釋，不可挫傷他們的積極性。

參考文獻(xiàn)：

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關(guān)鍵詞 高中生物習(xí)題 批判性思維 生物學(xué)教學(xué)

中圖分類號(hào) G633.91 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A

當(dāng)下較多的學(xué)生傾向于接受已有的結(jié)論，這種被動(dòng)的思維傾向使學(xué)生不關(guān)心知識(shí)的來龍去脈，更缺乏對(duì)課本知識(shí)或權(quán)威提出質(zhì)疑的內(nèi)在動(dòng)力。

《普通高中生物課程標(biāo)準(zhǔn)（實(shí)驗(yàn)）》的基本理念和課程目標(biāo)中均提出：倡導(dǎo)探究性學(xué)習(xí)，力圖促進(jìn)學(xué)生學(xué)習(xí)方式的改變，逐步培養(yǎng)學(xué)生批判性思維的能力等，并具體表現(xiàn)在教材中，如在人教版生物必修1第111頁和必修2第70、82頁以及必修3第26頁中都設(shè)立了“批判性思維”欄。

1 批判性思維的含義

批判性思維是一種思維過程、思維方法，具有積極思考、自主分析和提出新見的特征，通過求證、反思等手段，培養(yǎng)學(xué)生合理質(zhì)疑和科學(xué)批判的能力。教師要培養(yǎng)學(xué)生的批判性思維，可以從精神和技能這兩個(gè)方面出發(fā)，對(duì)學(xué)生進(jìn)行形式多樣的培養(yǎng)、訓(xùn)練，達(dá)到讓學(xué)生主動(dòng)質(zhì)疑、批判、自主思考的目的，從而提高學(xué)生的科學(xué)思維品質(zhì)，促進(jìn)其科學(xué)素養(yǎng)的提高。批判性精神是批判性思維的特點(diǎn)，是批判性思維產(chǎn)生和發(fā)展的動(dòng)力；批判性技能是進(jìn)行有效的批判性思維活動(dòng)所具備的方法和策略，并在此基礎(chǔ)上發(fā)展成提出批判性問題的能力、謬誤分析的能力等。

2 培養(yǎng)學(xué)生批判性思維的意義

2.1 有利于增強(qiáng)學(xué)生學(xué)習(xí)能力

高中生物課標(biāo)強(qiáng)調(diào)，在教學(xué)過程中要不斷培養(yǎng)學(xué)生的批判性思維能力，這不僅能夠增強(qiáng)學(xué)生對(duì)生物相關(guān)知識(shí)的理解，還能幫助學(xué)生構(gòu)建相關(guān)的生物知識(shí)框架。如在理解生物知識(shí)本源時(shí)，學(xué)生就可以運(yùn)用生物學(xué)的理論知識(shí)解釋生活中的客觀現(xiàn)象，然后運(yùn)用生物思維對(duì)其進(jìn)行概括、總結(jié)、歸納出相關(guān)的生物知識(shí)。

2.2 有利于提高學(xué)生學(xué)習(xí)主動(dòng)性

在學(xué)習(xí)過程中，如果學(xué)生質(zhì)疑課本上的知識(shí)，學(xué)生就會(huì)不斷提出問題。而不斷提出問題的過程就是不斷主動(dòng)學(xué)習(xí)的過程。學(xué)生不斷解決自己提出的疑問時(shí)，學(xué)習(xí)效率也就不斷增加，并不斷體驗(yàn)到成功的喜悅。這樣就形成良性循環(huán)，學(xué)生學(xué)習(xí)的主動(dòng)性也就得到了提升。

2.3 有利于學(xué)生創(chuàng)造性思維的培養(yǎng)

批判性思維和創(chuàng)造性思維是人的思維的兩種基本類型，批判性思維是創(chuàng)造性思維的基礎(chǔ)，創(chuàng)造性思維是批判性思維的發(fā)展，批判是創(chuàng)造的主要源泉。教師只有對(duì)學(xué)生進(jìn)行批判性思維能力的訓(xùn)練，他們的創(chuàng)造性思維才會(huì)有創(chuàng)新的方向，才能提高其創(chuàng)造性思維的準(zhǔn)確度，創(chuàng)新往往來源于批判。

3 高中生物習(xí)題教學(xué)中學(xué)生批判性思維的培養(yǎng)方法

在高中生物學(xué)教學(xué)時(shí)，教師可利用人教版教材中“批判性思維”欄目、開放性的習(xí)題等專門的欄目和問題來達(dá)到培養(yǎng)學(xué)生批判性思維的能力。也可以提供一些有爭(zhēng)議的觀點(diǎn)要求學(xué)生發(fā)表自己的看法，如生物科技的利弊的辯論等，或利用圖表題等培養(yǎng)批判性思維。

3.1 利用人教版教材中“批判性思維”欄目培養(yǎng)學(xué)生批判性思維

雖然人教版高中生物教材上“批判性思維”的欄目只有4個(gè)，但在教學(xué)中，教師應(yīng)把批判性思維的培養(yǎng)融合到整個(gè)教學(xué)中。人教版教材中“批判性思維”的內(nèi)容如表1。

3.1.1 為學(xué)生提供自己發(fā)現(xiàn)問題、自己思考的機(jī)會(huì)

學(xué)生通過模擬實(shí)驗(yàn)“細(xì)胞大小與物質(zhì)運(yùn)輸?shù)年P(guān)系”知道了細(xì)胞體積越大，其相對(duì)表面積越小，細(xì)胞的物質(zhì)運(yùn)輸?shù)男示驮降偷慕Y(jié)論。再通過教材批判性思維問題引導(dǎo)學(xué)生思考：“既然細(xì)胞越小，細(xì)胞表面積相對(duì)就越大，細(xì)胞的物質(zhì)運(yùn)輸?shù)男示驮礁撸?xì)胞體積不是越小越好嗎？”這樣可以使學(xué)生把所學(xué)的內(nèi)容與問題聯(lián)系起來。通過問題引起學(xué)生的注意，然后啟發(fā)學(xué)生再思考，從而達(dá)到培養(yǎng)學(xué)生批判性思維的能力。如教師可以給出一段材料或者是圖片，讓學(xué)生進(jìn)行分析并提出問題。學(xué)生主動(dòng)提出問題，要比教師直接給出結(jié)論效果要好的多。

3.1.2 引出學(xué)生的不同觀點(diǎn)，并使之理解

學(xué)生在學(xué)習(xí)完“基因、蛋白質(zhì)與形狀的關(guān)系”這個(gè)知識(shí)點(diǎn)后，教師給出問題“你如何評(píng)價(jià)基因決定生物體的性狀這一觀點(diǎn)？”這時(shí)一大部分學(xué)生給出的觀點(diǎn)就是“基因決定生物性狀”，少部分的學(xué)生可能會(huì)考慮到環(huán)境對(duì)性狀的作用。教師應(yīng)該對(duì)后一個(gè)答案讓學(xué)生進(jìn)一步的探討，然后組織學(xué)生集體討論出正確的答案，即性狀的形成往往是內(nèi)因與外因共同作用的結(jié)果，其中內(nèi)因起決定作用。教師要引導(dǎo)學(xué)生敢于追求新的觀念，借助實(shí)證理解不同觀點(diǎn)。

3.1.3 確保探討課題的時(shí)間，在反思中成長(zhǎng)

在學(xué)習(xí)完基因突變這一個(gè)知識(shí)點(diǎn)后，教師給出問題“有人認(rèn)為，自然條件下基因突變率很低，而且大多數(shù)基因突變對(duì)生物體是有害的，因此，它不可能為生物的進(jìn)化提供原材料。你認(rèn)為這樣的看法正確嗎？為什么？”這相當(dāng)于一個(gè)反思性的問題，其實(shí)批判性思維也是一種反思性行為，課題的解決也要經(jīng)過反復(fù)的思考。基因突變對(duì)生物有害還是有利，學(xué)生可以舉出很多的例子來證明，但是能不能為生物進(jìn)化提供原材料學(xué)生可能要爭(zhēng)論很久。通過這個(gè)探討的過程學(xué)生才能理解。

3.1.4 引出證據(jù)和根據(jù)，培養(yǎng)批判性思維

通過“實(shí)例一：血糖平衡的調(diào)節(jié)”的學(xué)習(xí)，學(xué)生理解了血糖的來源和去路，然后教師給出問題“既然血糖是提供能量的，血糖越多，能量供應(yīng)就越充足，血糖含量不是越高越好嗎？對(duì)此你持什么觀點(diǎn)？你的論據(jù)是什么？”學(xué)生很容易回答出血糖不是越高越好，這里關(guān)鍵的問題是如何證明自己的觀點(diǎn)。聯(lián)系激素的作用可以進(jìn)行血糖調(diào)節(jié)，教師引入血糖調(diào)節(jié)的模型實(shí)驗(yàn)，讓學(xué)生通過實(shí)驗(yàn)回答問題，能很好地培養(yǎng)學(xué)生批判性思維。

教師可以設(shè)計(jì)相關(guān)上述類似的題目來進(jìn)行教學(xué)，培養(yǎng)學(xué)生的批判性思維。如：藍(lán)藻中有葉綠體，因?yàn)樗苓M(jìn)行光合作用。蛋白質(zhì)肽鏈的盤曲和折疊被解開時(shí)，其特定的功能發(fā)生改變。分子的雙螺旋被解開時(shí)，其功能也將失去。在蛋白質(zhì)合成旺盛的細(xì)胞中DNA分子多，轉(zhuǎn)錄成的mRNA分子也多，從而翻譯成的蛋白質(zhì)就多，如胰腺細(xì)胞與口腔上皮細(xì)胞相比較就是如此。真核生物進(jìn)行有性生殖時(shí)，后代從雙親各獲得一半的DNA。凋亡細(xì)胞內(nèi)的基因表達(dá)都下降等。

3.2 利用開放性習(xí)題培養(yǎng)學(xué)生批判性思維

如人教版生物必修1第一章第二節(jié)細(xì)胞的多樣性和統(tǒng)一性“練習(xí)”的“拓展題”和章末“自我檢測(cè)”中的“思維拓展”。

拓展題：目前，對(duì)基因的研究可以說如火如荼，方興未艾。既然生物科學(xué)的研究已經(jīng)深入到基因水平，還需要研究細(xì)胞嗎？說說你的看法。

思維拓展：生命系統(tǒng)是由許多層次組成，其實(shí)我們周圍世界各種事物的結(jié)構(gòu)或組成與此類似。你能圖示你所在的學(xué)校的組成層次和相互關(guān)系嗎？由此，你體會(huì)到以系統(tǒng)的視角分析各種事物的好處有哪些？

從上面的題目中，可以看出拓展題目開放性比較大，教師在教學(xué)時(shí)也不必給出標(biāo)準(zhǔn)答案，但是要根據(jù)學(xué)生的具體情況把握教學(xué)的深度。通常在教學(xué)中學(xué)生練習(xí)的習(xí)題都是封閉式，有固定的標(biāo)準(zhǔn)答案，這種類型的題目容易將受試者預(yù)設(shè)、囚禁在有限的答案選擇中，而忽略受試者在作答時(shí)可能牽涉其中的個(gè)人人格特質(zhì)、興趣、情感、專長(zhǎng)而在開放度上受到限制。在這種慣性的影響下，學(xué)生往往也會(huì)產(chǎn)生一種凡是題中出現(xiàn)的條件都要用上的思維定勢(shì)，不能對(duì)題目進(jìn)行邏輯推理分析。

開放性習(xí)題與封閉式的習(xí)題不同，開放題中的有用信息和無用信息是混在一起，會(huì)產(chǎn)生干擾因素。這就要求學(xué)生在解題時(shí)，需要認(rèn)真分析信息與問題的關(guān)系，舍棄無用信息，充分利用有用信息，提高鑒別能力，從而培養(yǎng)學(xué)生思維的批判性。

生物學(xué)科是一門以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)的學(xué)科，實(shí)驗(yàn)的開放性能很好地培養(yǎng)學(xué)生批判性思維技能，所以教師還可以設(shè)計(jì)一些實(shí)驗(yàn)方面的習(xí)題。如實(shí)驗(yàn)過程中是否能確認(rèn)變量，找到關(guān)鍵的變量來判斷學(xué)生是否只會(huì)用唯一的答案原因形成單一的見解，是否能用多觀點(diǎn)，系統(tǒng)看待問題。

3.3 利用概念辨析習(xí)題培養(yǎng)學(xué)生的批判性思維

缺乏批判性思維的學(xué)生往往表現(xiàn)為缺乏辨別正誤、區(qū)別真?zhèn)蔚男判模狈Ω矣谫|(zhì)疑的態(tài)度。在教學(xué)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，概念辨析這種題型能將混淆的現(xiàn)象、概念和規(guī)律緊密聯(lián)系在一起。除教材中的“概念檢測(cè)”題外，教師還可將容易混淆的知識(shí)有針對(duì)性地設(shè)計(jì)為概念辨析題，讓學(xué)生經(jīng)常性地辨析容易混淆的知識(shí)。通過不斷地辨析對(duì)比，促進(jìn)學(xué)生掌握辨析的方法，提高學(xué)生辨別是非的能力，從而培養(yǎng)學(xué)生敢于質(zhì)疑的態(tài)度。

例：澳洲大陸原來沒有仙人掌植物，當(dāng)?shù)厝嗽鴱拿乐抟N作籬笆用，結(jié)果仙人掌大量繁殖，侵吞農(nóng)田。這一實(shí)例突出地說明了生物的哪一種特征（ ）

A. 遺傳和變異

B. 生殖和發(fā)育

C. 生長(zhǎng)和應(yīng)激性

D. 適應(yīng)一定環(huán)境和影響環(huán)境

從本題立意和考查要求看，主要體現(xiàn)了2個(gè)方面：① 抓住了學(xué)生的薄弱點(diǎn)，就生物的特征而言，應(yīng)激性和適應(yīng)性是較容易混淆的概念，學(xué)生只有真正理解應(yīng)激性和適應(yīng)性的本質(zhì)才能做出正確的判斷；② 滲透了概念辨析的基本方法――排除法，根據(jù)生物的特征可排除A、B選項(xiàng)，在C和D選項(xiàng)中只要辨析好應(yīng)激性和適應(yīng)性就可得出正確選項(xiàng)。本題通過對(duì)應(yīng)激性和適應(yīng)性的辨析以及排除法的應(yīng)用，培養(yǎng)了學(xué)生的質(zhì)疑態(tài)度，有利于學(xué)生“批判性思維”的培養(yǎng)。

3.4 利用圖表題培養(yǎng)學(xué)生的批判性思維

圖表題是一種客觀傳遞數(shù)據(jù)和信息的形式，有些數(shù)據(jù)與問題有直接關(guān)系，有些數(shù)據(jù)看起來與問題沒有關(guān)系，實(shí)質(zhì)存在著一定的間接關(guān)系。學(xué)生通過對(duì)圖表中數(shù)據(jù)和信息進(jìn)行多種角度的分析、解讀，對(duì)獲得的信息進(jìn)行選擇、評(píng)價(jià)和判斷，根據(jù)問題進(jìn)行推論，形成合理假設(shè)，然后歸納出支持問題的理由和根據(jù)。這種嚴(yán)格的思維過程，有利于培養(yǎng)學(xué)生具有判斷論據(jù)的準(zhǔn)確性和可靠性的意識(shí)與批判性思維能力。在生物高考試題中有很多此類圖表分析的題目，學(xué)生只有具備了批判性思維的技能，才能更好地解答。通過這類題的練習(xí)有利于培養(yǎng)學(xué)生思維的批判性，提高學(xué)生去偽存真、明辨是非的能力。在人教版教材有很多這種類型的題目，教師在教學(xué)中要充分地利用以更好地培養(yǎng)學(xué)生思維。

例：圖1是有白化和色盲兩種遺傳病的家族系譜圖。假設(shè)白化病的致病基因?yàn)閍，色盲的致病基因?yàn)閎，請(qǐng)回答：Ⅲ-8、Ⅲ-10的可能基因型是什么？如果Ⅲ-8和Ⅲ-10結(jié)婚，子女中只患一種病的概率是多少？同時(shí)患兩種病的概率是多少？

篇4

關(guān)鍵詞：微生物限度；無菌檢查；方法驗(yàn)證；影響因素；微生物檢測(cè)

微生物學(xué)檢查方法包括微生物限度檢查法和無菌檢查法。微生物限度檢查法是檢查非規(guī)定滅菌制劑及原輔料受微生物污染程度，包括細(xì)菌、霉菌等菌種的數(shù)目及控制菌檢查。無菌檢查法是檢查藥典要求的無菌藥品、原輔料等是否無菌。如外用制劑須檢查和驗(yàn)證銅綠假單胞菌和金黃色葡萄球菌；若制劑含藥材原粉等， 還需檢查和驗(yàn)證大腸菌群和（或） 沙門菌。通過不同給藥途徑，因此臨床給藥途徑在微生物限度檢查和方法驗(yàn)證中有著舉足輕重的地位。

1 方法驗(yàn)證的模式及影響因素

1.1 培養(yǎng)基的無菌檢查及菌株準(zhǔn)備 使用時(shí)應(yīng)仔細(xì)觀察培養(yǎng)基碟子， 檢查是否有微生物污染或干燥收縮。經(jīng)過預(yù)培養(yǎng)的培養(yǎng)基按照相應(yīng)測(cè)定的微生物， 選擇標(biāo)準(zhǔn)菌株（不超過5代） 試驗(yàn)?？刂凭€應(yīng)設(shè)定對(duì)照組， 以檢測(cè)其專屬性。

1.2 微生物方法驗(yàn)證的內(nèi)容

1.2.1 細(xì)菌、霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證內(nèi)容 至少進(jìn)行3次平行試驗(yàn)， 分別計(jì)算每次各試驗(yàn)菌的回收率。驗(yàn)證菌株為大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉菌、枯草桿菌。驗(yàn)證方法分試驗(yàn)組、菌液組、稀釋劑對(duì)照組以及供試品對(duì)照組，方法如下：試驗(yàn)組：采用平皿法計(jì)數(shù)時(shí)，每株試驗(yàn)菌均制備2個(gè)平皿；也可采用薄膜過濾法計(jì)數(shù)。菌液組：應(yīng)檢測(cè)添加的試驗(yàn)菌數(shù)。稀釋劑對(duì)照組：檢查供試液制備時(shí)，微生物受污染程度，采用薄膜過濾法計(jì)算其菌數(shù)。供試品對(duì)照組：定量取供試液，采用薄膜過濾法計(jì)算其供試品本底菌數(shù)。無菌檢查可采用：①薄膜過濾法：采用微孔濾膜攔截細(xì)菌，去除可溶性成分。驗(yàn)證重點(diǎn)：確定濾膜的適用性、沖洗方法以及沖洗液用量。②中和法：中和劑應(yīng)對(duì)微生物無毒性，與抑菌性成分結(jié)合后的產(chǎn)物，也應(yīng)對(duì)微生物無毒性。驗(yàn)證重點(diǎn)：確定中和劑有效，并證明對(duì)污染微生物無毒性。

1.2.2 控制菌檢查法的驗(yàn)證內(nèi)容 控制菌檢查包括大腸菌群、大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、沙門菌、銅綠假單胞菌和梭菌檢查。試驗(yàn)菌株嚴(yán)格按照規(guī)定檢查的控制菌，選取相應(yīng)的驗(yàn)證菌株。方法如下：試驗(yàn)組：按照相應(yīng)控制菌檢查法進(jìn)行檢查。采用薄膜過濾法時(shí)，添加試驗(yàn)菌應(yīng)選在最后一次沖洗液后， 過濾后方可注入培養(yǎng)基中。對(duì)照組：驗(yàn)證該檢查方法的專屬性。

1.2.3 細(xì)菌、霉菌、酵母菌計(jì)數(shù)方法的驗(yàn)證結(jié)果判斷指標(biāo) 根據(jù)上述試驗(yàn)結(jié)果，可計(jì)算供試品組的菌回收率、稀釋劑對(duì)照組的菌回收率。如果任意一次試驗(yàn)中試驗(yàn)組的菌回收率，低于70%，應(yīng)采用培養(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法等方法消除供試品的抑菌活性，并重新驗(yàn)證。

1.2.4 控制菌方法驗(yàn)證的結(jié)果判斷 按《中國(guó)藥典》2005年版規(guī)定，陰性菌對(duì)照組不得檢出陰性對(duì)照菌。如果試驗(yàn)組檢出試驗(yàn)菌，則按照相應(yīng)方法進(jìn)行控制菌檢查。如果試驗(yàn)組未檢出，則需重新驗(yàn)證?？刂凭鷻z查還應(yīng)設(shè)有專屬性試驗(yàn)。驗(yàn)證試驗(yàn)及結(jié)果的判斷：①目標(biāo)菌陽性對(duì)照管菌和供試品加目標(biāo)菌管生長(zhǎng)良好；②陰性對(duì)照管以及陰性菌對(duì)照必須無菌生長(zhǎng)。如果上述試驗(yàn)成立，表示可按照該方法進(jìn)行該品種的控制菌檢查。

1.3 特殊供試品的制備 由于供試品本身的特性，可能會(huì)產(chǎn)生假陰性。在正常生產(chǎn)過程中，利用供試品與微生物的差異，消除供試品對(duì)藥品中微生物的影響，從而準(zhǔn)確檢測(cè)藥品中微生物的真實(shí)含量，是較為普遍使用的方法。具體包括：①培養(yǎng)基稀釋法：取規(guī)定量供試品/供試液，加至培養(yǎng)基中，使單位體積內(nèi)的供試品濃度稀釋至無明顯抑菌作用。適用范圍：不能使用薄膜過濾法，抑菌活性較弱的樣品。驗(yàn)證重點(diǎn)：把握好培養(yǎng)基增加量與供試品/供試液不顯抑菌活性的關(guān)系。②離心沉淀法：利用沉降系數(shù)差異除去藥渣以及含抑菌活性的部分。適用范圍：不能采用薄膜過濾等方法的樣品。驗(yàn)證重點(diǎn)：設(shè)置有效離心率，確定能將藥渣、抑菌部分除去。③薄膜過濾法：采用微孔濾膜攔截細(xì)菌，去除可溶性成分。④中和法：中和劑應(yīng)對(duì)微生物無毒性，與抑菌性成分結(jié)合后的產(chǎn)物，也應(yīng)對(duì)微生物無毒性。

2 微生物檢查方法驗(yàn)證的難點(diǎn)問題

人們對(duì)藥品生產(chǎn)、保存和使用過程中，對(duì)于可能出現(xiàn)的微生物污染問題進(jìn)行了大量的研究考察。很多研究資料表明[1，2]：藥品中污染的微生物數(shù)量以及微生物種類有不確定性，在藥品生產(chǎn)環(huán)節(jié)中， 微生物污染存在著隨機(jī)性。因此，為了監(jiān)控藥品生產(chǎn)過程中的微生物污染。所有的藥品必須在安全性檢查后，才能應(yīng)用于臨床。無論是無抑菌性藥物還是抑菌性藥物，都要進(jìn)行微生物限度檢查， 特別是某些微生物在一定環(huán)境下可能受到損傷， 但當(dāng)服用至人體后， 條件適宜時(shí)仍可生長(zhǎng)繁殖，破壞人體健康。抑菌藥物內(nèi)微生物能夠?qū)θ梭w健康造成危害的情況必須警惕， 因此必須對(duì)抑菌性藥物進(jìn)行微生物限度檢查，但由于其本身的抑菌作用， 這嚴(yán)重影響了微生物的檢出。

3討論

藥品微生物限度檢查方法驗(yàn)證工作是錯(cuò)綜復(fù)雜的過程，控制不當(dāng)很難達(dá)到驗(yàn)證要求以及預(yù)想的試驗(yàn)效果。嚴(yán)格按照操作規(guī)范操作， 盡量避免試驗(yàn)過程中的誤差。

參考文獻(xiàn)：

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【關(guān)鍵詞】 微生物限度檢查方法驗(yàn)證；常規(guī)法；抑菌成分

【中國(guó)分類號(hào)】 R93.6【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】 A【文章編號(hào)】 1044-5511（2012）02-0541-02

作為中藥制劑質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)檢查項(xiàng)目?jī)?nèi)容之一的微生物限度檢查，是保證藥品使用安全的中藥工作，如今也越來越受到藥學(xué)工作者的重視。微生物限度檢查系非規(guī)定滅菌制劑及其原料、輔料受微生物污染程度的方法，檢查項(xiàng)目包括細(xì)菌數(shù)、酵母菌數(shù)、霉菌數(shù)及控制菌檢查。我國(guó)開展藥品的微生物檢驗(yàn)工作比較晚，直到1995年版的《中國(guó)藥典》才正式收載了微生物限度檢查項(xiàng)，2000版《中國(guó)藥典》雖然做了較大的修訂并且增收了以劑型載入的微生物限度標(biāo)準(zhǔn)，但沒有規(guī)定對(duì)含抑菌成分的藥品經(jīng)行處理，2005年版的《中國(guó)藥典》"微生物限度檢查"項(xiàng)下新增了微生物檢查方法學(xué)驗(yàn)證，這是對(duì)于歷年版藥典在微生物檢查法中的最重要補(bǔ)充。中藥制劑中均具有抑菌作用，由于抑菌活性的干擾，用常規(guī)法檢查微生物限度的結(jié)果不能真實(shí)反映出藥品中瘦微生物污染的情況。對(duì)此，經(jīng)行藥品檢驗(yàn)倩必須采用適當(dāng)?shù)姆椒?，如培養(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法、中和法或者離心沉淀法來消除供試液中的抑菌活性后，再根據(jù)《中國(guó)藥典》規(guī)定的方法經(jīng)行檢查。同時(shí)，所采用的檢查方法需進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，以確認(rèn)供試品的抑菌活性和保證測(cè)定方法的可靠性，從而提高藥品本身污染微生物的檢出率。為了對(duì)規(guī)范中藥制劑的微生物先對(duì)檢查法提供科學(xué)依據(jù)，更好地控制中藥制劑的為色和年歌舞先對(duì)檢查法提供科學(xué)依據(jù)。更好地控制中藥制劑的質(zhì)量，本文特地對(duì)近些年已經(jīng)建立微生物檢查法的一些中藥制劑及其驗(yàn)證研究情況作如下綜述。

1. 無抑菌成分的中藥制劑的檢查方法

當(dāng)中藥制劑中不含抑菌成分時(shí)，一般用常規(guī)法進(jìn)行微生物限度檢查。在吳宗彬［3］對(duì)重感靈片微生物限度經(jīng)行常規(guī)法檢查時(shí)，結(jié)果供試品中區(qū)中試驗(yàn)菌回收率試驗(yàn)均達(dá)到百分之七十以上，按照2010年版《中國(guó)藥典》微生物限度檢查法中的規(guī)定：衛(wèi)生文化年歌舞限度檢查回收率試驗(yàn)中，若試驗(yàn)組的菌回收率均不低于百分之七十，就按照供試液制備方法和計(jì)數(shù)法策動(dòng)供試品的細(xì)菌、霉菌及酵母菌的菌數(shù)。由此說明重感靈片無明顯的抑菌現(xiàn)象，可以采用常規(guī)法經(jīng)行細(xì)菌、霉菌和酵母菌的檢查、按照2010年版《中國(guó)藥典》微生物限度檢查法進(jìn)行控制菌的檢查［2］，結(jié)果，3批菌大腸埃希菌和3批大腸菌群檢查試驗(yàn)組均可檢出試驗(yàn)菌， 陰性組均無菌生長(zhǎng)，陰性對(duì)照菌均無生長(zhǎng)，說明重感靈片無明顯抑菌現(xiàn)象，可采用常規(guī)法進(jìn)行控制菌大腸埃希菌和控制菌大腸菌群的檢查。韋紅等［4］運(yùn)用常規(guī)法探討了該法對(duì)六味地黃丸微生物限度檢查的準(zhǔn)確性以及可靠性。結(jié)果表明，該供試品對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉5種試驗(yàn)菌的回收率均高于70％，故本品無抑菌作用，因此采用常規(guī)法可以進(jìn)行本品的微生物限度檢查。按照2010年版《中國(guó)藥典》微生物限度檢查法進(jìn)行控制菌檢

查，結(jié)果，控制菌檢查陽性菌生長(zhǎng)良好，說明本品對(duì)大腸埃希菌大腸菌群沒有抑菌作用；陰性菌均未檢出，表明該控制菌檢查方法的專屬性好，可用于控制菌檢查。趙娟［5］通過對(duì)通脈膠囊的微生物限度檢查研究，發(fā)現(xiàn)采用常規(guī)方法檢查， 該樣品對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、白色念珠菌的加菌回收率均高于70％，說明樣品對(duì)上述種菌均沒有抑制作用，所以可以用常規(guī)法可以進(jìn)行本品的微生物限度檢查。

韋紅等［6］采用常規(guī)法對(duì)黃連上清丸微生物限度檢查進(jìn)行研究。結(jié)果表明，該供試品使用常規(guī)方法對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌、白色念珠菌、黑曲霉5種試驗(yàn)菌的回收率均高于70％，稀釋劑對(duì)5種試驗(yàn)菌的回收率均高于70％，故本品無抑菌作用， 而且對(duì)控制菌檢查陽性菌生長(zhǎng)良好，陰性菌均未檢出。因此，采用常規(guī)法可以進(jìn)行本品的微生物限度檢查和控制菌檢查。

2.有抑菌成分的中藥制劑的檢查方法

中藥制劑所含的成分中有抑菌作用時(shí)，首先要選用適當(dāng)?shù)姆椒ǎ缗囵B(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法、離心沉淀法消除供試液抑菌活性后，再根據(jù) 2010年版《中國(guó)藥典》規(guī)定的方法進(jìn)行檢查。解翠珠等［11］通過采用常規(guī)法、稀釋法和薄膜過濾法對(duì)鹽酸小檗堿片微生物限度檢查進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)常規(guī)法對(duì)5株陽性試驗(yàn)菌株回收率均低于70％，說明鹽酸小檗堿片不能應(yīng)用常規(guī)法進(jìn)行微生物的檢查； 然而稀釋法對(duì)黑曲霉、 大腸桿菌回收率均高于70％； 薄膜過濾法對(duì)金黃色葡萄球菌、 枯草桿菌、 白色念珠菌回收率均高于70％，說明該樣品具有較強(qiáng)的抑菌活性，所以需要采用薄膜過濾法消除該供試品的抑菌活性。對(duì)于控制菌，采用稀釋法可以消除供試液對(duì)大腸埃希菌的抑菌性，因此可采用稀釋法進(jìn)行控制菌的檢查。張玉蘭等［12］通過對(duì)復(fù)方丹參片微生物限度檢查研究，參照2000年版 《中國(guó)藥典》、《藥品微生物檢驗(yàn)手冊(cè)》和2000年版《中國(guó)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范》收載的微生物限度檢查方法，運(yùn)用常規(guī)法、培養(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法3種方法比較。結(jié)果表明，常規(guī)法和培養(yǎng)基稀釋法均不能消除藥品中抑菌物質(zhì)干擾， 而薄膜過濾法相對(duì)檢出率高而且能充分濾除藥品中抑菌物質(zhì)，有效檢出該藥品中污染存活的細(xì)菌；該方法的陽性對(duì)照菌的平均回收率為82.11％。因此，可以用薄膜過濾法作為復(fù)方丹參片微生物限度檢查的方法。

余俊等［13］通過采用2005 年版 《中國(guó)藥典》（一部） 規(guī)定的常規(guī)法、培養(yǎng)基稀釋法進(jìn)行菌回收率比較試驗(yàn)，對(duì)銀黃顆粒、柴黃顆粒、清喉利咽顆粒、柴黃顆粒3種中成藥的微生物限度檢查進(jìn)行研究。結(jié)果表明， 這3種藥品在常規(guī)法檢測(cè)金黃色葡萄球菌回收率均低于70％。采用培養(yǎng)基稀釋法，金黃色葡萄球菌回收率均高于70％， 說明3種中成藥在常規(guī)法檢測(cè)時(shí)均有一定的抑菌作用，不能用此法進(jìn)行這3種中藥的微生物限度的檢查。采用培養(yǎng)基稀釋法對(duì)這3種中成藥的微生物限度檢查， 菌回收率均高于70％， 因此可以用培養(yǎng)基稀釋法作為復(fù)方丹參片微生物限度檢查的方法。豈春風(fēng)［14］通過對(duì)護(hù)肝片的微生物限度檢查進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，在3次獨(dú)立的平行的試驗(yàn)中，護(hù)肝片細(xì)菌計(jì)數(shù)采用常規(guī)法對(duì)金黃色葡萄球菌、 大腸埃希菌、 枯草芽孢桿菌回收率均低于70％， 有顯著的抑菌作用， 因此常規(guī)法不適用于護(hù)肝片細(xì)菌的檢查； 采用培養(yǎng)基稀釋法，霉菌及酵母菌回收率均高于70％， 所以可用稀釋法來檢測(cè)護(hù)肝片中的霉菌及酵母菌； 采用離心- 薄膜過濾法則護(hù)肝片中的金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌回收率均高于70％， 因此可用此方法來測(cè)定護(hù)肝片中的細(xì)菌數(shù)。

3.兼有抑菌和無菌成分的中藥制劑的檢查方法

一般情況下，由于中藥制劑中大多是復(fù)方配方，所以中藥制劑所含的成分較為復(fù)雜，有的中藥制劑對(duì)有些菌沒有抑菌作用，而對(duì)另外一些菌有抑菌作用。對(duì)于前者可采用常規(guī)法進(jìn)行微生物限度的檢查；后者要應(yīng)用培養(yǎng)基稀釋法、薄膜過濾法、 離心沉淀法或中和法消除供試液抑菌活性后，再根據(jù)《中國(guó)藥典》規(guī)定的方法進(jìn)行微生物限度的檢查。解翠珠等［7］通過采用常規(guī)法、薄膜過濾法和稀釋法對(duì)紫丹活血片微生物限度檢查進(jìn)行研究。該供試品接種5株陽性試驗(yàn)菌株，采用常規(guī)法結(jié)果對(duì)枯草桿菌、白色念珠菌回收率均低于70％，表明該供試品對(duì)這2種菌株有抑制作用，而對(duì)大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、黑曲霉菌回收率均高于70％， 說明紫丹活血片對(duì)這幾種菌無抑菌作用；而薄膜過濾法對(duì)枯草桿菌、白色念珠菌回收率均高于70％，表明薄膜過濾法對(duì)這兩種菌無抑菌作用。故紫丹活血片微生物限度檢查標(biāo)準(zhǔn)方法為細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)、酵母菌均需采用薄膜過濾法進(jìn)行測(cè)定； 采用常規(guī)法對(duì)控制菌大腸埃希菌進(jìn)行檢查及驗(yàn)證時(shí)，試驗(yàn)組若檢測(cè)不到試驗(yàn)菌，而采用稀釋法試驗(yàn)組均可檢出試驗(yàn)菌，陰性組均無菌生長(zhǎng)，陰性菌對(duì)照組均無生長(zhǎng)， 就可用稀釋法對(duì)控制菌檢查。汪成偉等［8］通過對(duì)桂枝茯苓膠囊微生物限度檢查的研究發(fā)現(xiàn)，大腸埃希桿菌、白色念珠菌及黑曲霉回收率均高于70％，而金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌回收率低于70％，因此大腸埃希桿菌、白色念珠菌及黑曲霉可采用常規(guī)法；采用培養(yǎng)基稀釋法，可使金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌的回收率高于70％， 表明采用培養(yǎng)基稀釋法可以對(duì)桂枝茯苓膠囊中的金黃色葡萄球菌及枯草芽孢桿菌的檢查。鄭麗莉等［9］通過采用常規(guī)法、薄膜過濾法和稀釋法對(duì)七葉神安片微生物限度檢查進(jìn)行研究。結(jié)果表明常規(guī)法5株菌種的回收率只有大腸埃希桿菌和白色念珠菌的大于70％，金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌和黑曲霉的回收率均低于70％，培養(yǎng)基稀釋法黑曲霉菌和枯草芽孢桿菌的回收率大于70％，培養(yǎng)基稀釋法和離心集菌培養(yǎng)基稀釋法對(duì)金黃色葡萄球菌的回收率仍低于70％，采用離心薄膜過濾法，金黃色葡萄球菌的回收率可超過70％，證明該供試品對(duì)金黃色葡萄球菌具有較強(qiáng)的抑制作用。因此，可用常規(guī)法對(duì)七葉神安片中大腸埃希桿菌和白色念珠菌的檢查，用培養(yǎng)基稀釋法對(duì)黑曲霉菌和枯草芽孢桿菌的檢查，用離心薄膜過濾法對(duì)金黃色葡萄球菌檢查。

陳建啟等［10］通過對(duì)清感九味丸微生物限度檢查的研究，可以看出采用常規(guī)法對(duì)大腸埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉回收率不低于70％，其它菌低于70％；培養(yǎng)基稀釋法對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌回收率仍低于70％，表明仍然不能消除其抑菌活性；采用離心- 薄膜過濾法對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌可消除其抑菌活性，2種種菌回收率高于70％。因此，清感九味丸對(duì)革蘭氏陽性菌的代表菌株金黃色葡萄球菌和藥品中常見的污染菌株枯草芽孢桿菌抑菌作用較強(qiáng)，常規(guī)法和培養(yǎng)基稀釋法回收率都達(dá)不到70％，只有用離心- 薄膜過濾各代表菌回收率才達(dá)到70％；對(duì)于控制菌采用常規(guī)法，結(jié)果試驗(yàn)組檢出試驗(yàn)菌，陰性菌對(duì)照組未檢出陰性對(duì)照菌，說明用常規(guī)法即可檢出大腸埃希菌、大腸菌群。

4.袋裝中藥煎煮劑的檢查

吳紅宇［15］采用中藥抽出包裝機(jī)對(duì)其醫(yī)院自制制劑消炎利膽一號(hào)在115 ℃和一定壓力下進(jìn)行密閉煎煮，煎煮液在常溫（20±5） ℃和冷藏貯存2種情況下，以時(shí)間為單位，按照衛(wèi)生部1990年版 《藥品衛(wèi)生檢查方法》 收載的內(nèi)服制劑檢查方法進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)檢查。結(jié)果，煎煮液在常溫下40 d細(xì)菌總數(shù)接近限制值，低溫冷藏在80 d細(xì)菌總數(shù)接近限制值。

5．總結(jié)

上述中藥制劑的微生物限度檢查法已經(jīng)建立，而對(duì)于新的中成藥或者沒有確定微生物限度檢查法的中成藥，其可能具有抑菌或抗菌作用，所以必須經(jīng)過驗(yàn)證試驗(yàn)才能確定這些中成藥的微生物限度檢查法。采用常規(guī)法檢驗(yàn)時(shí)，往往造成漏檢或檢查的結(jié)果有差異，為此進(jìn)行藥品檢驗(yàn)前必須采用適當(dāng)?shù)姆椒ㄏ┰嚻分兴幤烦煞謱?duì)微生物的抗菌或抑菌作用。由于中成藥是含有多種成分的復(fù)合制劑，具有抑菌作用的中成藥的抑菌作用的程度可能不同，抑菌活性所采用的方法也不盡相同。所以藥品生產(chǎn)企業(yè)和研究單位應(yīng)該根據(jù)中藥制劑自身的特點(diǎn)，在進(jìn)行藥品微生物限度檢查時(shí)，選擇可行的、有效的且操作簡(jiǎn)便、快速的方法。隨著中藥制劑的不斷發(fā)展，其微生物限度檢查方法也在日益完善。《中國(guó)藥典》藥品微生物限度檢查是以劑型為標(biāo)準(zhǔn)，而《美國(guó)藥典》（24版）則是以品種為標(biāo)準(zhǔn)收載。由于中成藥和化學(xué)藥各有特點(diǎn)，其微生物限度檢查法也不能生搬硬套，全部效仿國(guó)外。所以，應(yīng)盡快投入大量的人力、物力，有組織、有步驟地研究，以按照中藥自身的特點(diǎn)以及國(guó)外藥典中的精華部分來建立中藥制劑微生物限度檢查方法，人民群眾安全用藥、保證中藥制劑質(zhì)量提供重要的保證。

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關(guān)鍵詞：空氣微生物；微生物污染；微生物監(jiān)測(cè)

中圖分類號(hào)：X831

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：16749944（2017）8009102

1引言

人類的生存離不開大氣，空氣作為人類生存的必須條件以及重要物質(zhì)，它保證了人類進(jìn)行生產(chǎn)等活動(dòng)，但是，從另一個(gè)角度來看，有污染的也會(huì)威脅到人類健康。特別在現(xiàn)代社會(huì)中，隨著人口數(shù)量的急劇增長(zhǎng)，大地植被覆蓋面積減少，加上一些不正規(guī)的動(dòng)物養(yǎng)殖場(chǎng)和垃圾處理廠，如果沒有做到有效的衛(wèi)生防治措施，會(huì)造成十分嚴(yán)重的空氣污染?？諝庵械奈⑸飻?shù)量急劇上升，并且這些微生物中包含了大量威脅到人類健康的病原微生物，這些微生物會(huì)隨著人類的呼吸，通過呼吸道進(jìn)入人體肺部，可能造成呼吸道疾病或者肺部感染。所以，空氣微生物的監(jiān)測(cè)對(duì)于保護(hù)人類健康是十分有意義的。

2空氣微生物污染及其污染現(xiàn)狀

雖然空氣微生物不能被人類的肉眼所看到，但是其作為生態(tài)系統(tǒng)的一個(gè)組成部分，也是不可被忽視的?？諝馕⑸镆话阌梢恍┘?xì)菌、病毒、放線菌等細(xì)微生命體構(gòu)成，在不同的地方其組成濃度一般不同，空氣微生物的數(shù)量也是空氣質(zhì)量的重要標(biāo)準(zhǔn)?？諝馕⑸锏姆N類繁多，目前的研究表明，空氣中的真菌種類多達(dá)4萬多種，而細(xì)菌和放線菌的也有上千種。這些空氣微生物來自于地球表面的各個(gè)地方，如土壤，湖面等，并且人類的活動(dòng)也是空氣微生物的來源，其中，需要特別注意的是一些養(yǎng)殖場(chǎng)、垃圾處理廠等地方，由于有大量的動(dòng)植物，會(huì)導(dǎo)致空氣中出現(xiàn)大量微生物。這些空氣微生物并不會(huì)直接在大氣中存在，雖然一部分空氣微生物對(duì)于這種較干燥的環(huán)境以及紫外線有一定的抗性，但是空氣微生物在空氣中還是多以微生物氣溶膠的形式存在，此外，真菌會(huì)以單個(gè)孢子的形式存在于大氣中。微生物氣溶膠，簡(jiǎn)單的來說，就是存在于空氣中的一個(gè)分散體系，其實(shí)質(zhì)是一些固態(tài)或者液態(tài)的微粒，在這些微粒上依附著微生物。根據(jù)不同的空氣微生物種類，這些微生物氣溶膠顆粒的大小也是不同的，較小的微生物氣溶膠顆粒粒徑只有0.1μm，而較大的生物氣溶膠顆粒例如花粉的粒徑可以達(dá)到100μm。這些微生物氣溶膠在大氣中停留的時(shí)間不會(huì)太久，根據(jù)當(dāng)?shù)氐臍夂蚯闆r，都會(huì)帶動(dòng)微生物氣溶膠的運(yùn)動(dòng)，它們最終會(huì)在氣流的運(yùn)動(dòng)或者其它原因向下落到地表或者動(dòng)植物的表面。

近幾年，對(duì)空氣微生物的研究已經(jīng)取得了一定的發(fā)展，但是就目前國(guó)內(nèi)的傳染病狀況而言，情況不容樂觀。禽流感病毒依然在進(jìn)行大范圍的傳播，就如幾年前的肺炎一樣，席卷這片大地。如今，禽流感病毒從一個(gè)地區(qū)，通過大氣，傳播到另一個(gè)地方，對(duì)國(guó)內(nèi)甚至是全球都造成了較大的影響。因此，必須加大對(duì)空氣微生物的研究，減小空氣微生物污染的程度，并且需要將環(huán)境監(jiān)測(cè)和公共衛(wèi)生管理進(jìn)行相適應(yīng)的結(jié)合，保障人類的健康。

3基于微生物生長(zhǎng)的空氣采樣器

隨著社會(huì)的進(jìn)步，利用一些現(xiàn)代化的技術(shù)手段，經(jīng)過不同研究者的設(shè)計(jì)，目前已經(jīng)有了多種基于微生物生長(zhǎng)的空氣采樣器。最基本的有通過自然沉降的方法進(jìn)行采樣，這種方法即利用微生物自身的重力，讓空氣中的微生物顆粒緩慢的自然沉降，通過一段時(shí)間的采集，空氣中大部分微生物已經(jīng)落到下面帶有培養(yǎng)介質(zhì)的裝置上，即完成采集，同時(shí)進(jìn)行后續(xù)的培養(yǎng)。但是這種方法的缺點(diǎn)很明顯，一些懸浮在空氣中的小顆粒的微生物，不能被此方法檢測(cè)到，同時(shí)，外界空氣的流動(dòng)也會(huì)對(duì)此采樣方法的結(jié)果造成較大的影響，所以，這種方法一般僅僅作為一些菌粒子沉著的研究。為了避免上述采樣方法的缺陷，研究人員發(fā)明了通過靜電進(jìn)行采集的方法，并制造出了靜電沉著采樣器。這個(gè)儀器通過制造高壓靜電場(chǎng)，讓空氣中的微生物帶上一定量的電荷，這時(shí)，這些微生物就會(huì)被同時(shí)帶有相反電荷的采集面吸引，這樣就完成了空氣中微生物的采集工作。但是，有一個(gè)問題依然沒有得到解決，那就是采集器的采集范圍過小。這時(shí)候，動(dòng)力類的采集器便應(yīng)運(yùn)而生了，其實(shí)質(zhì)就是在動(dòng)力類空氣微生物采集器內(nèi)部設(shè)置了抽氣泵，對(duì)于動(dòng)力類空氣微生物采集器，可以進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)空氣抽取采集，相較于傳統(tǒng)的利用重力或者靜電力的采集器，動(dòng)力類空氣微生物采集器的采集范圍更大，并且采集過程更加快速，采集效率得到了質(zhì)的提升。

經(jīng)過采集器采集到的微生物，需要進(jìn)行進(jìn)一步的培養(yǎng)，一般來講，利用一些常規(guī)的培養(yǎng)基即可進(jìn)行。但是空氣的情況比較復(fù)雜，所以在微生物的培養(yǎng)過程中，需要根據(jù)實(shí)際情況添加適當(dāng)?shù)囊种苿┗蛘咂渌x用試劑，同時(shí)，空氣微生物的培養(yǎng)條件也是必須注意的。

4無需培養(yǎng)的快速微生物檢測(cè)方法

4.1需輔助試劑類

傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)方法因?yàn)橐M(jìn)行培養(yǎng)等操作，耗費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)，且結(jié)果誤差較大，已經(jīng)不能滿足現(xiàn)代市場(chǎng)的需求。隨著微生物實(shí)時(shí)熒光光電檢測(cè)技術(shù)的出現(xiàn)，便得到了社會(huì)廣泛的認(rèn)可，已經(jīng)在醫(yī)藥等行業(yè)得到普遍應(yīng)用。這項(xiàng)技術(shù)將傳統(tǒng)的微生物檢測(cè)技術(shù)與現(xiàn)代化的計(jì)算機(jī)技術(shù)相結(jié)合，將微生物的檢測(cè)時(shí)間大幅度縮短，并且由于自動(dòng)化技術(shù)的應(yīng)用，對(duì)于人力資源的投資也大大減少。其最根本的技術(shù)就是利用三磷酸腺苷與其他試劑的反應(yīng)，一般是與三磷酸腺苷酶進(jìn)行酶促反應(yīng)，通過添加熒光素來顯示反應(yīng)的信號(hào)，因?yàn)槿姿嵯佘沾嬖谟谒械纳镏校ㄟ^檢測(cè)這種反應(yīng)放出的信號(hào)，確定微生物的含量。這項(xiàng)微生物檢測(cè)技術(shù)在發(fā)達(dá)國(guó)家如美國(guó)以及日本已經(jīng)得到發(fā)展和應(yīng)用，相應(yīng)的此類產(chǎn)品也比較成熟。在國(guó)內(nèi)，此項(xiàng)技術(shù)也被應(yīng)用于食品的檢測(cè)以及衛(wèi)生監(jiān)督。

4.2無需輔助試劑類

雖然熒光檢測(cè)技術(shù)有其先進(jìn)性，但是在使用上，仍然不能避開較為高昂的試劑費(fèi)用，相較于此，一種新型的檢測(cè)方法優(yōu)勢(shì)更加明顯。這種新的檢測(cè)方法是通過分析生物體的代謝產(chǎn)物以及核黃酸，最終確定微生物的含量，雖然這種方法利用的原理仍然為熒光檢測(cè)原理，但是相較于傳統(tǒng)的熒光檢測(cè)技術(shù)，此方法不用等待酶促反應(yīng)的時(shí)間，能夠在瞬間得到數(shù)據(jù)。此外，這種方法與計(jì)算機(jī)科學(xué)以及自動(dòng)化技術(shù)相結(jié)合，發(fā)展成為一個(gè)實(shí)時(shí)O控系統(tǒng)，能夠?qū)崟r(shí)的提供檢測(cè)數(shù)據(jù)，這種設(shè)備普遍應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)，特別是藥品制造行業(yè)。因?yàn)樽詣?dòng)化技術(shù)的應(yīng)用，不僅做到了對(duì)微生物的監(jiān)測(cè)，從另一個(gè)角度看，藥品的生產(chǎn)過程沒有了人員的參與，也減少了由于人員參與制藥過程帶來的污染。

5結(jié)語

近年來，關(guān)于空氣污染話題的討論越演越烈，引起人們的極大關(guān)注，要想對(duì)此問題作出有效的解決方案，就要對(duì)空氣中微生物的含量進(jìn)行準(zhǔn)確的監(jiān)測(cè)，瞬時(shí)檢測(cè)系統(tǒng)的使用必然會(huì)成為將來的主流檢測(cè)方法，并且通過對(duì)其成因分析，進(jìn)行有效的治理，保障人類的健康。

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篇7

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關(guān)鍵詞 土壤微生物 分解作用 涂布平板法

中圖分類號(hào) G633.91 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 B

“土壤微生物的分解作用”是人教版高中生物必修內(nèi)容中的探究實(shí)驗(yàn)之一，旨在讓學(xué)生通過宏觀的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象了解微觀的實(shí)驗(yàn)原理，明白微生物在生態(tài)系統(tǒng)物質(zhì)循環(huán)中的重要作用。然而由于實(shí)驗(yàn)周期長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象較不明顯，開展該實(shí)驗(yàn)的學(xué)校寥寥無幾。

1 教材分析與實(shí)驗(yàn)條件選擇

在人教版“土壤微生物分解作用”的實(shí)驗(yàn)中，教材提出了2個(gè)參考案例。第一個(gè)案例，使用落葉為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，設(shè)置滅菌土壤為對(duì)照組，對(duì)比得出土壤微生物具有分解作用;第二個(gè)案例：使用淀粉為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過斐林試劑和碘液的顯色反應(yīng)，得出土壤微生物具有分解作用。對(duì)比發(fā)現(xiàn)，第二個(gè)案例實(shí)驗(yàn)時(shí)間適中，實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象較為明顯;同時(shí)復(fù)習(xí)了斐林試劑的使用方法，較適合開展實(shí)驗(yàn)教學(xué)。因此，筆者選用第二個(gè)案例（土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用），對(duì)“土壤微生物的分解作用”進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。

溫度、淀粉糊濃度和反應(yīng)時(shí)間是影響土壤微生物分解作用的主要因素。筆者選取了15°C、20°C、25°C、30°C和室溫等5個(gè)溫度，2%、4%、6%和8%等4個(gè)淀粉糊濃度以及5 d、7 d和9 d等3個(gè)反應(yīng)時(shí)間，探究它們對(duì)土壤微生物分解作用的影響。

特定土壤的pH是確定值，而pH的變化會(huì)影響土壤微生物的分解作用。在確定適宜的溫度、淀粉糊濃度和反應(yīng)時(shí)間之后，以pH為變量，繼續(xù)探究pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響。

為了使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具科學(xué)性，需要設(shè)置對(duì)照組。筆者在教材的基礎(chǔ)上增加了滅菌土壤浸出液作為第二對(duì)照組，排除了土壤浸出液中其他非生物因素的干擾，增加了實(shí)驗(yàn)的嚴(yán)謹(jǐn)性。

在教學(xué)研究中，有學(xué)者使用不同種類的土壤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以確定哪種土壤微生物的分解能力最強(qiáng)。土壤微生物分解能力的強(qiáng)弱，主要受微生物種類和數(shù)量的影響。因此，為了揭示土壤微生物數(shù)量對(duì)分解作用的影響，筆者根據(jù)《微生物實(shí)驗(yàn)》的相關(guān)內(nèi)容，采用涂布平板法，對(duì)實(shí)驗(yàn)的土壤微生物進(jìn)行計(jì)數(shù)，初步確定土壤微生物的分解能力。

綜上所述，“土壤微生物的分解作用”實(shí)驗(yàn)可劃分為三個(gè)小實(shí)驗(yàn)，分別是：（1） 土壤微生物對(duì)淀粉分解作用實(shí)驗(yàn);（2） pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響實(shí)驗(yàn);（3） 土壤微生物計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)。其中第一個(gè)小實(shí)驗(yàn)為主實(shí)驗(yàn)，第二、第三個(gè)小實(shí)驗(yàn)為擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)。

2 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.1 實(shí)驗(yàn)器材

實(shí)驗(yàn)器具：小燒杯、試管、三角瓶、玻璃棒、pH計(jì)、恒溫光照培養(yǎng)箱、牛皮紙、紗布。

材料和試劑：土壤、淀粉、斐林試劑、碘液、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、NaCl、稀HCl、稀NaOH、無菌水。

2.2 實(shí)驗(yàn)步驟

2.2.1 土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用

（1） 土壤浸出液的制備：按照課本介紹的方法制備。

（2） 淀粉糊的制作：分別稱取10 g、20 g、30 g和40 g淀粉，溶于500 mL開水中，充分?jǐn)嚢?，制成糊狀，得到濃度分別為2%、4%、6%和8%的淀粉糊。

（3） 滅菌：將蒸餾水、部分土壤浸出液、各濃度淀粉糊、實(shí)驗(yàn)所用的燒杯和試管等器皿放入滅菌鍋中滅菌。

（4） 加樣培養(yǎng)：按照課本介紹的方法，在無菌環(huán)境中操作加樣，并將實(shí)驗(yàn)溶液分別放入15°C、20°C、25°C和30°C的培養(yǎng)箱及室溫中培養(yǎng)

（5） 顯色反應(yīng)：按照課本介紹的方法取出實(shí)驗(yàn)溶液進(jìn)行顯色反應(yīng)。

2.2.2 pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響

（1） 土壤浸出液pH的測(cè)定和調(diào)節(jié)：使用北京哈納HI8424NEW型pH計(jì)測(cè)出土壤浸出液的原始pH值為8.12;使用稀HCl和稀NaOH溶液，將土壤浸出液的pH上下各調(diào)節(jié)1.5和3.0個(gè)pH單位，選擇5.12、6.62、8.12、9.62和11.12等5個(gè)pH作為實(shí)驗(yàn)pH。

（2） 制作淀粉糊、滅菌、加樣、培養(yǎng)與顯色反應(yīng)操作同2.2.1。

2.2.3 土壤微生物的計(jì)數(shù)（涂布平板法）

計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)包括配制細(xì)菌培養(yǎng)基、倒平板、制備土壤稀釋液、涂布和培養(yǎng)等五個(gè)步驟，具體操作同《微生物實(shí)驗(yàn)》教材。

3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1 土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用與溫度、淀粉糊濃度和分解作用的時(shí)間有關(guān)。30°C下，土壤微生物的分解作用最強(qiáng)烈，室溫（25°C～30°C）下次之，25°C、20°C和15°C下的分解作用依次減弱。土壤微生物對(duì)4%淀粉糊的分解作用最強(qiáng)，其次是2%、6%和8%。隨著時(shí)間的推移，土壤微生物對(duì)淀粉的分解作用逐漸增強(qiáng);培養(yǎng)的第5 d，已有顯色現(xiàn)象;第7 d顯色現(xiàn)象顯著;第9 d和第7 d的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象相差無幾。從顯色劑的顯色效果看，加入斐林試劑的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象更直觀明顯。淀粉被分解后，產(chǎn)生的葡萄糖與斐林試劑作用，生成很明顯的磚紅色沉淀;加入碘液后，實(shí)驗(yàn)溶液依舊變藍(lán)，只是顏色較對(duì)照組淺。這說明，一方面斐林試劑的顯色效果較顯著;另一方面，短時(shí)間里淀粉不能被分解殆盡。

3.2 pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響

pH為8.12的原始土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果最明顯，出現(xiàn)最多的磚紅色沉淀;弱酸（pH6.62）和弱堿（pH9.62）性的土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果出現(xiàn)較多的磚紅色沉淀，但均少于原始pH的土壤浸出液;強(qiáng)堿性（pH11.12）的土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果產(chǎn)生較少的磚紅色沉淀;強(qiáng)酸性（pH5.12）的土壤浸出液中，微生物對(duì)淀粉糊的分解作用結(jié)果產(chǎn)生最少的磚紅色沉淀。碘液的顯色反應(yīng)結(jié)果并沒有明顯的差別，說明只有部分淀粉被分解。

3.3 土壤微生物的計(jì)數(shù)

涂布平板結(jié)果顯示，土壤浸出液中微生物的含量約為668 889個(gè)/mL;根據(jù)之前的實(shí)驗(yàn)步驟得知，實(shí)驗(yàn)土壤浸出液濃度為0.1 g/mL，因此土壤中微生物的含量約為6 688 890個(gè)/g（表1）。有教學(xué)條件的學(xué)?？稍O(shè)計(jì)該實(shí)驗(yàn)，分析不同土壤微生物具有不同分解作用的原因，讓學(xué)生更深入地理解和掌握知識(shí)，培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)素養(yǎng)和探究精神。

4 討論

“土壤微生物的分解作用”實(shí)驗(yàn)中，材料易得，操作簡(jiǎn)單，可以在教學(xué)活動(dòng)中順利實(shí)施。許多學(xué)校由于實(shí)驗(yàn)時(shí)間較長(zhǎng)，影響教學(xué)安排，而很少開展這一探究活動(dòng)。但筆者發(fā)現(xiàn)，該實(shí)驗(yàn)不但可以在短時(shí)間內(nèi)完成，而且能開發(fā)出與之相關(guān)的教學(xué)實(shí)驗(yàn)，如pH對(duì)土壤微生物分解作用的影響、土壤微生物計(jì)數(shù)等，這對(duì)學(xué)生創(chuàng)新思維的培養(yǎng)大有裨益。如果學(xué)校教學(xué)條件有限，無法順利開展該實(shí)驗(yàn)，可由教師演示或者播放實(shí)驗(yàn)錄像，以取得一定的教學(xué)效果。

在本實(shí)驗(yàn)中，筆者并未以土壤類型為實(shí)驗(yàn)變量，探究不同土壤中微生物分解作用和微生物數(shù)量的異同。但學(xué)校在安排教學(xué)活動(dòng)時(shí)，可以將學(xué)生分組，不同小組以不同的土壤為研究對(duì)象開展實(shí)驗(yàn)。這樣既節(jié)約了時(shí)間，又可以達(dá)到很好的實(shí)驗(yàn)效果。

本研究確定的適宜實(shí)驗(yàn)條件，可以為廣大師生提供參考。各學(xué)校也可以借鑒筆者的思路，開展類似實(shí)驗(yàn)，并安排不同學(xué)生完成不同條件下的實(shí)驗(yàn)，最后匯總結(jié)果，探討比較。這不僅能幫助學(xué)生培養(yǎng)團(tuán)隊(duì)合作精神和創(chuàng)新實(shí)踐能力，也能激發(fā)學(xué)生對(duì)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的熱情，進(jìn)一步培養(yǎng)學(xué)生對(duì)生物學(xué)科的興趣。

參考文獻(xiàn)：

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關(guān)鍵詞： 微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué) 教學(xué)改革 創(chuàng)新能力

微生物學(xué)是生物學(xué)各專業(yè)的基礎(chǔ)必修課。同時(shí)也是一門應(yīng)用性和實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的學(xué)科，微生物實(shí)驗(yàn)技術(shù)廣泛滲透到現(xiàn)代生物技術(shù)各個(gè)領(lǐng)域，是現(xiàn)代生物技術(shù)的基礎(chǔ)［1］。微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)是微生物學(xué)重要的基礎(chǔ)教學(xué)環(huán)節(jié)，微生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)是微生物實(shí)驗(yàn)中的基本技能和基礎(chǔ)訓(xùn)練部分，只有掌握好基本技能和基礎(chǔ)知識(shí)，學(xué)生才能順利進(jìn)行微生物學(xué)和生物技術(shù)的其他實(shí)驗(yàn)。對(duì)微生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)進(jìn)行改革，旨在提高學(xué)生的實(shí)驗(yàn)基本操作技能，調(diào)動(dòng)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣和學(xué)習(xí)積極性，進(jìn)而提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量。

1.課程現(xiàn)狀分析

1.1微生物實(shí)驗(yàn)內(nèi)容多，教學(xué)任務(wù)重。由于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)涵蓋面廣，學(xué)生需要掌握的操作技能和知識(shí)點(diǎn)多，以沈萍主編的《微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)》為例，編入的實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目就有76個(gè)之多［2］，如果以傳統(tǒng)的教學(xué)方法來授課，難以在規(guī)定學(xué)時(shí)內(nèi)完成教學(xué)內(nèi)容。

1.2開設(shè)的實(shí)驗(yàn)多為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，綜合性實(shí)驗(yàn)和創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)太少，不利于學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。

1.3考核方式與評(píng)分方式欠合理。多數(shù)院校的評(píng)分方式為理論考核占70%，平時(shí)成績(jī)占20%，實(shí)驗(yàn)操作僅占10%。實(shí)驗(yàn)操作比重小，無法反映實(shí)驗(yàn)操作在課程學(xué)習(xí)中的地位和作用。

2.微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的思路

2.1通過微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革加強(qiáng)學(xué)生操作技能的訓(xùn)練，為學(xué)生從事生物技術(shù)的教學(xué)、研究打下良好的基礎(chǔ)。

2.2通過微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革，加大綜合性實(shí)驗(yàn)在微生物實(shí)驗(yàn)中的比例，加強(qiáng)對(duì)學(xué)生綜合分析能力的培養(yǎng)。

2.3通過微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革，提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。

2.4通過微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革，壓縮微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的課時(shí)，為進(jìn)行創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)提供必要的課時(shí)，增強(qiáng)學(xué)生的實(shí)踐能力，加大對(duì)創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。

3.微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的措施與方法

3.1整合優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容

為了保證微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)質(zhì)量，達(dá)到通過實(shí)驗(yàn)教學(xué)提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力和創(chuàng)新能力的目的［3］，我將微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)分為“基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)”、“綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)”和“創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)”三部分?！盎A(chǔ)實(shí)驗(yàn)”側(cè)重于學(xué)生實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)技能的訓(xùn)練，是一些驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)，使學(xué)生掌握一定的微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)知識(shí)和操作技能;“綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)”側(cè)重于訓(xùn)練學(xué)生對(duì)學(xué)習(xí)過的微生物學(xué)知識(shí)的綜合運(yùn)用能力；“研究性實(shí)驗(yàn)”是學(xué)生自主進(jìn)行的課題研究或參與老師的科研項(xiàng)目，注重學(xué)生創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。

微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容多、教學(xué)任務(wù)重，只有對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)內(nèi)容進(jìn)行整合，才有一定的課時(shí)開展選做實(shí)驗(yàn)和綜合設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)的教學(xué)，將多個(gè)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容密切相關(guān)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，整合成一個(gè)綜合性實(shí)驗(yàn)。

如：將培養(yǎng)基配制、高壓蒸氣滅菌、干熱滅菌、土壤微生物分離等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)整合為一個(gè)綜合性實(shí)驗(yàn)；將微生物純化與微生物的形態(tài)觀察，無菌操作接種等若干相關(guān)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)整合為一個(gè)綜合性實(shí)驗(yàn)；將革蘭氏染色、鞭毛染色、芽孢染色等與微生物制片染色有關(guān)的基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)整合為一個(gè)綜合性實(shí)驗(yàn)―微生物染色技術(shù)。這樣一方面節(jié)約了基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)課時(shí)，使學(xué)生有更多的課時(shí)用于創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)，另一方面使學(xué)生參與了整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程，接受了更多的基礎(chǔ)訓(xùn)練，具備了獨(dú)立進(jìn)行創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)的能力。

3.2調(diào)整實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的課程順序

根據(jù)理論教學(xué)的進(jìn)度，從形態(tài)觀察開始進(jìn)行實(shí)驗(yàn)教學(xué)是微生物實(shí)驗(yàn)教學(xué)的一般做法，這種安排對(duì)配合理論教學(xué)是有益的，但不便于教學(xué)內(nèi)容的整合，同時(shí)教學(xué)內(nèi)容簡(jiǎn)單，學(xué)生的學(xué)習(xí)積極性不高。我將課程順序調(diào)整為培養(yǎng)基配制、微生物分離與純化、微生物的形態(tài)觀察、微生物染色技術(shù)，讓學(xué)生用簡(jiǎn)單的化學(xué)物質(zhì)配制成培養(yǎng)基，然后從土壤中分離純化出各種微生物，而形態(tài)觀察和其他實(shí)驗(yàn)所使用的菌種都是學(xué)生親自分離純化出來的，更能激發(fā)學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣。

3.3改進(jìn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)方法

由于微生物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果受制于多種因素影響，學(xué)生操作不熟練，其效果難以把握，因此課前預(yù)習(xí)是必需的。為了做好課前準(zhǔn)備，我將實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的視頻資料提前發(fā)到學(xué)生郵箱，并要求寫出預(yù)習(xí)報(bào)告。課堂采用多媒體實(shí)驗(yàn)教學(xué)與傳統(tǒng)實(shí)驗(yàn)教學(xué)相結(jié)合，即采取“講―看―做”或“邊做邊講，邊做邊看”的教學(xué)程序。首先實(shí)驗(yàn)教師介紹實(shí)驗(yàn)課的原理、目的，并結(jié)合多媒體讓學(xué)生觀看實(shí)驗(yàn)操作過程，同時(shí)講解實(shí)驗(yàn)操作的原則、步驟，以及技術(shù)要點(diǎn)、注意事項(xiàng)，等等。然后學(xué)生獨(dú)立進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作，在操作過程中根據(jù)實(shí)驗(yàn)的具體情況針對(duì)性地進(jìn)行講解和觀看視頻資料。這樣使學(xué)生操作的準(zhǔn)確性得到保證，同時(shí)獲得理想的實(shí)驗(yàn)效果。

3.4改革實(shí)驗(yàn)考核方式

微生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)是微生物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)內(nèi)容，也是其他相關(guān)課程的重要的基礎(chǔ)知識(shí)和基本技能，加強(qiáng)微生物基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)的考核對(duì)保證實(shí)驗(yàn)教學(xué)的質(zhì)量有明顯的促進(jìn)作用。我在具體實(shí)施中采用“預(yù)習(xí)報(bào)告＋操作考核＋實(shí)驗(yàn)報(bào)告＝基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)成績(jī)”的模式，進(jìn)一步提高操作考核在實(shí)驗(yàn)成績(jī)中的比重，操作考核在實(shí)驗(yàn)過程中進(jìn)行，對(duì)于關(guān)鍵的操作技能實(shí)行“一對(duì)一”的考核方式，確保了學(xué)生較為熟練地掌握該項(xiàng)技能。

4.微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革的效果

通過微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)改革，教學(xué)效果明顯增強(qiáng)。

4.1由于強(qiáng)化了預(yù)習(xí)環(huán)節(jié)的重要性，學(xué)生都能在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)前預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)教材，觀看實(shí)驗(yàn)過程的視頻資料，寫出預(yù)習(xí)報(bào)告，實(shí)驗(yàn)過程中都能迅速進(jìn)入狀態(tài)，操作的準(zhǔn)確性也得到了很大的提升，在增加了教學(xué)任務(wù)的情況下，能按時(shí)完成實(shí)驗(yàn)。

4.2學(xué)生學(xué)習(xí)興趣顯著提高，由于調(diào)整實(shí)驗(yàn)課教學(xué)的課程順序，學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)教學(xué)各環(huán)節(jié)有了更直觀的了解，學(xué)習(xí)興趣明顯提高。

4.3通過實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的整合，壓縮微生物學(xué)基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)教學(xué)的課時(shí)，學(xué)生有了進(jìn)行創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)的時(shí)間，更加注重創(chuàng)新能力的培養(yǎng)。學(xué)生創(chuàng)新能力得到提高，在“大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)計(jì)劃項(xiàng)目“、“挑戰(zhàn)杯”創(chuàng)新大賽、研究生招生考試等方面都顯現(xiàn)出相當(dāng)?shù)膬?yōu)勢(shì)。

參考文獻(xiàn)：

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［2］沈萍，范秀容，李廣武.微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)［M］.高等教育出版社，2003，5.

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【關(guān)鍵詞】調(diào)味品；微生物檢驗(yàn)；無菌操作

【中圖分類號(hào)】R156.3【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1005-0515(2011)12-0281-01

調(diào)味品是指包括醬油、醬類和醋等以豆類為原料發(fā)酵而制成的食品，是人們生活必備食品之一。由于調(diào)味品通常是利用微生物發(fā)酵工藝制得，如工藝控制不當(dāng)，滅菌處理不徹底很容易造成微生物的殘留和繁殖，影響產(chǎn)品的品質(zhì)甚至危及人們的身體健康。食品微生物檢驗(yàn)的目的就是要為生產(chǎn)出安全、衛(wèi)生、符合產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)的食品提供科學(xué)依據(jù)，因而對(duì)食品微生物進(jìn)行檢驗(yàn)至關(guān)重要。食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)都制定了菌落總數(shù)、大腸菌群和致病菌等微生物指標(biāo)來控制產(chǎn)品質(zhì)量，國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中也對(duì)調(diào)味品的微生物學(xué)檢驗(yàn)方法、步驟做了具體規(guī)定，但在實(shí)際工作中還存在著許多復(fù)雜因素，忽視這些因素很可能給檢驗(yàn)結(jié)果帶來偏差，甚至錯(cuò)誤。本人就調(diào)味品微生物檢驗(yàn)中應(yīng)注意的幾個(gè)環(huán)節(jié)談幾點(diǎn)認(rèn)識(shí)。

1人的因素

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)該由具有一定資質(zhì)的微生物學(xué)或相近專業(yè)的人來操作，必須經(jīng)考核合格后持證上崗，檢驗(yàn)人員必須有強(qiáng)烈的責(zé)任意識(shí)，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程，具有較熟練的操作技能。微生物檢驗(yàn)人員不僅要有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ鲬B(tài)度,還要具有質(zhì)量意識(shí),有發(fā)現(xiàn)問題!解決問題的能力"不僅要掌握微生物學(xué)的有關(guān)基礎(chǔ)知識(shí),還要掌握國(guó)家食品衛(wèi)生微生物檢驗(yàn)方法[1]GB/T4789-2003!調(diào)味品的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)!行業(yè)標(biāo)準(zhǔn),熟悉標(biāo)準(zhǔn)化法!計(jì)量法規(guī)的相關(guān)知識(shí),熟悉調(diào)味品的生產(chǎn)工藝。

2培養(yǎng)基和試劑

培養(yǎng)基和試劑應(yīng)該有供應(yīng)商提品質(zhì)控證書，并以外觀、批號(hào)、PH值、滅菌要求、選擇性等進(jìn)行初步評(píng)估，質(zhì)量必須符合有關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，再按照說明書的貯藏條件保存。培養(yǎng)基應(yīng)在玻璃容器內(nèi)配制，避免與銅、鐵制器皿接觸，配制過程應(yīng)嚴(yán)格按GB/T4789-2003及新國(guó)標(biāo)GB4789-2010的相關(guān)內(nèi)容規(guī)定。配制時(shí)按規(guī)定的配方和順序添加，不得隨意更改，并使用蒸餾水，以免自來水中的漂白粉、氯氣等抑制微生物生長(zhǎng)[2]。培養(yǎng)基配好后，先調(diào)節(jié)PH值，再高壓蒸汽滅菌，并應(yīng)及時(shí)使用，即使4℃冰箱存放，也要在2周內(nèi)用完，已開封用過的培養(yǎng)基不得再次使用。有條件可參加國(guó)際食品微生物與食品衛(wèi)生委員會(huì)（ICFMH）提供的關(guān)于培養(yǎng)基質(zhì)控方法進(jìn)行質(zhì)控，配制培養(yǎng)基和藥劑應(yīng)有原始記錄，保證檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的可溯源性。

3設(shè)施、環(huán)境

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)具有進(jìn)行微生物檢驗(yàn)適宜充分的設(shè)施條件，包括檢測(cè)設(shè)施（專用于微生物檢測(cè)和相關(guān)活動(dòng)）及輔助設(shè)施（大門、走廊、管理區(qū)、樣品區(qū)、清潔間）特殊的設(shè)備要在特殊的環(huán)境下放置和操作。

3.1無菌實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)應(yīng)符合GB19489的規(guī)定，符合無回路的原則，設(shè)有人流和物流通道。

3.2儀器設(shè)備:

微生物檢驗(yàn)室應(yīng)配備足夠檢驗(yàn)工作需要的儀器設(shè)備，包括恒溫培養(yǎng)箱、電熱干燥箱、高壓蒸汽滅菌器、天平、恒溫水浴、生物顯微鏡、凈化工作臺(tái)及移液管、試管、平皿、廣口瓶等玻璃器皿。儀器設(shè)備、計(jì)量器具應(yīng)由計(jì)量檢定部門檢定合格，嚴(yán)格按照操作規(guī)程要求使用，填寫儀器設(shè)備的使用記錄。貴重儀器設(shè)備應(yīng)有專人管理。定期對(duì)儀器設(shè)備進(jìn)行維護(hù)、校準(zhǔn)和做好設(shè)備的期間核查工作，保證儀器設(shè)備處于良好的工作狀態(tài)[3]。用具刷洗徹底、無殘留物，無菌用品使用高壓蒸汽殺菌，并烘干備用。殺菌后物品在一個(gè)星期內(nèi)未使用，需重新殺菌。對(duì)于容量較大的密閉容器，殺菌前瓶?jī)?nèi)應(yīng)裝入少量水，將容器蓋子略旋開，以使容器內(nèi)部能形成蒸汽進(jìn)行有效地殺菌。每次殺菌應(yīng)使用橫變?cè)嚰垯z查殺菌溫度是否達(dá)到要求。

4樣品采集

樣品的采集必須具有代表性,要考慮到各種影響樣品質(zhì)量的因素,防止樣品受到外源性污染,防止樣品變質(zhì)和細(xì)菌生長(zhǎng)，采樣必須在無菌操作下進(jìn)行,所謂無菌操作是指杜絕任何病原性或非病原性微生物進(jìn)入樣品。采樣要按照我國(guó)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行,樣品要登記并注明名稱!數(shù)量!批號(hào)!采樣日期等，不同的調(diào)味品要采用不同的運(yùn)輸和保存方法，可根據(jù)情況參照國(guó)際食品規(guī)格委員會(huì)(ICMSF)推薦的食品采樣方法和標(biāo)準(zhǔn)建立可靠的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法以保證樣品合格[4]。樣品的采取必須具有代表性，一般應(yīng)采取完整未開封的樣品,散裝樣品必須在無菌操作條件下使用無菌器具采集樣品送到實(shí)驗(yàn)室，不應(yīng)超過3~4h,否則應(yīng)置于低溫環(huán)境中待檢。

5檢驗(yàn)

5.1方法:

檢驗(yàn)方法是食品微生物實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保證的重要步驟,目前食品微生物檢驗(yàn)必須按照食品衛(wèi)生檢驗(yàn)方法微生物學(xué)部分所規(guī)定的檢驗(yàn)方法操作或其他官方認(rèn)可的方法進(jìn)行，微生物檢驗(yàn)必須按無菌操作要求進(jìn)行。在檢驗(yàn)過程中還要注意三點(diǎn):(1)做平行樣,以保證結(jié)果的可比性；(2)設(shè)立空白對(duì)照,以防止其它污染而導(dǎo)致的結(jié)果不準(zhǔn)確；(3)設(shè)計(jì)合適的質(zhì)控頻率,進(jìn)行質(zhì)控試驗(yàn)，將質(zhì)控菌株與常規(guī)工作一起進(jìn)行,不能專人專做，當(dāng)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)菌株的內(nèi)在敏感性發(fā)生改變時(shí)要更換新的菌種。

5.2操作:

(1)操作人員必須牢固樹立無菌觀念,整個(gè)操作均要求無菌操作,盡量靠近火焰,動(dòng)作要迅速,從微生物的分離、純化到接種,手法規(guī)范，嚴(yán)格按照GB/T4789食品微生物檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)中的操作規(guī)程進(jìn)行檢驗(yàn)。

(2)進(jìn)入無菌室從樣品的制備到檢驗(yàn)都要為防止二次污染采取必要措施,如樣品及器皿擺放整齊便于操作,操作過程熟練。

(3)樣品取樣時(shí)用無菌工具無菌操作取樣。

(4)原始記錄要真實(shí)準(zhǔn)確,不得隨意填寫，按照GB/T4789標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行數(shù)據(jù)處理及結(jié)果判定。

6結(jié)果與報(bào)告

檢測(cè)結(jié)果應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、客觀的在檢驗(yàn)報(bào)告中進(jìn)行表述,要注意計(jì)算、書寫,如有涂改,要以杠改,并簽上檢測(cè)人姓名,經(jīng)審核人員核查簽字并蓋章后生效，檢驗(yàn)原始記錄應(yīng)及時(shí)記載，格式要求有足夠的信息量,并具有可朔源性,如有第幾法要求也應(yīng)標(biāo)注清楚,不應(yīng)混記。

綜上所述,只要我們遵守職業(yè)道德,嚴(yán)謹(jǐn)科學(xué)態(tài)度,注意以上幾個(gè)環(huán)節(jié)就能使我們調(diào)味品微生物檢驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性得以保證,以把好調(diào)味品衛(wèi)生和安全提供可靠依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

［1］GB/T4789-2003，食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)［S］.北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003。

［2］陳劍剛.B/T15481-2000標(biāo)準(zhǔn)在衛(wèi)生檢驗(yàn)質(zhì)量控制中的應(yīng)用［J］.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2002,12（4）：487。

篇10

關(guān)鍵詞：微生物學(xué);教學(xué)改革;制藥工程專業(yè)

中圖分類號(hào)：G642.0 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A 文章編號(hào)：1674-9324（2016）42-0128-02

一、目前存在的問題

我校制藥工程專業(yè)將專業(yè)定位成工程類，開設(shè)了較多工程類的課程，對(duì)微生物學(xué)這門課程不夠重視;該課程設(shè)置為專業(yè)選修課、考查課;缺少實(shí)踐環(huán)節(jié);缺少專業(yè)特色。使學(xué)生走進(jìn)“制藥工程只需要面對(duì)制藥的儀器設(shè)備，知道制藥的工藝就可以了，微生物學(xué)對(duì)我們專業(yè)沒用”的誤區(qū)。導(dǎo)致學(xué)生學(xué)習(xí)微生物學(xué)的動(dòng)力和興趣都不高。因此，有必要對(duì)制藥工程專業(yè)微生物學(xué)的教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方法等方面進(jìn)行改革和思考，幫助學(xué)生走出誤區(qū)。

目前關(guān)于制藥工程專業(yè)的微生物學(xué)教學(xué)的探討相對(duì)較少，僅從教材和實(shí)驗(yàn)教學(xué)有少量探討。因此結(jié)合銅仁學(xué)院制藥工程專業(yè)教學(xué)課時(shí)較少，缺少實(shí)踐部分教學(xué)安排，考核方式為考查等課程設(shè)置中出現(xiàn)的問題，課題組從教學(xué)內(nèi)容、教學(xué)方式、教學(xué)手段、考核方式等方面對(duì)該專業(yè)微生物學(xué)課程教學(xué)進(jìn)行了有益的探索，為促進(jìn)制藥工程專業(yè)微生物學(xué)教學(xué)的完善，為培養(yǎng)應(yīng)用型人才奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

二、選擇教材和教學(xué)內(nèi)容

1.教材選定。教材選擇方面充分考慮銅仁學(xué)院制藥工程人才培養(yǎng)方案的設(shè)置，突破原有的一門課程一本教材的固有觀念。選擇滿足既要基礎(chǔ)知識(shí)又要專業(yè)應(yīng)用相關(guān)知識(shí)的專業(yè)需求的教材。但目前尚無專門針對(duì)制藥工程專業(yè)的微生物教材。因此，初步確定教材選用黃秀梨主編的《微生物學(xué)》與沈關(guān)心主編的《微生物學(xué)與免疫學(xué)》。

2.教學(xué)內(nèi)容選定。（1）理論教學(xué)內(nèi)容。教學(xué)內(nèi)容選擇主要從幫助學(xué)生建立系統(tǒng)的微生物學(xué)概念，以及聯(lián)系藥物的生產(chǎn)實(shí)際，理解微生物與藥物及藥物生產(chǎn)的關(guān)系兩個(gè)方面著手考慮。黃秀梨主編的《微生物學(xué)》的內(nèi)容作為微生物學(xué)基礎(chǔ)知識(shí)部分，幫助學(xué)生建立有菌、無菌、什么菌的概念和意識(shí);掌握微生物生長(zhǎng)和繁殖、代謝，微生物控制、菌種保藏等制藥工程專業(yè)密切相關(guān)的微生物基本知識(shí)。沈關(guān)心主編的《微生物學(xué)與免疫學(xué)》的內(nèi)容作為微生物在制藥專業(yè)中應(yīng)用的知識(shí)，幫助學(xué)生了解藥物生產(chǎn)過程中微生物的影響和處理方式、微生物藥物的重要地位、研究步驟、生產(chǎn)過程;了解常見的病原微生物等。結(jié)合專業(yè)特點(diǎn)深入介紹微生物在制藥中的應(yīng)用對(duì)制藥過程的影響;有害微生物的控制;抗生素的制備及應(yīng)用;微生物其他產(chǎn)物在制藥中的應(yīng)用;藥品的微生物學(xué)質(zhì)量控制;藥品的微生物學(xué)質(zhì)量控制等微生物在制藥應(yīng)用的相關(guān)知識(shí)。（2）實(shí)踐教學(xué)內(nèi)容。銅仁學(xué)院制藥工程專業(yè)也同其他大多數(shù)高校的制藥工程專業(yè)一樣忽略了微生物學(xué)在制藥工程中的重要性，課程中未設(shè)置實(shí)驗(yàn)課程。為幫助學(xué)生掌握微生物學(xué)的基本實(shí)驗(yàn)機(jī)能，增加了實(shí)驗(yàn)課，主要包括培養(yǎng)基制備、接種、培養(yǎng)，自然界純種微生物分離，細(xì)菌檢查及其生理生化反應(yīng)，菌種保藏等以微生物控制為基礎(chǔ)的實(shí)驗(yàn)課程。使學(xué)生掌握微生物研究與應(yīng)用的基本技術(shù)，培養(yǎng)學(xué)生發(fā)現(xiàn)問題、獨(dú)立思考與創(chuàng)新思維能力，增加學(xué)生就業(yè)面。

三、合理的教學(xué)方法

在教學(xué)過程中，同時(shí)針對(duì)不同的內(nèi)容，采取不同的教學(xué)方法?？傮w思路為基于學(xué)生已有的知識(shí)，以微生物在制藥工程中應(yīng)用的實(shí)例為主線引導(dǎo)學(xué)生主動(dòng)學(xué)習(xí)書本知識(shí)。讓學(xué)生感受到微生物在自己專業(yè)中是如何應(yīng)用，引起學(xué)生對(duì)微生物學(xué)的興趣，再講解基本原理等重點(diǎn)和難點(diǎn)。

1.探討式。借鑒慕課的教學(xué)方式，學(xué)習(xí)之前先提出問題或案例，要求學(xué)生課前進(jìn)行學(xué)習(xí)，課堂上分組就問題或案例用微生物學(xué)知識(shí)進(jìn)行討論討論。例如抗生素頭孢的生產(chǎn)，在課前首先提出分組查閱頭孢的生產(chǎn)過程、生產(chǎn)菌株，產(chǎn)生的機(jī)理，生產(chǎn)過程中微生物需要如何控制，如何確定藥品的質(zhì)量等內(nèi)容，再回到課堂就自己查閱到的知識(shí)與同學(xué)交流、探討。以此活躍課堂氣氛、引起學(xué)生濃厚的興趣。對(duì)于學(xué)生不懂的知識(shí)，充分利用學(xué)生已有的知識(shí)逐步引導(dǎo)學(xué)生理解，取得了很好的教學(xué)效果。

2.研究式。教學(xué)過程中注意將最新的研究引入到教學(xué)中，豐富和更新教學(xué)內(nèi)容，提高教學(xué)效果。通過建立以科研輔助教學(xué)，以教學(xué)促進(jìn)科研的互補(bǔ)的模式。引導(dǎo)學(xué)生培養(yǎng)科研思維、學(xué)習(xí)科學(xué)研究方法。鼓勵(lì)有興趣的學(xué)生參加教師的科研項(xiàng)目，參與鍛煉動(dòng)手操作，發(fā)現(xiàn)問題、解決問題的能力，提高學(xué)生的科研素質(zhì)。

3.自學(xué)式。對(duì)于內(nèi)容相對(duì)簡(jiǎn)單，學(xué)生容易理解，并且有較多獲得渠道的部分章節(jié)選擇由學(xué)生自學(xué)，利用少量的課堂時(shí)間，讓學(xué)生上講臺(tái)講解自己學(xué)習(xí)的知識(shí)。既可以促進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí)的興趣，同時(shí)還能鍛煉學(xué)生表達(dá)能力、語言組織能力，幫助學(xué)生克服怯場(chǎng)或膽小的問題，提高學(xué)生的自信。

四、多樣化教學(xué)手段

根據(jù)微生物學(xué)的特點(diǎn)，在教學(xué)過程中借用現(xiàn)代化手段，幫助學(xué)生理解。將文字、圖片、動(dòng)畫、視頻、聲音等手段將內(nèi)容簡(jiǎn)潔、直觀地展現(xiàn)在學(xué)生面前。節(jié)約時(shí)間的同時(shí)進(jìn)一步提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣。

五、考核

通過教學(xué)內(nèi)容的選擇，教學(xué)方法的搭配雖然能在一定程度上提高學(xué)生學(xué)習(xí)興趣，促進(jìn)學(xué)生自主學(xué)習(xí);但尚不足幫助學(xué)生合理分配學(xué)習(xí)壓力。需要通過合理設(shè)置考核方式、考核內(nèi)容，將學(xué)習(xí)壓力分散到學(xué)期的各個(gè)時(shí)段?？己朔譃槠綍r(shí)考核與期末考核兩部分，比例為平時(shí)考核50%;期末考核50%。平時(shí)考核中包括4次課堂考核占50%，平時(shí)作業(yè)，課堂討論，課堂講解，考勤、平時(shí)回答問題分別占10%;期末考核包括期末筆試和實(shí)驗(yàn)考核分別占70%和30%。實(shí)驗(yàn)考核通過期末操作考核體現(xiàn)。可提高學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)的重視。