導(dǎo)語(yǔ)：心肌梗死后心衰管理論文一文來(lái)源于網(wǎng)友上傳，不代表本站觀點(diǎn)，若需要原創(chuàng)文章可咨詢(xún)客服老師，歡迎參考。

【摘要】目的觀察芪藶強(qiáng)心膠囊對(duì)心力衰竭模型鼠梗死區(qū)膠原蛋白表達(dá)和成熟的影響，探討其抗心肌纖維化的機(jī)制。方法將通過(guò)結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支并飼養(yǎng)4w的56只心衰模型鼠隨機(jī)分為心衰模型組、雷米普利組、芪藶強(qiáng)心膠囊小及大劑量組，并設(shè)假手術(shù)組。同步藥物干預(yù)4w后，應(yīng)用RTPCR檢測(cè)梗死區(qū)膠原ⅠmRNA。應(yīng)用氯胺T法定量檢測(cè)梗死區(qū)總膠原含量。結(jié)果三組藥物均有效降低了梗死區(qū)膠原ⅠmRNA的表達(dá)和總膠原的水平（P＜0.05）。其中芪藶強(qiáng)心膠囊大劑量組和雷米普利組效果相似（P＞0.05），均優(yōu)于芪藶強(qiáng)心膠囊小劑量組（P＜0.05）。結(jié)論芪藶強(qiáng)心膠囊能夠明顯地減少心梗后心力衰竭梗死區(qū)膠原進(jìn)一步合成和成熟，減少瘢痕區(qū)纖維化，并具有明顯的劑量依賴(lài)性。

【關(guān)鍵詞】芪藶強(qiáng)心膠囊；膠原Ⅰ；羥脯氨酸；纖維化

在分子水平上，心衰心室重構(gòu)表現(xiàn)為心肌細(xì)胞增生，肥大，間質(zhì)內(nèi)的纖維細(xì)胞的增殖和成熟膠原生成增加。研究表明〔1〕血管緊張素Ⅱ（AngⅡ）在心梗后心衰的纖維細(xì)胞增殖、膠原合成及基質(zhì)重構(gòu)中發(fā)揮重要作用。血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑（ACEI）治療心梗后左室重構(gòu)療效確切，這一點(diǎn)在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床上已經(jīng)被證實(shí)。芪藶強(qiáng)心膠囊作為一種新型的治療慢性心力衰竭的口服通絡(luò)藥物。根據(jù)中醫(yī)辯證施治機(jī)制，除以利水消腫藥治標(biāo)外，以益氣溫陽(yáng)藥治其病本，輔以活血通絡(luò)藥，達(dá)到氣旺血行絡(luò)通，阻斷血瘀絡(luò)阻的病理中心環(huán)節(jié)。藥理研究表明〔2〕芪藶強(qiáng)心膠囊既能改善血流動(dòng)力學(xué)，具有傳統(tǒng)強(qiáng)心、利尿和擴(kuò)血管緩解心力衰竭癥狀的作用，又能明顯抑制腎素血管緊張素醛固酮（RAS）系統(tǒng)，減少心室重塑，改善心力衰竭。本試驗(yàn)擬通過(guò)不同劑量芪藶強(qiáng)心膠囊與抗心室重構(gòu)機(jī)制和療效確切的ACEI對(duì)實(shí)驗(yàn)性心梗后心力衰竭大鼠梗死區(qū)心肌纖維化程度的比較，探討芪藶強(qiáng)心膠囊改善心室重構(gòu)的機(jī)制。

1材料與方法

1.1試劑雷米普利由北京安萬(wàn)特制藥有限公司生產(chǎn)。芪藶強(qiáng)心藥粉由石家莊以嶺藥業(yè)集團(tuán)贈(zèng)送，每克芪藶強(qiáng)心膠囊粉相當(dāng)于6.325g生藥。RTPCR試劑盒購(gòu)自寶生物工程（大連）有限公司。引物由上海生工生物工程有限公司合成。

1.2動(dòng)物模型隨機(jī)取健康100只體重200～240gWistar大鼠（雌鼠40只，雄鼠60只），由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院動(dòng)物室提供。采用左前降支冠狀動(dòng)脈結(jié)扎術(shù)制備心衰模型，參考文獻(xiàn)〔3〕方法，應(yīng)用4%水合氯醛麻醉，快速打開(kāi)胸廓，暴露心臟，在左心耳下約2mm處的冠狀動(dòng)脈左前降支用6/0線(xiàn)結(jié)扎，迅速關(guān)閉胸腔并縫合，復(fù)蘇動(dòng)物。同時(shí)另取8只大鼠（雌鼠4只，雄鼠4只），同樣的方法手術(shù)，但術(shù)中只掛線(xiàn)，不結(jié)扎，作為假手術(shù)組。術(shù)后每天予青霉素24萬(wàn)U/kg，共3d，預(yù)防感染。飼養(yǎng)4w。

1.3動(dòng)物分組及給藥術(shù)后4w心衰模型大鼠存活61只（雌鼠28只，雄鼠33只）存活率61%（雌鼠70%，雄鼠55%）。隨機(jī)選取存活鼠56只（雌雄鼠各28只），將其分為：心衰模型組（n=16,1ml自來(lái)水灌胃），雷米普利組（n=16，10mg/kg體重）、芪藶強(qiáng)心膠囊大劑量組（n=12，1.0g/kg體重）、芪藶強(qiáng)心膠囊小劑量組（n=12，0.25g/kg體重），每組大鼠雌雄各半。上述藥物溶于1ml自來(lái)水中灌胃。所有實(shí)驗(yàn)大鼠均自由飲食，分籠飼養(yǎng)，給藥過(guò)程中無(wú)一例死亡。

1.4標(biāo)本采集給藥4w后，處死大鼠，隨機(jī)選取其中一半心肌組織（雌雄各半）檢測(cè)膠原Ⅰ蛋白及mRNA的表達(dá)，另一半（雌雄各半）用于羥脯氨酸定量檢測(cè)。

1.5梗死區(qū)心肌組織中膠原ⅠmRNA的檢測(cè)用Trizol試劑處理梗死區(qū)心肌組織提取總RNA。使用逆轉(zhuǎn)錄酶將3μg總RNA合成CDNA。膠原Ⅰ及βactin通過(guò)GenBank獲得,并設(shè)計(jì)引物。膠原Ⅰ的上游引物5′AGGGTCATCGTGGCTTCTC3′，下游引物5′ACCTTCGCTTCCATACTCG3′。βactin上游引物5′GCTCGTCGTCGACAACGGCTC3′，下游引物5′CAAACATGATCTGGGTCATCTTCTC3′。取3μl逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物分別應(yīng)用上述蛋白的上下游引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性5min，95℃變性40s，54℃退火30s，72℃延伸45s，循環(huán)30次，最后72℃延伸10min。取10μlPCR反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行1.5%瓊脂糖電泳，光密度掃描后圖片經(jīng)ImageJ軟件分析，結(jié)果以檢測(cè)蛋白/βactin的積分光密度比值表示。

1.6氯胺T法檢測(cè)梗死區(qū)膠原的含量稱(chēng)取梗死區(qū)組織的干重，采用氯胺T法檢測(cè)經(jīng)6mol/LHCl酸化的心肌組織，應(yīng)用NaOH中和，分別加入氯胺T和Ehrlich顯色劑后在分光光度分析儀上檢測(cè)558nm波長(zhǎng)的蛋白肽的量。根據(jù)NaOH中和后的體積計(jì)算出樣品中羥脯氨酸的量。由于羥脯氨酸在膠原占13.4%，比值恒定，故羥脯氨酸的量直接反映組織中膠原含量。因此，梗死區(qū)膠原含量表達(dá)方法就采用羥脯氨酸（μg）/梗死區(qū)心肌干重（mg）〔4〕。

1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)方法數(shù)據(jù)以x±s表示，采用SPSS11.0軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)。應(yīng)用onewayANOVA方差分析，多組間的相關(guān)性比較采用t檢驗(yàn)，多組間的兩兩比較采用費(fèi)希爾的LSD法。

2結(jié)果

2.1心臟梗死區(qū)心肌膠原ⅠmRNA的表達(dá)其他4組膠原ⅠmRNA表達(dá)明顯高于假手術(shù)組〔0.0763±0.03212，P＜0.001〕，芪藶強(qiáng)心膠囊大劑量組膠原ⅠmRNA表達(dá)〔0.4127±0.12743〕與雷米普利組〔0.4246±0.17401〕接近，差異不顯著（P＞0.05）。芪藶強(qiáng)心膠囊小劑量組〔0.5814±0.16170〕低于心衰模型組〔0.7382±0.16463〕（P＜0.05），但高于芪藶強(qiáng)心膠囊大劑量和雷米普利組（P＜0.05）（見(jiàn)圖1）。

圖1各組梗死區(qū)心肌組織膠原ⅠmRNA的表達(dá)

2.2梗死區(qū)心肌組織膠原含量的檢測(cè)與心衰模型組〔(20.0±6.2)μg/mg〕和假手術(shù)組〔(3.7±1.9)μg/mg〕比較，3個(gè)治療組膠原含量均顯著下降（P＜0.05，P＜0.001）。芪藶強(qiáng)心膠囊大劑量〔(10.7±3.7)μg/mg〕與雷米普利組〔(10.5±2.7)μg/mg〕下調(diào)膠原的作用相似，差異不顯著（P＞0.05）。芪藶強(qiáng)心膠囊小劑量〔(15.6±1.5)μg/mg〕亦使膠原水平下調(diào)（P＜0.05），但效果不及芪藶強(qiáng)心膠囊大劑量組和雷米普利組（P＜0.05）。

3討論

基質(zhì)是心臟的支架性結(jié)構(gòu)，膠原作為主要成分對(duì)于維持心臟形態(tài)、保證心肌細(xì)胞規(guī)律性排列及收縮、舒張的有效性起主要作用。